曹守林
- 作品数：21 被引量：29H指数：3
- 供职机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 鸭坦布苏病毒囊膜糖蛋白结构域3(ED3)单克隆抗体的制备及其中和活性分析
- 2022年
- 目的以纯化的重组鸭坦布苏病毒(DTMUV)囊膜糖蛋白结构域3(ED3)蛋白作为免疫原,制备ED3蛋白的单克隆抗体并研究其中和活性。方法利用反转录PCR扩增DTMUV AH-F10株ED3基因,构建重组表达载体pET32a-ED3并转化至表达菌株Rosetta,诱导表达后利用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。以纯化的目的蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠的脾细胞与Sp2/0细胞进行细胞融合,采取有限稀释法筛选杂交瘤细胞并大量制备单克隆抗体。利用Western blot法、间接免疫荧光法、ELISA及分型试剂盒对单克隆抗体进行鉴定并通过病毒中和试验检测抗体中和效价。结果成功表达DTMUV ED3蛋白,并制备3株ED3蛋白的鼠源单克隆抗体B9D10C7、B9D7B8G10、B9D7B8F11,其亚型分别为IgG1、IgG2a、IgG2b,腹水间接ELISA检测抗体效价均达到1∶51200,且能够识别DTMUV的E蛋白,具有一定的中和活性。结论获得3株特异性强、敏感性高的DTMUV ED3的单克隆抗体。
- 张淼吕炫张冲阚莹王若洁于胜祖卢奇祝萌方天刘丹朱英奇曹守林王蓓王蓓殷冬冬王桂军
- 关键词：原核表达单克隆抗体
- 鸭NOD1/MAPK1基因的克隆表达与荧光定量PCR检测方法的建立
- 细胞因子在先天免疫中发挥着重要的作用，主要参与炎症反应和免疫应答，当机体出现病变或受到外界刺激时，机体内某些细胞因子的转录水平和表达水平会发生明显的变化。目前国内外关于哺乳动物细胞因子的研究较多，针对禽类细胞因子的基因序...
- 曹守林
- 关键词：樱桃谷鸭单克隆抗体实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 一种鹅星状病毒纤突蛋白脂质体疫苗及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种鹅星状病毒纤突蛋白脂质体疫苗，包括：脂质体，以及结合或包裹于脂质体中的VP27蛋白；脂质体由卵磷脂、胆固醇、抗氧化剂按薄膜扩散法制得。本发明还公开了上述鹅星状病毒纤突蛋白脂质体疫苗制备方法，包括如下步骤：...
- 王桂军朱英奇李佳明吕炫张冲张淼张瑞辰王蓓曹守林
- 文献传递
- 一种便于分笼操作的肉鸡养殖用养殖笼
- 本发明涉及肉鸡养殖技术领域，公开了一种便于分笼操作的肉鸡养殖用养殖笼，包括养殖笼，养殖笼的一侧设置有支撑架、固接在支撑架顶部的安装架、固接在安装架上的分笼组件、设置在分笼组件底部的接收组件以及固接在安装架顶部的切换组件；...
- 王桂军王蓓曹守林顾平杨庆朱小丽王晴陈兴勇
- 一种鹅星状病毒纤突蛋白脂质体疫苗及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种鹅星状病毒纤突蛋白脂质体疫苗，包括：脂质体，以及结合或包裹于脂质体中的VP27蛋白；脂质体由卵磷脂、胆固醇、抗氧化剂按薄膜扩散法制得。本发明还公开了上述鹅星状病毒纤突蛋白脂质体疫苗制备方法，包括如下步骤：...
- 王桂军朱英奇李佳明吕炫张冲张淼张瑞辰王蓓曹守林
- 文献传递
- 一种多功能肉鸡养殖孵化系统
- 本发明涉及肉鸡养殖技术领域，公开了一种多功能肉鸡养殖孵化系统，包括箱体以及设置在箱体顶部的驱动机构；孵化组件，包括依次分布在箱体内部且一侧设置有开口的孵化架、设置孵化架内部一侧且从孵化架顶部的伸出的调整单元、与调整单元输...
- 王桂军杨林平王蓓曹守林陈兴勇顾平姚卫平朱小丽王晴
- 检测鸭MAPK1基因的荧光定量RT-PCR方法
- 本发明提供了检测鸭MAPK1基因的荧光定量RT-PCR方法，属于基因工程领域。本发明通过基因克隆的方法获得了鸭MAPK1的全基因序列，并建立了一种快速检测鸭体内MAPK1基因表达水平的荧光定量RT-PCR方法。本发明提供...
- 于圣青曹守林韩先干王少辉丁铲田明星
- 文献传递
- 一种鹅养殖舍用降氨除臭系统
- 本发明涉及鹅养殖技术领域，公开了一种鹅养殖舍用降氨除臭系统，包括设于鹅舍内顶部的横梁、能够沿着横梁自行走的安装架以及设置在安装架上的除臭组件。除臭组件包括固定在安装架上的安装盒，安装盒内水平设置有一隔板，隔板的上方形成第...
- 王桂军王蓓朱英奇曹守林张云凯王晴殷冬冬
- 检测鸭MAPK1基因的荧光定量RT-PCR方法
- 本发明提供了检测鸭MAPK1基因的荧光定量RT-PCR方法，属于基因工程领域。本发明通过基因克隆的方法获得了鸭MAPK1的全基因序列，并建立了一种快速检测鸭体内MAPK1基因表达水平的荧光定量RT-PCR方法。本发明提供...
- 于圣青曹守林韩先干王少辉丁铲田明星
- 文献传递
- 副鸡嗜血杆菌的分离与鉴定被引量：2
- 2012年
- [目的]对1例鸡传染性鼻炎疑似病例进行病原菌的分离与鉴定。[方法]从安徽省某鸡场发生的以脸面肿胀、流泪和产蛋下降为临床特征的病鸡上呼吸道分泌物中分离细菌,并进行染色、镜检、菌落形态观察,并利用"卫星现象"和PCR等方法进行鉴定。[结果]成功分离到1株副鸡嗜血杆菌,经鉴定为C型副鸡嗜血杆菌。动物回归试验表明,该分离株能引起典型的鸡传染性鼻炎,对鸡具有较强的致病力。[结论]该研究可为鸡传染性鼻炎的预防与控制提供依据。
- 张洪辉王汉清王蓓李宁曹守林倪欣涛王桂军
- 关键词：副鸡嗜血杆菌PCR传染性鼻炎
