李艳秋
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 棉铃虫质型多角体病毒5型和14型的基因序列测定及分析
- 从病毒感染的棉铃虫病虫虫体中分离纯化多角体,并提取病毒基因组进行凝胶电泳分析。发现该感染株含有十条以上的基因组片断,为质型多角体病毒株的混合感染。本实验室经过改变棉铃虫感染过程中的条件,成功分离了一株纯的棉铃虫质型多角体...
- 李杨张珈敏谭莉李艳秋胡远扬
- 文献传递
- 棉铃虫质型多角体病毒5型和14型的基因序列测定及分析
- 从病毒感染的棉铃虫病虫虫体中分离纯化多角体,并提取病毒基因组进行凝胶电泳分析。发现该感染株含有十条以上的基因组片断,为质型多角体病毒株的混合感染。本实验室经过改变棉铃虫感染过程中的条件,成功分离了一株纯的棉铃虫质型多角体...
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- 文献传递
- 马尾松毛虫质型多角体病毒多角体蛋白基因的表达与定位
- 2006年
- 为了表达马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV)多角体蛋白基因(S10片段)并探讨多角体蛋白在真核细胞中的定位,从DpCPV中分离出S10,与pET-28a载体连接成重组表达质粒pET28-S10;将S10克隆到杆状病毒转座载体pFASTBACHTb中,依次筛选出重组转座质粒pFASTBACS10,重组穿梭质粒BacmidS10,重组杆状病毒AcS10。多角体蛋白基因表达后,用SDS-PAGE、Western-blot和免疫荧光技术对表达产物进行了检测。结果表明:S10原核表达质粒、重组杆状病毒成功获得;在昆虫细胞中表达的质型多角体蛋白主要定位于细胞质,同时有少量产物定位于细胞核。
- 李斗林李艳秋张珈敏杨波陈伍国周伟东胡远扬
- 关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒多角体蛋白基因
- 马尾松毛虫CPV基因组第5片段的cDNA克隆及其序列分析
- 2003年
- 通过差速离心从感染的马尾松毛虫幼虫虫体中提取质型多角体病毒。碱解法提纯病毒粒子,1％琼脂糖凝胶分离基因组dsRNA,回收纯化第五片段(S5)。根据同源性设计五对引物,经RT-PCR,最终获得五个亚克隆片断,测序拼接后,得到S5全长。片断全长2851个核苷酸,包括一个2643个核苷酸的开放阅读框。推测DpCPV S5基因编码了881个氨基酸长的多肽,分子量为100.3kDa,与舞毒蛾质型多角体病毒(LdCPV-1)和家蚕质型多角体病毒(BmCPV)比较,核苷酸和氨基酸的同源性都很高。进一步分析,利用几种CPV序列绘制了系统进化树,对病毒的分类和进化做了探讨研究。
- 李杨张珈敏汪洋李艳秋胡建芳胡远扬
- 关键词：马尾松毛虫CDNA克隆
- 马尾松毛虫CPV基因组第7片段的cDNA克隆及序列分析被引量：4
- 2004年
- 利用琼脂糖凝胶电泳分离马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV)基因组dsRNA,并回收纯化第7片段(S7).经逆转录和PCR扩增,获得2个亚克隆片段并测序.再根据已测序列设计引物,利用RNA连接酶介导的RACE法得到S7两端克隆并测序.通过拼接可得到DpCPVS7全序列.经过序列分析发现,S7全长1502bp,5′端具有CPV 1型末端保守序列AGTAA,3′端具有保守序列GTTAGCC.起始密码子ATG位于25～27残基,终止密码子TAG位于1373～1375残基,推测S7片段编码448个氨基酸多肽,分子量约为5.0×107.与舞毒蛾质型多角体病毒(LdCPV 1)和家蚕质型多角体病毒(BmCPV)第7片段相比较,核苷酸同源性分别为99%和86%.
- 汪洋张珈敏李杨李艳秋胡远扬
- 关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒CDNA末端快速扩增CDNA克隆呼肠孤病毒科
