李德雪
- 作品数：61 被引量：343H指数：13
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金霍英东青年教师基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 小鼠精原干细胞的形态结构及其细胞化学和免疫组化特性被引量：49
- 1999年
- 应用光镜、电镜观察了 ７～８ ｄ 小鼠精原干细胞的形态结构特点；应用细胞化学、免疫组织化学方法研究了体外培养小鼠精原干细胞的细胞化学和免疫组织化学特性。结果显示，精原干细胞呈圆形，直径（９±１） μｍ ，核大，呈圆形或轻微卵圆形，胞质较少；核内常染色质占绝对优势，异染色质极少；胞质内核糖体、线粒体较丰富，其他细胞器不发达；精原干细胞 Ａ Ｋ Ｐ染色呈阳性或强阳性，胞质内脂滴很少或没有；精原干细胞表达特异的 ｃｋｉｔ 受体；体外培养的小鼠精原干细胞常呈不完全的胞质分裂，细胞间由细胞间桥相连而呈链状或团状的细胞群丛，细胞群常由偶数细胞组成。
- 张学明李德雪李子义赖良学文兴豪杜惜明杨盛华岳占碰邹啸环
- 关键词：精原干细胞细胞化学免疫组织化学小鼠
- 牛体外受精胚胎细胞核移植的实验研究
- 1996年
- 将采自肉联厂屠宰车间的牛卵巢中的卵母细胞置于ＴＣＭ－１９９＋１０％ＥＣＳ（０ｄ）＋ＦＳＨ（１万ＩＵ／Ｌ）＋ＬＨ（５ｍｇ／Ｌ）中培养成熟，用含０．３％透明质酸酶的消化液将卵母细胞周围的卵丘细胞去掉，并以７．５ｍｇ／Ｌ的ＣＢ液处理后，用微吸管吸去透明带内的第一极体及极体下面的部分卵母细胞质，然后将经体外受精并发育至８～１６细胞期胚胎的卵裂球注入去核卵母细胞的卵周隙中，再将移核胚置于电融合槽内进行融合（电场强度为１２００Ｖ／ｃｍ，持续时间为８０μｓ，１次脉冲刺激）。将融合的胚胎移入生长有单层贴壁颗粒细胞的发育培养液（ＴＣＭ－１９９＋１０％牛血清）中培养，观察移核胚的融合率及发育率，部分去核卵母细胞经染色后观察去核率。结果表明：（１）移核胚的融合率为８６．９％（５３／６１）；（２）发育至２～８细胞期的胚胎占培养的移核胚胎总数的２１．３％（１０／４７）；（３）卵母细胞的去核率为６８．２％（４５／６６）。
- 李子义李德雪岳占碰安铁洙毛振宾卢圣忠刘云海韩燕清敖红朱裕鼎
- 关键词：核移植体外受精胚胎繁殖
- Nanog的生物功能研究进展被引量：1
- 2011年
- Nanog是近年来在胚胎干细胞(ES细胞)内发现的一个重要转录因子,该因子对维持ES细胞的自我更新及全能性起着关键作用。本文简要综述了Nanog对细胞增殖的作用及其机制。
- 郭玉萍李恩中李澜李德雪
- 关键词：NANOG细胞增殖胚胎干细胞转录因子
- 小鼠Bmi1基因的克隆及其在支持细胞中的表达
- 2011年
- 目的从昆明鼠睾丸中克隆Bmi1基因,构建真核表达载体,并转染支持细胞,以便用作培养精原干细胞(SSCs)的滋养层.方法以5日龄昆明鼠为材料,提取小鼠睾丸组织中总RNA后,以RT-PCR技术克隆小鼠睾丸Bmi1基因,构建真核表达载体,并转染TM4细胞(睾丸支持细胞株),在转染后40 h进行免疫荧光鉴定.结果成功克隆小鼠睾丸Bmi1基因的cDNA,测序正确;免疫荧光细胞染色显示,转染后的支持细胞中有Bmi1蛋白表达.结论本研究为以转染了Bmi1基因的支持细胞作饲养层培养SSCs奠定了基础.
