徐冠珠
- 作品数:14 被引量:60H指数:6
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:化学工程生物学医药卫生更多>>
- 环氧氯丙烷活化甲基丙烯酸羟乙酯-苯乙烯共聚球状珠体及其在固定青霉素酰化酶中的应用被引量:9
- 2000年
- 合成了甲基丙烯酸羟乙酯-苯乙烯共聚球状珠体,并对环氧氯丙烷活化该球状珠体的条件进行了研究.结果表明,在反应温度为37.5℃、NaOH浓度为1.2mol/L、反应时间24h的条件下,珠体的活化度可以达到2000μmol/g.将该珠体用作固定化酶载体的初步研究表明,固定青霉素酰化酶的活力可达360U/g(干重)。
- 刘建国丛威欧阳藩徐冠珠韩辉
- 关键词:甲基丙烯酸羟乙酯环氧氯丙烷青霉素酰化酶
- 微生物发酵法生产青霉素酰化酶
- 一种用微生物发酵生产青霉素酰化酶的方法。以巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)为出发菌,经物理和化学因子反复诱变处理,得到产胞外青霉素酰化酶高产菌株。在适宜的发酵培养条件下,酶活达700-800单位/1...
- 王祯祥徐冠珠朱丽钊韩文珍门大鹏
- 文献传递
- 固定化青霉素G酰化酶水解头孢菌素G制备7—ADCA的研究被引量:8
- 1997年
- 用聚丙烯腈纤维固定化青霉素酰化酶水解头孢菌素G制备7-ADCA,固定化酶对头孢菌素G的最适pH为9.0,最适温度50℃。在37℃、pH8.0固定化酶对头孢菌素G的表观米氏常数为1.67×10^(-2)mol/L。最大反应速度为3.01mmol·g^(-1)·min^(-1)。头孢菌素G溶液浓度在2%以上时,对固定化酶有明显的抑制作用。固定化酶水解头孢菌素G的最佳投料浓度为5%~6%,水解时用酶量以每克头孢菌素G投300U以上为好。按上述条件水解头孢菌素G,操作25批后固定化酶保留活力77.8%,7-ADCA平均收率92.68%。
- 徐冠珠韩辉王祯祥高宏庆赵丽
- 关键词:固定化青霉素酰化酶7-ADCA
- 固定化青霉素酰化酶的研究被引量:9
- 1992年
- 将巨大芽孢杆菌胞外青霉素酰化酶通过共价键连接到醋酸纤维素载体上,制成的固定化青霉素酰化酶的表观活力达2000 u/g左右(PDAB 法)。水解10%(W/V)的青霉素 G 钾盐溶液,使用30批,保留活力70%以上。6-氨基青霉烷酸(6-APA)总收率平均达88.37%。固定化青霉素酰化酶水解青霉素 G 的最适 pH 为9.95,最适温度为55℃,表观米氏常数为1.093×10^(-2)mol/L,在 pH 5.8—10.7,温度45℃以下酶的活力稳定。
- 徐冠珠王祯祥朱丽钊韩辉李庆中
- 关键词:青霉素酰化酶固定化酶
- 扩环酶的研究进展及其应用前景被引量:4
- 2000年
- 扩环酶,也叫脱乙酰氧基头孢菌素C合成酶,催化青霉素N 扩环生成脱乙酰氧基头孢菌素C,是头孢菌素生物合成中的关键酶。在真菌中它是一个双功能酶,同时具有扩环酶和羟化酶的活性;而在细菌中扩环和羟化却是由两个独立的酶来承担的。近年来,扩环酶被纯化成均一蛋白,有关它的性质、分子结构以及基因结构等方面的研究都取得了飞速发展,并不断地应用基因工程的技术探索其在抗生素生产上的应用。
- 陈晖韩辉徐冠珠
- 关键词:羟化酶
- 微生物发酵法生产青霉素酰化酶
- 一种用微生物发酵生产青霉素酰化酶的方法。以巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)为出发菌,经物理和化学因子反复诱变处理,得到产胞外青霉素酰化酶高产菌株。在适宜的发酵培养条件下,酶活达700-800单位/1...
