张培君
- 作品数:150 被引量:465H指数:14
- 供职机构:北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 溶血性默罕氏菌(Mannhe imia haemolytica)PCR方法的研究
- 溶血性默罕氏菌(Mannheimia haemolytica)是巴氏杆菌科的一个新成员,它以前归类于溶血性巴氏杆菌[1、2、3]。1999年,根据核糖体分型、多位点酶电泳、16S rRNA序列比较和DNA-DNA杂交试验...
- 张培君JeanetteMiflinPatBlackall孙惠玲龚玉梅苗得园
- 文献传递
- 鸡传染性鼻炎单抗阻断ELISA诊断试剂盒的研究被引量:17
- 1999年
- 本研究在单抗阻断ELISA方法的基础上成功地建立了鸡传染性鼻炎阻断ELISA诊断试剂盒,结果证明,本盒具有较子的敏感性、特异性和重复性,在对临床病鸡、人工感染鸡和免疫鸡的检测中,A型检出率可高达75%-90%,C型的检出率也可达到60%。试剂盒在37℃可保存7天以上,4℃可保存10个月,-20℃可保存1年以上。是一种适合推广应用的良好的鸡传染生鼻炎诊断产品。
- 苗得园张培君龚玉梅
- 关键词:试剂盒传染性鼻炎ELISA
- 副鸡禽杆菌aroA基因克隆及序列分析
- 2012年
- 旨在建立一种方便、高效的同源保守基因克隆方法,并对副鸡禽杆菌aroA基因进行克隆和结构分析。本试验以副鸡禽杆菌国际标准株145(C-3)基因组DNA为模板,用CODEHOP软件设计针对aroA基因的兼并引物,并运用改进的染色体步移方法扩增aroA基因序列;对该核酸序列及其编码蛋白进行结构分析并与该菌其他血清型及相关细菌进行序列比对分析。结果显示,获得了完整的aroA基因,全长1 293 bp。该基因编码由430个氨基酸组成的多肽,具有2个功能位点和5个抗原表位位点。不同血清型间氨基酸序列同源性为88.1%-100%,与其他相关细菌核酸同源性为75%以上。首次将兼并PCR和改进的染色体步移技术结合起来对副鸡禽杆菌aroA基因全长进行扩增研究,得到了预期的结果。
- 吕学泽梁玉荣贺云霞张培君龚玉梅王宏俊
- 关键词:副鸡禽杆菌基因克隆蛋白结构分子进化
- 猪传染性胃肠炎病毒N蛋白基因克隆及表达载体构建
- 以本实验室从河北分离到的TGEV毒株,采用RT-PCR技术扩增了TGEVN基因,长为1149bp,并进行亚克隆重组到PMD18-T质粒载体上,连接,转化,鉴定后得到阳性重组质粒,命名为pTN,将重组质粒插入的片段进行序列...
