杨立宏 作品数:15 被引量:45 H指数:4 供职机构: 中国科学院上海生命科学研究院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 更多>>
用多聚酶链反应检测人类免疫缺陷病毒的研究进展 1992年 多聚酶链反应(PCR)技术在诊断人类免疫缺陷病毒(HIV)感染中有较其它方法难以比拟的优点,主要表现在它能较其它方法早期、迅速、准确地诊断,并且有很高的灵敏度及特异性。通过对大量HIV阳性、阴性高危人群及HIV阴性健康人检测已证实其独特的优越性。 阎小君 杨立宏 苏成芝关键词:聚合酶链反应 免疫缺陷病毒 人白细胞介素-3基因在酿酒酵母中的分泌表达 被引量:4 1996年 利用PCR突变方法,改造了人白细胞介素-3(hIL-3)cDNA,在成熟蛋白编码顺序5'端前突变入了Xba I酶切位点和酵母类胰蛋白酶加工位点Lys-Arg的密码子。改造后的hIL-3 cDNA插入大肠杆菌-酵母穿梭质粒pVT102u/α,使其准确融合于α-交配因子前导序列之后,并置于启动子ADH1调控之下。转化入酿酒酵母宿主菌S-78筛选后,30℃培养48h。 杨立宏 韩丽英 苏成芝 高长寿关键词:白细胞介素-3 基因 酿酒酵母 分泌表达 抗人IL-3McAb杂交瘤细胞系的制备与鉴定 1995年 抗人IL-3McAb杂交瘤细胞系的制备与鉴定黄传书,鞠躬(第四军医大学神经科学研究所神经免疫研究室,西安710032)陈常庆,杨立宏(中国科学院上海生物工程中心,上海200233)1987年荷兰学者Derssers从分裂原刺激人外周血细胞。cDNA文... 黄传书 鞠躬 陈常庆 杨立宏关键词:白细胞介素3 单克隆抗体 杂交瘤细胞系 人免疫缺陷病毒基因的亚克隆 被引量:4 1992年 艾滋病相关病毒(ARV-2)是目前应用最广的艾滋病毒分离株之一.其基因组大小为9737碱基.为便于研究工作,作者对其进行了亚克隆.用Kpn I消化pARV-2/7A产生4个DNA片段,其中含有env基因和pUC19序列的大片段自身环化,得到亚克隆质粒pJE332.其余3个片段分别与pUC19连接,得到另3个亚克隆质粒pJG423,pJP 032和pJP163.其中pJG423含有LTR序列、gag基因和部分pol基因,pJp032和pJP163均插入了部分pol基因.这些亚克隆质粒已被用于各项艾滋病研究. 吉昌华 杨立宏 毛积芳 苏成芝关键词:免疫缺陷病毒 基因 亚克隆 质粒 四株抗金属肽的单克隆抗体可变区基因的克隆和序列测定 被引量:3 1995年 作者从化学合成的一种金属离子螫合的四肽的四株单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取RNA,反转录成cDNA。利用合成的寡核苷酸引物扩增了抗体的轻、重链可变区基因,并克隆人质粒。随机挑取阳性克隆各一个进行核苷酸序列分析。序列表明克隆的基因除一个轻链外均可编码小鼠抗体的轻、重链可变区。 韩丽英 杨立宏 陈常庆 苏成芝关键词:抗体酶 单克隆抗体 基因 核苷酸 抗人CD3单抗重、轻链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析 被引量:2 1994年 根据免疫球蛋白重链和轻链可变区基因5’端序列和J区序列,化学合成适合于体外扩增抗体重、轻链可变区基因的二对引物。从体外培养的OKT3杂交瘤细胞中提取总RNA,反转录生成cDNA,以cDNA为模板,分别加入合成的重、轻链可变区引物进行PCR,扩增出抗体重、轻链可变区基因片段。将扩增产物分别插入pUC19质粒,筛选出阳性克隆,用链终止法进行DNA序列测定。所测重链可变区基因全长357bp,编码119个氨基酸,轻链可变区基因全长321bp,编码107个氨基酸。 杨安钢 许辉 吉昌华 韩骅 杨立宏 金伯泉 苏成芝关键词:免疫球蛋白 可变区 基因 用PCR突变技术克隆HIV env125肽基因 被引量:1 1991年 作者在计算机辅助设计下,利用DNA合成仪合成HIV env 125-1,HIV env 125-2两个寡核苷酸引物及HIV env 101-1寡核苷酸探针,以PCP技术扩增env 125肽基因。扩增产物经电泳和Southern杂交鉴定后克隆入pUC19中,筛选、鉴定后进行序列分析。结果表明,上述方法获得的env 125肽基因5’端插入了EcoRI酶切位点和起始码ATG,3’端插入了终止码TAG和HindⅢ酶切位点,且序列及读框正确。 杨立宏 苏成芝关键词:HIV 基因 克隆 用PCR检测HIV研究进展 1992年 PCR 作为一种新技术,通过对大量HIV阳性,HIV 阴性的高危人群及HIV 阴性的健康人检测,已证实其在诊断HIV 感染中有较其它方法难以比拟的优点。主要表现在它有很高的灵敏度及特异性较其它方法能更早期、迅速、准确地作出诊断。 闫小君 杨立宏 苏成芝关键词:PCR检测 免疫缺陷病毒 体外基因扩增制备艾滋病毒核酸探针 1990年 作者利用DNA合成仪合成艾滋病毒ARV—2前病毒序列6 310~6 328,6 666~6 684及HT_LV-Ⅲ前病毒序列6339~6374,6385~6419两对寡核苷酸引物,应用体外基因扩增(Polymerase chainreaction,PCR),以pARV-2/7A质粒为模板扩增出两个DNA片段。^(32)P标记后,以pCP10(含HBV基因)、M56(含出血热汉坦株M片段cDNA)、人染色体DNA乙型脑炎病毒(JEV)为对照,经Southern杂交及斑点杂交,证明PCR扩增制备HIV核酸探针特异性强、敏感性高。 杨立宏 项秉懿 苏成芝关键词:ENV基因 艾滋病毒 核酸探针 抗人CD8单抗κ轻链可变区基因的克隆和序列测定 被引量:8 1992年 OK T8杂交瘤细胞株从American typecuhure collection(ATCC)获得,产生抗人CD8分子的单克隆抗体IgG2a(γ2a,κ),为了对这一鼠源性单抗进行基因工程改造,我们首先克隆了该单抗的κ轻链可变区基因,并测定了其碱基序列,现将结果报道如下: 通过计算机查找并分析了已发表的几十株抗体的轻链可变区基因序列,经比较其5’端保守序列和J区序列,设计了一对DNA引物:GTGAATTCATGGACATCCAGATGACCCA- 杨安钢 吉昌华 韩骅 杨立宏 苏成芝 许辉 金伯泉关键词:基因 单克隆抗体 免疫球蛋白