施宓
- 作品数:5 被引量:24H指数:2
- 供职机构:复旦大学生命科学学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 乳酸乳球菌表达弓形虫棒状体蛋白1(ROP1)被引量:12
- 2002年
- 目的 在乳酸乳球菌中表达ROP1抗原蛋白。方法 从质粒 psk -ROP1中以BamHⅠ和SalⅠ双酶切出ROP1基因 ,置换构建好的大肠杆菌 -乳酸乳球菌穿梭表达质粒L2 -PsP30T中的P30基因 ,电转化感受态乳酸乳球菌 ,以Westernblotting鉴定ROP1在乳酸乳球菌中的表达。结果 表达产物中有一约 4 3kDa的蛋白带能被弓形虫病人血清识别。
- 朱翔杨秋林陆惠民施宓黄伟达
- 关键词:弓形虫乳酸乳球菌疫苗弓形虫病
- 恶性疟原虫裂殖子表面蛋白人工基因的合成及在乳酸乳球菌中的表达
- 该工作在已知人类恶性疟原虫MSP-1羧基端42 kDa区域MSP-1<,42>氨基酸序列的基础上,根据乳酸菌偏爱的密码子,设计产共事成了人工基因gp42.该基因在大肠杆菌中与谷胱甘肽S-转移酶(GST)进行了融合表达.同...
- 施宓
- 关键词:恶性疟原虫乳酸菌口服疫苗
- 文献传递
- 大肠杆菌aroG基因在枯草杆菌中的分泌表达被引量:2
- 2000年
- 为了对大肠杆菌中由aroG基因编码的 3 脱氧 D 阿拉伯庚酮糖酸 7 磷酸合成酶 (DAHP合成酶 )进行结构与功能的深入研究 ,尝试了aroG基因在枯草杆菌中的表达 .表达载体以pUB110为骨架 ,采用了枯草杆菌热激蛋白 groESL基因的启动子 ,碱性蛋白酶subtilisin基因的信号肽和N 乙酰胞壁酸 L 丙氨酸酰胺酶cwlB基因的转录终止子 ,将aroG基因在枯草杆菌WB6 0 0宿主菌中进行了分泌表达 .在SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳上可以明显看到与aroG基因表达产物分子质量一致的蛋白条带 ,并在培养基中可以检测到DAHP合成酶的活性 .
- 江培■施宓钱志康闵太善黄伟达
- 关键词:枯草杆菌分泌表达大肠杆菌
- 弓形虫RH株ROP1抗原基因的克隆与表达被引量:9
- 2001年
- 目的 在大肠杆菌中高效表达ROP1抗原。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫RH株cDNA文库中扩增得到编码ROP1的基因 ,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX - 5x - 3 ,然后在大肠杆菌BL2 1中进行表达 ,用亲和层析柱纯化表达产物 ,并用SDS -PAGE和Westernblotting进行鉴定。 结果 ( 1)在我们比较的 12 4 9个碱基中 ,我们得到的ROP1基因在Ossorio报道的基因的 4 4 7位与 4 4 8位之间有一 96bp的插入片段 ,另有 14个碱基不同 ,造成 3个氨基酸的改变 ,两基因之间有 91.19%的同源性 ,( 2 )得到一分子量约为 70kDa的融合蛋白。结论 1,我们获得了一与Ossorio报道的基因有较大差异的rop1基因 (GeneBank登录号 :AF3 5 0 2 61) ( 2 ) ,ROP1基因在大肠杆菌中得到了ROP1融合蛋白的高效表达。
- 杨秋林陆惠民施宓黄伟达
- 关键词:弓形虫PCR基因表达基因克隆