- 郭玉萍赵洪涛王玮张世庆李澜李恩中李德雪
- 关键词：转染
- 成年小鼠雄性生殖细胞的冷冻保存被引量：3
- 2002年
- 在含 10 %小牛血清 (NBS)的 DMEM培养基中 ,分别各添加 5 %、10 %、15 %、2 0 %和 2 5 %的二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇 (PG)、乙二醇 (EG)和甘油 (G) ,对成年小鼠睾丸生殖细胞进行冷冻保存 ,复苏后台盼蓝染色测定细胞复苏率。结果显示 ,5 %～ 2 5 % DMSO冻存液组的细胞复苏率分别为 88.5 %、88.0 %、88.0 %、6 5 .6 %及 5 1.3% ;5 %～ 2 5 % PG冻存液组的细胞复苏率分别为 87.2 %、86 .4 %、79.0 %、73.4 %及 4 0 .1% ;5 %～ 2 5 % EG冻存液组的细胞复苏率分别为 86 .6 %、80 .9%、6 0 .8%、5 1.3%及 30 .0 % ;5 %～ 2 5 % G冻存液组的细胞复苏率分别为 86 .5 %、86 .3%、6 5 .3%、36 .0 %及 31.4 %。其中各抗冻剂 5 %和 10 %组的细胞复苏率最高 ,与 15 %组相比均存在显著或极显著差异。 4种抗冻剂的最高细胞复苏率之间无显著差异。DMSO、PG、EG和 G分别冷冻保存成年小鼠睾丸生殖细胞时的最小损失率分别为 4 .8%、6 .1%、6 .7%、6 .8%。结果表明 ,采用慢速冷冻时 ,DMSO、PG、EG及 G均适宜用作成年小鼠睾丸生殖细胞的抗冷冻剂 ,最佳使用含量均为 5 %～ 10 %。成年小鼠睾丸生殖细胞分别在含 5 %～ 10 %的 DMSO、PG、EG和 G的 DMEM(含 10 % NBS)冻存液中 ,2步慢速降温 ,液氮储存 ,37℃水浴复苏 。
- 李莲军阮承迈张锐李德雪文兴豪张学明岳占碰于卫东
- 关键词：雄性生殖细胞冷冻保存小鼠抗冻剂
- 精原干细胞移植及体外培养研究进展被引量：2
- 2006年
- 精原干细胞(sperm atogon ial stem cells,SSCs)移植是近年来发展起来的一项技术,是将供体动物(正常动物或转基因动物)的SSCs移植到受体动物的睾丸内,使其在受体睾丸内迁移、定居、增殖并启动精子发生,产生有受精能力精子的过程。该技术在雄性不育的治疗、精子发生机制的探讨、干细胞生物学研究以及优质动物或转基因动物繁育等方面具有广阔的应用前景。SSCs的体外培养是制约该技术发展的瓶颈。近年来,许多研究者报道了SSCs体外培养的影响因子及其生长特点。本文就近年来SSCs的体外培养及移植的研究进展作了概要评述。
- 李恩中李德雪张世庆王常勇
- 关键词：精原细胞干细胞体外培养
- 哺乳动物精原干细胞的分离富集及检测鉴定被引量：4
- 2006年
- 获得高纯度、高活力的具有生物学安全性的精原干细胞(SSCs)并能从功能上对其进行检测鉴定,是SSCs体外生物学研究的关键所在。近年来,借助于SSCs移植这一功能性检测手段,有关SSCs的分离富集及识别鉴定取得了快速进展。本文结合作者的工作实践,就生精上皮细胞悬液的制备、SSCs的分离富集及其检测鉴定方法进行评述。
- 张学明李德雪于家傲岳占碰
- 关键词：精原干细胞
- 纤维蛋白胶对干细胞心肌梗死修复移植影响的研究被引量：2
- 2008年
- 目的:应用可注射性纤维蛋白胶(fibrin glue,FG)液态支架材料联合人胎盘间充质干细胞(placent mesen-chymal stem cells,PMSCs)进行心肌内注射,观察其对细胞滞留、存活的影响,探讨其作为可注射性心肌组织工程支架的可行性。方法:(1)分离、培养、扩增人PMSCs备用;(2)建立大鼠急性心肌梗死模型并注射FG,观察其在心肌梗死区域存留及降解情况;(3)大鼠急性心肌梗死模型随机分为4组,对照组(PBS组)、FG组、PMSCs+PBS组、PMSCs+FG组,对移植24h后细胞滞留、4周后细胞的存活及局部新生血管的密度进行测量。结果:(1)FG组织相容性好,心肌内降解时间1周左右。(2)PMSCs+FG组细胞24h滞留率显著增高,4周存活细胞数量显著增高、心肌梗死区域新生血管密度显著提高(P<0.01)。结论:可注射性纤维蛋白胶可以提高移植细胞在心肌梗死部位的滞留及存活,发挥微环境调控作用并刺激心肌梗死部位微血管生成,是良好的可注射性心肌组织工程支架材料。
- 卢文宁谢晓华段翠密吕双红徐斌李德雪
- 关键词：心肌梗死干细胞移植心室功能纤维蛋白组织黏着剂
- 日本七鳃鳗血细胞显微及亚显微结构被引量：4
- 1998年
- 用光镜和透射电镜技术对１０尾日本七鳃鳗的血细胞进行了观察。结果表明：红细胞为圆形或椭圆形，胞质不很均匀，电子密度较低，含有板状嵴线粒体，核呈圆形或椭圆形。中性粒细胞表面有伪足，形态各异，胞质内含有Ａ、Ｂ２种颗粒（Ａ型颗粒为圆形，电子密度较低；Ｂ型颗粒为长椭圆形，电子密度较高）。嗜酸粒细胞数量较少，胞质内含有Ａ、Ｂ、Ｃ３种形态各异的有膜颗粒（Ａ型颗粒为圆形，电子密度较高，均质；Ｂ型为长椭圆形，颗粒中央有电子密度较高的长椭圆形致密芯；Ｃ型内含有电子密度较高的杆状致密芯，位于颗粒一侧）。单核细胞表面有伪足，胞质内含有粗面内质网、板状嵴线粒体、溶酶体和液泡。淋巴细胞为圆形，核较大，胞质内含有板状嵴线粒体、粗面内质网和嗜天青颗粒。血栓细胞体积较小，形态各异，胞质内含有线粒体、粗面内质网和细小颗粒。
- 文兴豪张凯李德雪郭文场王铁恒岳占碰张仁成李子义邹啸环杜惜明
- 关键词：血细胞显微结构亚显微结构
- 高钙日粮对鸡输卵管粘膜组织结构的影响被引量：2
- 1993年
- 锌是各种动物生长发育所必需的微量元素,锌缺乏不但会影响生长,还会引起各种疾病。饲料含锌不足或其中存在着干扰锌吸收的因素,是锌缺乏的主要原因。钙具有拮抗锌吸收的作用,高钙日粮会造成锌缺乏症。本实验通过在日粮中添加不同水平的钙,造成鸡实验性锌缺乏,观察输卵管卵白分泌部粘膜的组织结构变化,为研究缺锌对产蛋性能的影响提供形态学依据。
- 黄建珍李子义李德雪薄清如邹啸环黄耕朱连勤
- 关键词：鸡病输卵管饲料高钙