- 王祯祥徐冠珠朱丽钊韩文珍门大鹏
- 文献传递
- 固定化内切型肝素酶的研究被引量:1
- 2004年
- 将提纯的一种内切型肝素酶固定于聚酯载体上 ,固定化效率达 78 8%。酶活力在pH为 7 5左右时表现最高 ,并且在此条件下固定化酶的稳定性最好。最适反应温度为 4 0℃。热稳定性试验表明 ,固定化酶的稳定性较差。固定化酶的使用半衰期比游离酶延长 4 4倍。固定化酶催化肝素底物反应的Km 值约为 95 4 μmol L而游离酶的Km 值约为 71 2 μmol L。固定化酶可以同时作用于肝素和硫酸乙酰肝素 ,而对硫酸软骨素没有催化能力。肝素经降解后 ,产生一定量的非硫酸化或低硫酸化的二糖和不同聚合度的寡糖混合物。
- 钞亚鹏徐冠珠程秀兰钱世钧
- 关键词:肝素酶
- 固定化青霉素酰化酶生产6-APA的产业化技术被引量:3
- 2002年
- 该项目研究成功新型颗粒状固定化青霉素酰化酶,并建立了5t/a的生产能力。用无机氮源替代了有机氮,显著降低了固定化酶的成本;采用比重较大的吸附剂吸附酶蛋白,简化了酶的提取步骤;应用吸附、洗脱、超滤3步工艺,实现了酶的高效分离纯化。产品达到国外同类产品水平,用于6-APA的生产,酶成本低于国外产品。预计国内半合成抗生素生产对固定化青霉素酰化酶的需求量在10t/a左右。
- 徐冠珠
- 关键词:固定化青霉素酰化酶6-APA7-ADCA半合成抗生素生产技术
- 颗粒状固定化青霉素酰化酶的研究被引量:20
- 2001年
- 将巨大芽孢杆菌 (Bacillusmegaterium)胞外青霉素酰化酶通过共价键结合到聚合物载体EupergitC颗粒环氧基团上 ,制成的颗粒状固定化青霉素酰化酶表现活力达 1 40 0 μ/g左右。固定化酶水解青霉素的最适 pH8 0 ,最适温度为 55℃。在pH6 0~ 8 5、温度低于 40℃时固定化酶活力稳定。在 pH8 0、温度 37℃时 ,固定化酶对青霉素的表现米氏常数Ka为 2×1 0 - 2 mol/L ;苯乙酸为竞争性抑制剂 ,抑制常数Kip为 2 8× 1 0 - 2 mol/L ;6 APA为非竞争性抑制剂 ,抑制常数Kia为 0 1 2 5mol/L。固定化酶水解青霉素 ,投料浓度为 8% ,在使用 2 0 0批后 ,保留活力 80 %左右 ,6 APA收率平均达 89 48%。
- 韩辉徐冠珠
- 关键词:巨大芽孢杆菌固定化青霉素酰化酶环氧基
- 聚丙烯腈纤维固定化青霉素酰化酶性质的研究被引量:9
- 1998年
- 将巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)青霉素酞化酶连接到聚丙烯腈纤维载体上,制成固定化青霉素酰化酶。其表现活力约为2000u/g。水解青霉素G的最适温度为50℃;最适PH为9.0;在PHS.5~10.3、温度50℃以下酶的活力稳定;表观米氏常数Ka为1.33×10-8mol/L;最大反应速度Vm为2.564mmol·min-1;苯乙酸为竞争性抑制剂,抑制常数为0.16mol/L。水解10%的青霉素G钾盐溶液,使用20批,保留酶活力80%。
- 韩辉徐冠珠朱丽钊韩文珍王祯祥
- 关键词:巨大芽孢杆菌青霉素酰化酶聚丙烯腈固定化酶