戚晓渊
- 作品数：15 被引量：78H指数：5
- 供职机构：河北联合大学附属医院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金唐山市科技局科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人TRAF3IP3基因剪接异构体2的克隆表达和生物信息学分析
- 2015年
- [目的]克隆、原核表达并纯化人类TRAF3IP3基因剪接异构体2(TRAF3IP3iso2),对TRAF3IP3iso2蛋白进行生物信息学分析。[方法]从人骨髓单个核细胞c DNA中扩增TRAF3IP3iso2开放阅读框区,双酶切连入原核表达载体p ET-28a(+),重组质粒转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达效果,Ni-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白;根据测序结果对TRAF3IP3iso2蛋白进行生物信息学分析。[结果]成功克隆了人类TRAF3IP3iso2编码区并构建了原核表达载体p ET-28a(+)-TRAF3IP3iso2,在大肠杆菌中诱导表达、纯化获得了相对分子量约22.7k Da的融合蛋白;生物信息学分析显示TRAF3IP3iso2蛋白二级结构以α螺旋为主,无TRAF3IP3iso1蛋白的跨膜区结构。[结论]证明了人类TRAF3IP3iso2的存在,为TRAF3IP3功能的研究提供了实验依据。
- 王沂杨文思赵俊暕石峻戚晓渊郑永强牛艳艳王洋
- 关键词：剪接异构体原核表达生物信息学
- 循环内皮干细胞与症状性颅内动脉狭窄关系研究
- 2011年
- 目的研究外周血内皮干细胞(cEPC)数量与颅内动脉狭窄出现及严重度的关系。方法本研究包括了36名颅内动脉狭窄患者(病例组),40名无脑动脉狭窄卒中患者(病例对照组)和36名健康志愿者(健康对照组)。外周血内皮干细胞基于CD34、CD133和KDR抗原的表达,应用流式细胞仪确定为CD34(+)CD133(+)KDR(+)细胞。结果颅内大动脉狭窄患者外周血内皮干细胞数量显著高于卒中无狭窄患者(P<0.01)和健康志愿者(P<0.01),而卒中无狭窄患者和健康志愿者间内皮干细胞数量差异无统计学差异(P>0.05)。狭窄率≥70%患者cEPC数量显著高于<70%患者(0.091±0.035%vs 0.052±0.012%,P<0.01)。单支狭窄、多支狭窄两组间比较,cEPC数量无显著差异(P>0.05)。三组中,内皮干细胞数量与纤维蛋白原浓度均无相关性。结论内皮干细胞数量异常增加可能在颅内动脉狭窄发生发展中发挥重要作用。
- 戚晓渊丁秀荣吕虹康熙雄刘志忠
- 关键词：脑动脉狭窄动脉粥样硬化流式细胞术
- 腺病毒介导的p16基因对TJ899细胞系活性的影响被引量：2
- 2004年
- 目的 研究五型腺病毒载体 (Ad5 )携带p16基因对恶性脑胶质瘤细胞系TJ899生长状态的影响。方法 免疫组化 (SP法 )测定p16蛋白表达 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法和克隆形成实验测定恶性脑胶质瘤细胞系生长状态。结果 重组体腺病毒能介导p16外源基因在恶性脑胶质瘤细胞系TJ899细胞中阳性表达 ,6d时肿瘤细胞生长抑制率为 93% ,并且能显著地抑制肿瘤细胞的克隆形成能力。结论 腺病毒介导p16基因能在肿瘤细胞中表达 。
- 朱军孙泽林戚晓渊李建珉程爱国
- 关键词：P16基因表达恶性脑胶质瘤
- 单克隆和不同接种密度人永生化骨髓基质细胞体内外分化差异性的研究被引量：2
- 2009年
- 目的研究单克隆和接种密度对永生化骨髓基质干细胞（hMSC—TERT）体内、外分化潜能的影响，寻找合理的体外培养模式。方法从亲代hMSC—TERT中，建立了30个单克隆细胞系，并以不同的接种密度建立了2个独立的细胞系。对各细胞系在体外向脂肪、骨、神经样细胞方向诱导分化，用免疫组化的方法测定细胞在SCID鼠体内的多向分化潜能。结果高接种密度细胞比单克隆和低接种密度细胞拥有更多的体外分化潜能，更好的保持了基质细胞特性。各单克隆细胞体内分化能力存在差异，甚至可以具有亲代细胞没有的分化能力。结论以高接种密度的方式培养多克隆原代细胞，能够保持细胞的原有特性。移植前，筛选特定的单克隆细胞，进行特定用途的移植。