- 张莉翁崇鹏张培君
- 关键词:猪传染性胃肠炎病毒N基因分子克隆
- 文献传递
- 单抗夹心LAB-ELISA检测猪伪狂犬病病毒的研究被引量:22
- 2001年
- 在伪狂犬病病毒种特异性单克隆抗体的基础上建立了检测该病毒抗原的单抗夹心LAB -ELISA方法。结果表明 ,该方法不与其他常见病原体产生交叉反应 ,抗原的最低检出含量为 8 9μg/mL。检测时最佳采样部位是猪脑及扁桃体。对人工感染兔、自然感染猪以及临床可疑病猪的检出率分别为 75% ,75%及 72 7% ,因此本方法是一种具有良好特异性及较好敏感性的诊断方法。
- 苗得园杨兵李富强张培君龚玉梅李永清付磊高配亮
- 关键词:猪伪狂犬病病毒免疫检测
- 鸡传染性鼻炎和新城疫二联油佐剂灭活疫苗的研究(Ⅱ)
- 1996年
- 在(Ⅰ)报的基础上,又进行了鸡传染性鼻炎和新城疫二联油佐剂灭活疫苗的最小免疫剂量、保存期、免疫持续期及中试疫苗效力检验。结果表明,二联苗中ND和IC的最小免疫剂量分别为0.02ml和0.2ml(Hpg-8、Hpg-668分别为1亿、2亿CFU);疫苗在4-8℃下保存期为1年;一次、两次免疫的免疫持续期分别为160天和整个产卵期;5批中试疫苗的效检结果IC保护90-100%,ND为100%,本苗效果不低于两种进口的同类疫苗。
- 张培君龚玉梅樊玉珍陈小玲宾业矩赵文莲冯文达
- 关键词:鸡病传染性鼻炎新城疫疫苗
- A型副鸡嗜血杆菌血凝素基因的克隆表达及其产物的生物学活性鉴定被引量:6
- 2006年
- 根据GenBank中登录的A型Hpg Hp8株血凝素基因序列,设计合成了1对特异性引物,以Hpg Hp8株中提取的细菌DNA为模板,利用PCR扩增了Hpg血凝素全长基因(1 035 bp),将其克隆到pET-32a(+)载体上,构建了原核表达载体pET-HA,表达并纯化了重组蛋白,通过免疫印迹及血凝和血凝抑制试验鉴定了该重组蛋白的生物学活性。结果显示,表达并纯化的HpgHA重组血凝素蛋白可以和A型Hpg抗血清特异性结合,并且可以凝集鸡红细胞。表明,成功地构建了Hpg血凝素基因的原核表达载体,并表达、纯化了具有凝集鸡红细胞活性的Hpg-HA融合蛋白。
- 王宏俊张培君龚玉梅李永清陈小玲杨汉春
- 关键词:副鸡嗜血杆菌血凝素基因原核表达
- A型、B型和C型副鸡禽杆菌致病力试验报告
- 为修订鸡传染性鼻炎灭活疫苗、鸡传染性鼻炎和新城疫二联灭活疫苗有关鸡传染性鼻炎部分效检标准,本文进行了A型C-Hpg 8(CVCC254)、B型(北京株)和C型(668)副鸡禽杆菌致病力试验,并对试验安排和结果进行了介绍。
- 龚玉梅张培君孙惠玲王宏俊贺云霞
- 关键词:鸡传染病传染性鼻炎灭活疫苗
- 文献传递
- 副鸡嗜血杆菌人工感染鸡抗体动态的研究被引量:1
- 2001年
- :本研究采用阻断ELISA(B -ELISA)和血凝抑制试验 (HI)方法 ,检测了鸡体分别人工感染副鸡嗜血杆菌Hp8株 (A型 )和H668株 (C型 )后 0~ 9周的血清抗体消长情况 ,并绘制了示意抗体曲线。结果表明 ,Hp8人工感染后 ,从第 2周到第 9周 ,B -ELISA阳性检出率一直保持 10 0 % ,其中抗体效价在感染后第 4周达到效价高峰 ,平均约为 15 2。而H668人工感染鸡则在感染后第 7周检出率最高 ,此后急剧下降。HI方法对A型抗体的阳性检出率亦在第 4~ 5周达到高峰 ,而对C型抗体的检出率一直较低。结果进一步显示了B -ELISA良好的特异性和敏感性 ,为本方法及其试剂盒产品的进一步应用提供了参考。
- 苗得园张培君龚玉梅佟瑞平张立昌
- 关键词:血凝抑制试验副鸡嗜血杆菌传染性鼻炎
- 副猪嗜血杆菌杆菌PCR试剂盒的研究
- 副猪嗜血杆菌可引起猪的多发性浆膜炎和关节炎(Glasser’s disease),副猪嗜血杆菌是猪上呼吸道的一种共栖菌,属条件性致病菌,常与猪圆环病毒、猪流感病毒、猪肺炎支原体、多杀性巴氏杆菌等混合感染,给养猪业造成较大...
- 徐慧张培君韦莉王宏俊龚玉梅孙惠玲施蕾
- 文献传递