张燕丽
- 作品数：18 被引量：21H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：甘肃省科技重大专项计划公益性行业(农业)科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生天文地球更多>>
- 刚地弓形虫代谢分泌抗原对山羊IFN-γ、TNF-α、IL-2和IL-4表达水平的影响被引量：3
- 2009年
- 为了探索刚地弓形虫代谢分泌抗原(E/SA)对山羊的免疫保护机制,将山羊随机分为6组,即E/SA组、E/SA+CpG组(未乳化)、E/SA+CpG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CpG组、对照组,每组3只,分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集山羊血清,用ELISA法检测IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的表达水平。结果显示,各免疫组免疫后IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的含量分别为175.40～215.60、89.95～253.80、230.40～301.50、39.20～54.20pg/mL,而免疫前分别为14.00～18.75、30.91～42.20、10.75～18.30、20.40～24.60pg/mL,对照组分别为16.50～36.56、37.75～58.20、11.50～21.75、21.61～27.60pg/mL,免疫组在免疫后体内IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的含量明显升高,均显著高于对照组(P<0.05)。表明,E/SA可引起IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4水平的升高,说明E/SA免疫后可引起山羊较强的细胞免疫和体液免疫应答。
- 芦赟张燕丽曹丽艳王艳华苟惠天付宝权李文卉张德林
- 关键词：刚地弓形虫干扰素-Γ白细胞介素-2白细胞介素-4
- 弓形虫代谢分泌抗原对猪T细胞亚群的影响被引量：1
- 2009年
- 为了研究弓形虫代谢分泌抗原对仔猪T细胞亚群及抗体的影响,将仔猪随机分为6组,每组5只,分别为E/SA组、E/SA+CPG(未乳化)组、E/SA+CPG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CPG组及对照组。分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集仔猪外周血,用流式细胞仪对各试验组外周血中CD4+及CD8+T淋巴细胞亚群的动态变化规律进行检测,用IHA对抗弓形虫抗体水平做检测。结果显示,弓形虫代谢分泌抗原免疫仔猪后第4周,免疫组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞水平和特异性抗体效价与对照组相比均有大幅度升高;感染后第1周,免疫组CD4+T细胞水平及CD4+/CD8+比值较感染前有不同程度降低,感染后第2周,免疫组CD4+T细胞水平及CD4+/CD8+比值上升至免疫后水平,CD8+水平下降,感染后特异性抗体效价进一步升高。表明,弓形虫代谢分泌抗原能够提高仔猪外周血CD4+及CD8+T淋巴细胞水平和特异性抗体水平。
- 蔡志杰王艳华付宝权李文卉芦赟张燕丽曹丽艳张德林
- 关键词：弓形虫T细胞亚群抗体水平
- 弓形虫GJS株表面抗原1基因的克隆及真核表达质粒的构建
- 曹丽艳赵晋军张燕丽芦赟王艳华苟惠天付宝权张德林
- 弓形虫GJS株表面抗原1基因的原核细胞表达及其抗原性分析
- 曹丽艳张德林张燕丽芦赟蔡志杰王艳华赵晋军
- 刚地弓形虫GJS株微线体蛋白3基因真核表达质粒的构建及在BHK-21细胞中的表达被引量：9
- 2009年
- 采用PCR技术从刚地弓形虫GJS株基因组DNA中扩增微线体蛋白3(MIC3)基因,并克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。将重组质粒转染BHK-21细胞。间接免疫荧光染色证明,质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达。Western-blot分析证实,细胞裂解液及上清样品中有1条约39.2 ku的条带,可被山羊抗刚地弓形虫超免疫血清所识别,大小与预测值相符。表明,真核表达质粒pcDNA3-MIC3中的MIC3基因在BHK-21细胞中获得表达且表达产物具有抗原性。
- 张燕丽曹丽艳芦赟苟惠天王艳华付宝权李文卉张德林
- 关键词：刚地弓形虫基因克隆真核表达
- 弓形虫GJS株微线体蛋白3基因真核表达质粒的构建及表达
- 弓形虫/(Toxoplasma gondii/)是一种专性细胞内寄生原虫,可感染包括人在内的所有哺乳动物。弓形虫病可导致严重的公共卫生问题和广泛的经济损失。弓形虫微线体蛋白3/(Microneme protein 3, ...
- 张燕丽
- 关键词：刚地弓形虫BHK细胞核酸疫苗免疫保护
- 文献传递
- 弓形虫GJS株pcDNA3-MIC3核酸疫苗的研究
- 张燕丽曹丽艳芦赟蔡志杰王艳华付宝权李文卉张德林
- 弓形虫GJS株致密颗粒6基因真核表达质粒的构建及在BHK-21细胞中的表达被引量：2
- 2010年
- 根据GenBank数据库中弓形虫RH株GRA6基因序列设计1对引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增GRA6基因,导入真核表达载体pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO,转化大肠杆菌DH5α,经酶切、PCR及测序鉴定,将重组质粒转染BHK-21细胞。GFP标签证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,通过Western-blot分析,细胞裂解液中有一条约52 ku的条带,可被山羊抗弓形虫超免疫血清识别,大小与预测值相符。表明真核表达质粒pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-GRA6中的GRA6基因在BHK-21细胞中获得表达且表达产物具有抗原性。
- 张燕丽曹丽艳芦赟蔡志杰王艳华付宝权李文卉张德林
- 关键词：刚地弓形虫真核表达
- 弓形虫GJS株表面抗原1基因的原核细胞表达及其抗原性分析被引量：1
- 2009年
- 目的构建弓形虫GJS株表面抗原1(SAG1)重组表达质粒,研究SAG1蛋白疫苗诱导的保护性免疫作用。方法根据RH株弓形虫SAG1基因序列设计1对引物,利用PCR方法获得SAG1基因,克隆入pMD18-T载体,测序后进行序列分析;重新设计引物将其亚克隆至原核表达载体pET-30a中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达;重组抗原经纯化和复性后免疫小鼠,ELISA法测定其抗体滴度的变化,并用弓形虫速殖子攻击检测免疫保护力。结果与已知的SAG1基因核苷酸序列(S76248)及其编码氨基酸序列的同源性分别为99%、97%;表达的SAG1蛋白以包涵体形式存在,该重组抗原能被羊抗弓形虫阳性血清所识别;经间接ELISA检测,小鼠免疫后产生了较高的抗体;动物保护性实验表明,虽然与对照组相比免疫组小鼠存活时间有一定的延长,但差异无显著性。结论成功构建了弓形虫SAG1重组表达质粒,SAG1蛋白疫苗诱导小鼠的免疫保护力不强。
- 曹丽艳张德林张燕丽芦赟蔡志杰王艳华赵晋军
- 关键词：弓形虫克隆表达抗原性分析
- 弓形虫GJS株表面抗原1基因的克隆及真核表达质粒的构建
- 2009年
- 根据GenBank数据库中的RH株弓形虫表面抗原1(SAG1)基因序列设计1对引物,应用PCR技术从弓形虫GJS株速殖子基因组DNA中扩增编码SAG1的基因片段.PCR产物经纯化、酶切后定向插入pcDNA3.1(+)真核表达载体,转化至大肠杆菌DH5α,经酶切及PCR鉴定后测序,并进行序列分析.结果表明:从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增出1 008 bp的特异SAG1片段,大小与预测值相符,与已知的SAG1基因核苷酸序列(GenBank登录号:S76248)的ORF和氨基酸序列的同源性均为99%.
- 曹丽艳张德林张燕丽芦赟王艳华苟惠天付宝权赵晋军
- 关键词：弓形虫克隆真核表达质粒
