李静芝
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：江苏省农业三项工程项目国家重点基础研究发展计划江苏省科技支撑计划项目更多>>
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- 基于同源重组的产绿色荧光蚕丝转基因家蚕的制备
- 2013年
- 采用基因打靶技术对家蚕丝素蛋白基因(fib)进行分子设计与遗传改造,探讨从基因水平改良蚕丝性能的可行性。以家蚕丝素轻链基因(fib-L)终止密码子TAA上游1.2 kb(fib-LL)和下游0.5 kb(fib-LR)片段作为基因打靶载体的左右同源臂,将绿色荧光蛋白基因(gfp)插入到两同源臂的中间,并使其与fib-L基因处于同一读码框,构建基因打靶载体pSK-FibL-L-GFP-FibL-R。将该载体质粒转染BmN细胞后,荧光显微镜下观察细胞呈现绿色荧光,表明载体构建成功。将该载体质粒通过精子介导法导入家蚕品种高白的卵,在G0代筛选出茧呈绿色荧光的家蚕,并通过PCR检测证实其为转基因家蚕;用GFP抗体对G3代转基因家蚕幼虫后部丝腺组织进行Western blotting检测,有分子质量为65 kD的Fib-L-GFP融合蛋白特异性条带呈现。转基因家蚕所产蚕丝在蓝光的激发下发出绿色荧光,表明通过基因打靶将gfp导入了家蚕丝素轻链基因中,并成功实现融合表达。
- 李静芝曹广力杨李阳薛仁宇黄元姣贡成良
- 关键词：家蚕基因打靶绿色荧光蛋白基因
- 丝蛋白基因的分子设计及过表达Ras1CA基因提高实用品种产丝量研究
- 家蚕（Bombyx mori）属鳞翅目蚕蛾科，可大规模饲养，遗传背景比较清楚，其丝腺具有合成和分泌丝蛋白的能力。蚕丝有纤维皇后之美誉，但也存在易霉变，黄化、皱缩、褪色和脆化等缺陷。为了探讨通过家蚕丝素基因（fib）的分子...
- 李静芝
- 关键词：丝蛋白基因分子设计家蚕
- 文献传递
- 丝蛋白基因的分子设计及过表达RaslCA基因提高实用品种产丝量研究
- 家蚕(Bombyx mori)属鳞翅目蚕蛾科，可大规模饲养，遗传背景比较清楚，其丝腺具有合成和分泌丝蛋白的能力。蚕丝有纤维皇后之美誉，但也存在易霉变，黄化、皱缩、褪色和脆化等缺陷。为了探讨通过家蚕丝素基因(fib)的分子...
- 李静芝
- 关键词：基因打靶GFP叶丝转化率
- 文献传递
