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携带抗血管生成基因的肿瘤靶向性溶瘤腺病毒的抗肿瘤作用研究: 基因治疗是将正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞或组织中以治疗疾病,例如遗传疾病中用有功能的基因替代缺失突变的等位基因。尽管该技术刚起步不久,已经取得了一些成功。科学技术的突破将继续推动基因治疗成为主要的...; 方琳; 关键词：基因治疗抗血管生成抗肿瘤作用; 文献传递

基于FIAS的中学生物课堂师生言语互动分析: 随着新一轮课程改革的深入，教学理念逐渐由原来教师侃侃而谈、学生死记硬背的刻板教学转变为师生间积极灵活的互动，国内外学者也越来越关注课堂互动。教师和学生之间的交流互动是课堂教学的基础，也是教学的基本形式，而课堂上80%的教...; 方琳; 关键词：中学生物言语行为师生互动弗兰德斯互动分析系统

改良组织块法培养人肺成纤维细胞及其形态学观察被引量：9: 2008年; 王艳浦颖艳方琳孙丽君胡晓翠邱红苏长青曹祥荣江淑芳; 关键词：成纤维细胞组织块法免疫细胞化学波形蛋白

携带人白细胞介素10和肝细胞生长因子双基因的重组腺病毒载体构建与鉴定被引量：4: 2010年; 目的:构建携带人白细胞介素10(hIL-10)和人肝细胞生长因子(hHGF)双基因的重组腺病毒载体。方法:分别以pDC316-hIL10-EGFP和pCDNA3-hHGF重组质粒为模板,PCR扩增获得hIL-10和hHGF基因片段,与pIRES连接成为hIL10-IRES-hHGF,测序正确后酶切,与pDC315连接,获得穿梭质粒pDC315-hIL10-IRES-hHGF,与腺病毒包装系统转染293细胞,包装产生重组腺病毒hIL10-hHGF,PCR鉴定后,扩增病毒,并测定病毒滴度。用重组腺病毒转染BEL-7402和WRL-68细胞,ELISA法检测上清液中hIL-10和hHGF的含量。结果:成功构建了重组腺病毒hIL10-hHGF,扩增纯化后测得重组腺病毒滴度为1×109pfu/ml,转染BEL-7402和WRL-68细胞72 h后,表达hIL-10的量分别为(6 271.7±5.2)pg/ml和(350.6±12.4)pg/ml,表达hHGF的量分别为(20 827.1±345.5)pg/ml和(201.6±10.1)pg/ml。结论:本实验为进一步研究Ad-hIL10-hHGF在动物体内抗肝炎、肝纤维化作用奠定了基础。; 邱红朱月蓉邢继成江淑芳苏长青曹祥荣方琳; 关键词：白细胞介素10 肝细胞生长因子腺病毒载体

毛冠鹿（Elaphodus cephalophus）线粒体DNA序列的分析: ＜正＞麂亚科动物外形相似,而染色体数目变化大,麂亚科动物染色体进化是动物进化机制中的热点问题,研究者根据分类学、细胞遗传学、分子生物学的结果,提出不同的进化模式,现一般认为遵循染色体从多至少的进化原则,进化机制为着丝粒的...; 刘伟曹祥荣张锡然方琳; 文献传递

MDA-7基因的腺病毒载体构建及对肿瘤细胞凋亡的影响被引量：1: 2008年; 目的:构建一种端粒酶启动子调控目的基因MDA-7/hIL24表达的复制缺陷型腺病毒,并初步探索其抗肿瘤活性。方法:通过基因操作技术将启动子(hTERTp)+目的基因(MDA-7)插入到5型腺病毒E1A区域,构建复制缺陷型腺病毒AdTP-mda7;同时构建对照病毒AdTP-EGFP。TCID50法测定病毒滴度。应用蛋白质印迹法检测MDA-7在肿瘤细胞株中的表达状态;通过结晶紫染色实验检测两种病毒对肿瘤细胞的杀伤差异。结果:成功构建携带目的基因的腺病毒载体,PCR鉴定正确;蛋白质印迹结果表明MDA-7选择性地在多种肿瘤细胞株中表达,诱导肿瘤细胞凋亡,如A549,SGC-7901等,在以相同MOI值感染原代成纤维细胞时,原代细胞中没有检测到MDA-7表达;结晶紫染色试验结果表明AdTP-mda7对肿瘤细胞株的杀伤能力明显高于对照病毒AdTP-EGFP。结论:成功构建复制缺陷型腺病毒AdTP-mda7,并证实MDA-7蛋白在肿瘤细胞中过表达诱导多种肿瘤细胞株发生凋亡。; 王艳浦颖艳方琳孙丽君胡晓翠邱红苏长青曹祥荣江淑芳; 关键词：复制缺陷型腺病毒肿瘤基因治疗

肿瘤特异性溶瘤腺病毒载体的构建及表达的初步研究: ＜正＞目的:构建一种由人端粒酶逆转录酶启动子（hTERTp）控制的能够在肿瘤细胞中特异性增殖的新型肿瘤基因治疗溶瘤腺病毒载体系统。方法:利用基因重组技术将hTERTp插入; 浦颖艳方琳沈权孙丽君胡小翠王艳曹祥荣苏长青; 关键词：基因治疗溶瘤腺病毒肿瘤; 文献传递

重组hIL-24原核表达载体的构建及表达被引量：3: 2009年; 采用基因克隆的方法构建人白细胞介素(hIL-24)基因的原核表达载体pET-28a(+)-hIL24,在大肠杆菌中诱导表达重组蛋白rhIL-24,SDS-PAGE和Western blotting分析蛋白表达,探讨其最佳诱导表达条件。结果表明:hIL-24基因的表达产物分子质量约25 ku,且以包涵体的形式存在于超声裂解后的沉淀中,重组蛋白rhIL-24可特异性被鼠抗人IL-24单克隆抗体识别。当IPTG终浓度为0.5 mmol.L-1、37℃诱导8 h时,其表达量最高。hIL-24基因在该原核表达系统中的成功表达,为其生物学功能的研究奠定了基础。; 胡小翠孙丽君潘少坤罗红梅方琳沈玮曹祥荣; 关键词：大肠杆菌原核表达载体

肿瘤特异性溶瘤腺病毒载体的构建及其在肿瘤细胞中特异性的表达: 2008年; 为构建一种由人端粒酶逆转录酶启动子(hTERTp)调控的能够在肿瘤细胞中特异性增殖的新型肿瘤基因治疗溶瘤腺病毒载体系统,利用基因重组技术将hTERTp插入5型腺病毒E1A基因上游,构建肿瘤特异性增殖腺病毒AdSU,使其携带绿色荧光蛋白报告基因.同时构建增殖缺陷型腺病毒Ad-EGFP作为对照.通过Westernblot分析表明该特异性增殖腺病毒AdSU-EGFP在肿瘤细胞中特异性表达EIA.而通过荧光显微镜观察两者增殖实验发现,AdSU-EGFP在正常成纤维细胞株BJ及原代子宫成纤维细胞中无增殖,在肝癌细胞株MH-CC和肺癌细胞株A549中,则可见病毒增殖并裂解细胞的现象.由此可认为成功构建了肿瘤基因治疗的特异性溶瘤腺病毒载体系统AdSU,该系统能够在肿瘤细胞中特异性增殖并表达所携带的外源基因,这对肿瘤的定向基因治疗有着重要意义.; 浦颖艳方琳沈权孙丽君胡小翠王艳曹祥荣苏长青; 关键词：基因治疗溶瘤腺病毒肿瘤

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方琳