- 一种广泛适用的RNA提取方法被引量：33
- 2008年
- 分离提取高质量的RNA是基因表达、调控与基因工程等研究的基础,而RNase、多糖及多酚类物质严重干扰RNA的分离提取过程.现利用硅藻土对RNase的吸附性,结合PVP、高盐及乙二醇丁醚沉淀等处理,建立了一种广泛适用的RNA提取方法.在富含多糖的玉米胚乳,富含RNase的动物肝脏,多酚多油脂的银杏、麻疯树以及木霉、酵母等10多种RNA提取困难的动、植物与微生物材料中都提取出完整性好,得率高的RNA.RT-PCR实验表明,提取的RNA能够用于后续的分子生物学研究.硅藻土-苯酚法提取RNA的得率是异硫氰酸胍法的3倍多.此外,将分离提取的总RNA经过LiCl与PEG8000加NaCl沉淀步骤有效地去除了大片段RNA,以水稻Osa-mir-156的成熟序列设计特异引物做茎环RT-PCR,结果证明,富集得到的小RNA可以用于miRNA克隆等后续实验.
- 淳俊郑彦峰王胜华陈放
- 关键词：硅藻土RNA提取小RNA乙二醇丁醚
- 一种麻疯树基因、重组质粒及在提高植物抗盐、耐旱性中的应用
- 本发明属于植物基因工程领域，提供了一种从麻疯树克隆得到的基因JcSnRK2、含所述基因的真核重组质粒及植物转化体，实验表明：JcSnRK2基因的表达能够促进拟南芥SnRK2.8缺失型植株根系的生长，明显提高其耐高盐及抗干...
- 淳俊王胜华陈放
- 文献传递
- 皂土对RNA的有效分离和保护作用的初步研究被引量：1
- 2009年
- 以富含多糖多酚的麻疯树,富含RNase的动物肝脏,以及霉菌为实验材料,利用皂土-SDS法分别提取其总RNA,A_(260)/A_(280均)在1.8以上,结果表明皂土-SDS法是一种广泛适用的RNA提取法.此外,以皂土-DEPC水为抑制剂,分析其抑制RNase的作用,实验表明皂土与常用抑制剂Rnasin的效果相当.同时,实验证明皂土作为RNase抑制剂对RT-PCR等分子生物学后续实验的并无影响.
- 郑彦峰淳俊李亮李淳张荣王胜华陈放
- 关键词：RNA提取皂土
- 不同阳离子皂土对植物RNA提取效果的影响被引量：4
- 2007年
- 在提取缓冲液中加入皂土能有效地去除蛋白质并抑制RNAse,以Mg2+、K+和Na+3种阳离子处理的皂土提取缓冲液提取麻疯树叶片总RNA,结果显示,不同的处理对RNA的提取效果明显不同。其中Mg2+-K+-Na+-皂土的提取效果最佳,叶片RNA提取得率为790μg/g(鲜重),比对照高6倍。用该法提取的RNA能用于分子克隆与基因表达分析等后继分子生物学实验。该方法为一种简便,快速,经济高效的RNA提取方法。
- 邢杰淳俊郑彦峰王胜华陈放
- 关键词：RNA提取麻疯树阳离子皂土
- 一种麻疯树基因、重组质粒及在提高植物抗盐、耐旱性中的应用
- 本发明属于植物基因工程领域，提供了一种从麻疯树克隆得到的基因JcSnRK2、含所述基因的真核重组质粒及植物转化体，实验表明：JcSnRK2基因的表达能够促进拟南芥SnRK2.8缺失型植株根系的生长，明显提高其耐高盐及抗干...
- 淳俊王胜华陈放
- 文献传递
- 水稻(Oryza sativa L.)愈伤组织发育过程中Auxin-miR167-ARF8信号通路的研究被引量：4
- 2013年
- 采用荧光定量PCR(Real-time PCR),进行miR167及其靶基因ARF8表达水平的相对定量分析,初步得出水稻愈伤组织发育过程中Auxin-miR167-ARF8信号通路的调控情况.发现经过12h～24h的积累,2mg/L的2,4-D能够明显地上调miR167的表达水平,从而导致miR167的靶基因ARF8的表达量下降,这种变化在第7天的时候趋于平缓,直到形成愈伤组织,miR167和ARF8的表达量维持在一个相对稳定的水平.本实验为Auxin-miR167-ARF8信号通路的研究提供了切入点.
- 淳俊王文国王胜华陈放
- 关键词：水稻愈伤组织2,4-DREAL-TIME
