李冉 作品数:36 被引量:25 H指数:4 供职机构: 四川农业大学食品学院 更多>> 发文基金: 四川省教育厅自然科学科研项目 国家自然科学基金 四川省科技支撑计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
鲢鱼肝脏中高分子CPIs提取方法的建立及其鉴定 2018年 研究了不同浓度的丝氨酸蛋白酶抑制剂(PMSF)、热处理条件及pH值对鲢鱼肝脏中高分子半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cysteine proteinase inhibitors,CPIs)提取过程中的作用,根据其对CPIs在TSK液相上高分子质量部分的蛋白峰值和比活力(荧光合成肽底物法)的影响,确定了最佳粗提条件为:以含5 mmol/L的苯甲基磺酰氟(phenylmethanesulfonyl fluoride,PMSF),100mmol/L的Tris,3 mmol/L的EDTA(pH 7.5)作为提取缓冲液,而后在pH 8.7碱处理条件下经90℃加热5 min后,再回调到pH 7.0。用该法制备的鲢鱼肝脏CPIs粗提物经制备型Sephacryl S-200分子筛层析,分离得到的高分子活性部分,进一步经过反相酶谱法鉴定得到一种高相对分子质量的活性CPI,推测其可能是与某些蛋白结合形成了复合物,或是高分子CPIs的二聚体形式。 蒋然然 钟海霞 但静 陈治光 李冉 蒋光阳 杨娟 李美良 李树红关键词:半胱氨酸蛋白酶抑制剂 高分子 饲料中苏氨酸含量对建鲤肉质及组织蛋白酶B、L的影响 被引量:5 2019年 该试验测定了饲料中3组苏氨酸含量,即7.4 g/kg(缺乏组)、15.7 g/kg(适宜组)、25.2 g/kg(过量组),对建鲤肉质及组织蛋白酶B、L的影响。通过利用显微镜图像分析各处理组肌纤维特征、鱼肉品质指标,荧光合成肽底物法测定组织蛋白酶B(cathepsin B,CTS B)、组织蛋白酶L(Cathepsin L,CTS L)的活性,免疫组化法测定蛋白表达量,研究发现,饲喂90 d后,适宜组的肌纤维密度最高,肌纤维平均直径(22.12μm)最小;肌原纤维耐折力(0.1163μm)相对较高,而其断裂指数(A540=59.70)最低;剪切力(0.1684 kg·f)最高,失水率(21.02%)最低,p H值(6.91)最低;组织蛋白酶B、L的酶活性及表达量最低。综上,饲料中添加适宜水平苏氨酸能够改善鱼肉肌纤维特性及硬度品质,为通过营养素水平调节而提高建鲤鱼肉品质提供一定理论依据。 白稚子 刘明宇 李树红 林昊 林灵 李冉 陈治光 陈秀华关键词:建鲤 肌纤维特性 鱼肉品质 组织蛋白酶 饲料中适宜含量铁对建鲤鱼糜冻藏品质变化及组织蛋白酶B/L的影响 2017年 对经过不同铁含量的饲料(缺乏组53.9 mg/kg,适宜组146.1 mg/kg)饲喂90 d后的建鲤,取鱼肉加工为鱼糜,于-20℃条件下进行冻藏实验,取样点为0、1、2、4、6周,测定鱼糜冻藏品质指标的变化,包括Ca^(2+)-ATPase活性、总巯基、二硫键、表面疏水性、TBA值;鱼糜冻藏期间组织蛋白酶B、组织蛋白酶L活性采用荧光合成肽底物法进行测定。结果表明,适宜含量铁能极显著提高鱼糜肌动球蛋白初始Ca^(2+)-ATPase活性、总巯基含量(p<0.01),降低二硫键含量(0.01
李冉 钟海霞 李树红 杨娟 胡强 柯勤勤 白稚子 林灵 李美良关键词:铁 建鲤 鱼糜 鲢鱼重组Cystatin的原核表达、鉴定及对铜绿假单胞菌的抑制作用 被引量:10 2014年 本实验主要对鲢鱼半胱氨酸蛋白酶抑制因子Cystatin进行原核表达和纯化鉴定,并研究重组Cystatin对铜绿假单胞菌的抑菌效果。首先用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导转入p ET-30-Cystatin的E.coli BL21(DE3)表达重组Cystatin蛋白,经Ni2+-NTA镍离子亲和层析对其进行纯化,该重组蛋白在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示单一条带,分子质量约20.6 k D,在TSK-GEL G2000SW凝胶过滤高效液相色谱上呈单一活性峰,纯度为94.27%,经标准曲线计算其分子质量为20.9 k D;其次,利用抑制剂滴定曲线法,以偶氮酪蛋白为底物,确定重组Cystatin对木瓜蛋白酶(45.375μmol)的一个抑制活性单位为0.718μg;最后通过滤纸片扩散法鉴定鲢鱼重组Cystatin对铜绿假单胞菌的抑菌效果,结果表明Cystatin的添加量为20、60、120、200 U/片时,抑菌圈直径分别为8、9、13、26 mm。鲢鱼重组Cystatin对铜绿假单胞菌的抑菌效果呈剂量依赖关系。 陈海 姜海洋 吴睿 肖安蓬 何杰 李冉 马璐阳 任阳阳 李树红关键词:半胱氨酸蛋白酶抑制剂 鲢鱼 原核表达 铜绿假单胞菌 抑菌活性 一种可无线遥控的三向履带式管道疏通机器人 本发明公开了一种可无线遥控的三向履带式管道疏通机器人,涉及自动控制领域。