- 孙泽林戚晓渊李储忠张亚卓
- 关键词：骨髓细胞细胞分化单克隆细胞计数
- 外源P16基因对人类恶性脑胶质瘤细胞系活性的影响被引量：1
- 2007年
- ①目的探讨5型腺病毒载体(Ad5)携带P16基因对恶性脑胶质瘤细胞系TJ905生长状态的影响。②方法免疫组织化学法测定P16蛋白表达;甲基噻唑基四唑法测定恶性脑胶质瘤细胞系生长状态及感染病毒细胞克隆形成数的测定。③结果重组体腺病毒能介导P16外源基因在恶性脑胶质瘤细胞系TJ905细胞中阳性表达,6天时肿瘤细胞生长抑制率为98%,并且能显著地抑制肿瘤细胞的克隆形成能力。④结论腺病毒介导P16基因能在肿瘤细胞中表达,并能明显抑制肿瘤细胞生长的状态。
- 孙泽林戚晓渊孙泽辉程爱国
- 关键词：腺病毒脑胶质瘤抑癌基因P16
- 单克隆永生化人骨髓基质干细胞分化能力和VEGF分泌量的相关性被引量：2
- 2011年
- 目的观测单克隆人永生化骨髓基质干细胞（hMSC－TERT）体内外分化潜能和自分泌血管内皮细胞生长因子（VEGF）的相关性。方法梯度稀释法建立单克隆hMSC－TERT，ELISA方法测定细胞培养液中VEGF含量。将各单克隆细胞进行脂肪、骨和神经样细胞体外诱导，检测多向分化能力。接种联合免疫缺陷性鼠（SCID），免疫组化法检测细胞体内分化率。将各单克隆细胞卜清液中VEGF的含量变化值与其上皮细胞分化率进行单变量方差分析。结果各hMSC－TERT细胞的体内、外分化能力存在差异。细胞十清液中，第5天VEGF浓度较第3天明显减少。各细胞上清液中VEGF浓度的减少幅度差异有统计学意义（hMSC－TERT2，22±0．33；hMSC．FERT20，7．684±0．25；hMSC－TERT－C2，103±35．67；hMSC－TERT－C3，140±34．17；hMSC－TERT－C6，115±28．75；hMSC－TERT－C13，－21±11；hMSC-TERT－C19，181±52．92；hMSC－TERT－C20，101±27．08；hMSC－TERT－C21，－29±10．5；hMSC－TERT－C29，46±25．42），减少幅度与细胞体内分化时角蛋白的阳性率呈正相关。结论单克隆hMSC－TERT上清液中VEGF变化幅度与细胞体上皮分化能力呈正相关。为选用特定的单克隆hMSC－TER3细胞进行临床和实验研究做了有益的探讨。
- 戚晓渊孙泽林刘方军李储忠张亚卓
- 关键词：骨髓基质细胞干细胞分化血管内皮细胞生长因子
- 携带p16基因重组腺病毒的构建被引量：5
- 2003年
- [目的]构建携带p16基因的重组腺病毒并对目的基因的表达进行研究。[方法]lipofectamine介导质粒共转染293细胞构建重组腺病毒,病毒DNA提取及电泳,免疫组化检测p16蛋白表达。[结果]构建的携带目的基因的重组体腺病毒,经扩增、纯化后,病毒滴度均达到了1010pfu/ml以上。用Ad-LacZ为代表进行重组体腺病毒转导效率的检测,发现当MOI为625以上的感染强度时,就可使100%的体外培养的肿瘤细胞被转导。重组体腺病毒能介导p16外源基因在脑胶质瘤细胞系TJ899和TJ905细胞中表达。[结论]腺病毒载体能携带p16基因在转导细胞中表达,并有很高的转导效率。
- 孙泽林朱军戚晓渊李建珉程爱国李键
- 关键词：基因疗法抑癌基因P16腺病毒
- 绿原酸抗肝纤维化作用的研究被引量：42
- 2011年