机器人包括:机械人本体和远程控制终端;其中机器人本体包括:信息传输装置、可视化装置、处理装置、运动装置和作业装置;信息传输装置用于连接远程控制终端和... 张黎骅 李冉 韩玖胜 董成烨 王皓 王锐文献传递 一种川味鱼脯及其制备方法 一种川味鱼脯及其制备方法,所述川味鱼脯包括以下重量份数的原料经擂溃、凝胶化、烘干、焙烤、灭菌制成,新鲜鱼肉90~110份、冰水20~40份、食盐2~4份、味精0.7~0.9份、白砂糖4~6份、淀粉9~11份、蛋清2~4份... 李树红 李美良 胡强 钟海霞 李冉 但静 邹庆宏 杨娟 柯勤勤 马璐阳 苏赵文献传递 草鱼Stefin克隆表达、纯化及活性特征鉴定 2016年 文章克隆了草鱼(Ctenopharyngodon idellus)Stefin c DNA全长序列,全长294 bp,编码97个氨基酸,无二硫键,N端存在高度保守的Gly(3、4)残基及QXVXG(45-49)序列,比对结果显示其氨基酸序列与Burton's mouthbrooder(Haplochromis burtoni)Stefin A1一致性最高,为47.5%。进化树分析表明草鱼Stefin A与Burton's mouthbrooder(Haplochromis burtoni)、southern platyfish(Xiphophorus maculatus)、Colisa chuna(Trichogaster chuna)、lamprologini(Neolamprologus brichard)、elephant shark(Callorhinchus milii)及bicolor damselfish(Stegastes partitus)Stefin A聚为一类。将构建的原核表达载体Stefin-Pet30a转入E.coli BL21,以1 mol·L^-1IPTG诱导表达重组Stefin蛋白,而后经梯度尿素洗涤和镍亲和层析纯化,并分别利用SDS-PAGE和TSK-GEL G2000SWxl高效液相色谱检测诱导及纯化效果,SDS-PAGE结果显示重组Stefin蛋白得到高度纯化,最终呈现相对分子量11.4 k D的单一条带;其在高效液相上保留时间25.98 min处亦呈单一活性峰,纯度为96.28%。以荧光合成肽底物(Z-Phe-Arg-MCA)测活法鉴定重组草鱼Stefin对鲤鱼组织蛋白酶B、L的抑制活性,发现该重组蛋白对二者均体现了明显的抑制活性。 陈治光 李冉 李树蕾 杨立彬 蒋然然 钟海霞 陈恩 蒋光阳 李树红关键词:草鱼 基因克隆 基因表达 纯化鉴定 4℃下鲢鱼重组Cystatin稳定性分析 2015年 重组鲢鱼Cystatin是一种具有明显抑菌活性的半胱氨酸蛋白酶抑制因子,研究其在4℃冷藏条件下的稳定性,可为未来将Cystatin蛋白应用于食品保藏、加工奠定必要的理论和实验基础.本文首先确定鲢鱼重组Cystatin的抑制活性单位,并研究其在4℃贮藏不同时间内的活性变化趋势;同时,分别采用Tricine-SDS-PAGE和Gelatin-Substrate-Active Tricine-SDS-PAGE及凝胶过滤高效液相色谱法,监测该重组Cystatin蛋白的分子降解情况.结果显示:重组0.18 mg/m L(即25 unit/m L)的Cystatin蛋白在4℃、p H=7.0条件下贮存15 d,活性几乎无损失且未发生降解,主要为Mr 20×103蛋白形式;17-21 d内逐步降解为Mr 14×103,但21 d时Cystatin抑制活性仍保持在80%以上;33 d时活性则迅速下降50%,Mr20×103的Cystatin蛋白完全降解,即液相检测图谱中峰2消失,有活性的Mr 14×103形式即峰3降解成低活性的Mr 12.55×103的峰3′,同时降解峰4、峰5、峰6即Mr 6.5×103、Mr 4×103左右的小肽片段比例快速升高,标志Cystatin明显失活.本研究表明,鲢鱼重组Cystatin蛋白在p H=7.0的液体环境中,4℃冷藏稳定性良好,活性及其完整性可保持约30 d. 马璐阳 蒋然然 陈治光 陈海 李冉 但静 钟海霞 李树红关键词:鲢鱼 稳定性 降解 一种鲜鱼饼及其制备方法 一种鲜鱼饼及其制备方法,所述鲜鱼饼由以下重量份数的原料制成,新鲜鱼肉90~110份、水20~30份、淀粉10~15份、糕点粉6~10份、蛋清3~5份、食盐2~3份、味精0.5~1.5份、白砂糖1~3份、胡椒粉0.1~0.... 李树红 钟海霞 胡强 李美良 但静 李冉 杨娟 蒋然然 陈治光 陈海文献传递 一种带把手的磨砂安全烧杯 本实用新型公开了一种带把手的磨砂安全烧杯,包括杯体、安全保护膜、标注区、加热底座、倒液槽、磨砂层、把手和液位刻度线。本实用新型的有益效果是:该烧杯结构连接紧凑,使用简单,杯体与倒液槽上边缘位于同一水平面,上边缘均设置有磨... 李美良 胡强 柯勤勤 饶承冬 叶浪 李树红 李冉 杨娟 苏赵文献传递