- 目的:研究绿原酸对四氯化碳(CCl4)导致的肝纤维化大鼠的保护作用,为其进一步开发和研究提供科学依据。方法:大鼠随机分为6组,即正常组,模型组,秋水仙碱(0.2 mg.kg-1)组,绿原酸高,中,低剂量(140,70,35 mg.kg-1)组。各组每天ig给药,给药容量为20 mL.kg-1.d-1,连续8周。正常组和模型组给予蒸馏水。给药和造模同时进行。采用CCl4导致大鼠肝纤维化模型,除正常组外,其余各组每只大鼠首次于背部sc纯CCl4 5 mL.kg-1,以后sc 40%CCl4花生油3 mL.kg-1,共8周。第8周经股动脉取血,计算大鼠的肝脾指数,检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的活性及其总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)的含量,计算ALB与球蛋白(GLOB)的比值;检测血清中透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)的含量;检测肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、羟脯氨酸(Hyp)的含量、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平。取肝组织,做病理切片,HE和Masson染色。结果:模型组大鼠血清中的ALT,AST,TP,ALB,A/G,肝纤维化4项指标(即PCⅢ,CⅣ,HA,LN)均具有显著的肝纤维化的特征(P<0.01)。绿原酸能明显对抗CCl4所致的肝纤维化大鼠肝脾系数的升高(P<0.01);显著对抗血清中ALT,AST活性的升高(P<0.01),降低血清中HA,LN,PCⅢ,CⅣ,GLOB的含量(P<0.01),升高血清中的TP,ALB含量和A/G(P<0.01);降低肝组织中MDA和Hyp的含量(P<0.01),升高肝组织中SOD和GSH-Px的活性(P<0.01)。绿原酸各剂量组中绿原酸高剂量组抗肝纤维化的效果最好,并呈现明显的剂量依赖性。病理结果亦显示绿原酸具有良好的抗肝纤维化的作用。结论:绿原酸具有显著的抗肝纤维化的作用。
- 戚晓渊史秀灵高银辉王美王旭周程艳
- 关键词：绿原酸四氯化碳肝纤维化
- 重组腺病毒携带外源p16基因抑制人脑恶性胶质瘤细胞系生长的研究被引量：4
- 2005年
- 目的研究5型腺病毒载体(Ad5)携带外源p16基因对人脑恶性胶质瘤细胞系TJ899和TJ905生长状态的影响。方法免疫组化(S-P法)测定P16蛋白表达,甲基噻唑基四唑(MTT)法和克隆形成实验测定恶性脑胶质瘤细胞系生长状态。结果重组体腺病毒能介导p16外源基因在恶性脑胶质瘤细胞系TJ899和TJ905细胞中呈阳性表达,6 d时肿瘤细胞生长抑制率分别可达93.60%和98.28%。并且能显著地抑制肿瘤细胞的克隆形成能力。结论腺病毒介导p16基因能在肿瘤细胞中表达,并能明显抑制不同人脑恶性胶质瘤细胞系的生长状态。
- 孙泽林张云鹤戚晓渊程爱国朱军李建珉
- 关键词：腺病毒抑癌基因P16
- 糖尿病视网膜病变患者血清瘦素和脂联素的变化被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨糖尿病视网膜病变患者血清瘦素和脂联素水平的变化及其临床意义.方法 收集2012年11月至2013年11月在河北联合大学附属医院内分泌科就诊的2型糖尿病患者121例,其中糖尿病无视网膜病变41例,非增殖性视网膜病变40例,增殖性视网膜病变40例,另设健康体检者40名为对照组.采用ELISA法测定各组研究对象血清瘦素和脂联素.结果 实验组血清瘦素为（15.25±4.70） μg/L,较对照组[（6.15±1.70） g/L]增高,脂联素为（7.39±1.92） mg/L,较对照组[（11.10±1.46） mg/L]降低,差异均有统计学意义（t值分别为-11.696、11.216,P均＜0.01）.无视网膜病变组、非增殖性视网膜病变组和增殖性视网膜病变组血清瘦素分别为（10.91±1.21）、（15.22±3.75）、（20.50±3.70）μg/L;脂联素分别为（9.61±1.35）、（7.11±1.18）、（5.34±1.36） mg/L,各组间比较差异均有统计学意义（F值分别为149.542、291.550,P均＜0.05）.血清瘦素水平与血清脂联素水平呈负相关（r=-0.662,P.＜0.01）.结论 血清瘦素和脂联素水平变化与糖尿病视网膜病变病变程度有关,二者可能成为糖尿病视网膜病变预测和疗效评估的重要指标.
- 戚晓渊孙泽林戚素银王颖张彦孙泽辉
- 关键词：2型糖尿病糖尿病视网膜病变瘦素脂联素
