王和林
- 作品数：11 被引量：48H指数：4
- 供职机构：新乡医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：北京科技计划项目更多>>
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- 全人源EGFR单抗的筛选和鉴定
- 2020年
- 目的:制备全人源表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体,为基于人EGFR靶点的肿瘤免疫调节治疗提供基础制剂。方法:采集110例胸部肿瘤(肺癌102例,乳腺癌8例)患者外周血,构建噬菌体单链抗体库。经噬菌体展示后筛选阳性克隆,测序并构建全长轻重链表达载体质粒,共转染HEK293。通过亲和层析获得纯化抗体,抗原抗体免疫反应测定抗体特异性和敏感性,生物膜干涉(biolayer interferometry,BLI)技术测定抗体亲和力和流式细胞技术(fluorescence activating cell sorter,FACS)检测对肿瘤细胞系EGFR结合活性。结果:成功构建肺癌单链抗体噬菌体库,抗体库库容≥108,筛选获得两株单抗,分别为BTHG17-1,BTHG17-2,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定结合抗原敏感性为10 ng/mL,亲和力在10-8 mol/L水平,两抗体结合相同表位,可特异性结合野生型EGFR和突变体EGFRvⅢ蛋白,具有结合肺癌和神经胶质瘤细胞活性。结论:获得较高亲和力全人源EGFR单链抗体(single-chain variable fragment,scFv),具有EGFR(包括EGFRVⅢ)特异性,为EGFR靶点封阻和免疫导向治疗研究提供一种新抗体工具。
- 李姝萍杨斌金鑫王小珏闫卓红易玲韦攀健王和林王和林张洪涛
- 关键词：肺癌噬菌体抗体库表皮生长因子受体人源抗体
- 一种用于气管止血的联体双囊气管导管
- 本实用新型公开了一种用于气管止血的联体双囊气管导管，所述导管本体为钢丝强化硅胶管，所述导管本体前端为导管尖端，所述导管尖端的长度为0.2cm，且导管尖端为平口结构，导管尖端的管壁上不含金属弹簧丝，所述导管本体的前端包裹有...
- 王和林李明瑛
- 文献传递
- 小儿结核性脑膜炎83例临床分析被引量：2
- 2010年
- 目的分析婴幼儿结核性脑膜炎临床特点,为临床医师诊断治疗提供帮助。方法分析我院2004-01-2009-12收治的83例结核性脑膜炎患儿的临床资料。结果结核性脑膜炎患儿临床症状不典型,常伴发热、头痛、呕吐,PPD试验可见阳性,脑脊液可见蛋白异常及糖含量异常,影像学检查部分患儿可见异常。结论小儿结核性脑膜炎多发生于3岁以下婴幼儿;大部分患儿并有Ⅱ型肺结核。临床上可疑结核性脑膜炎患儿应及时作胸部X线检查有助于其诊断。在婴幼儿患者中,即使并有脑水肿,其颅内压增高症状表现不明显。
- 李振魁牛俊梅王和林郭玉凤
- 关键词：小儿结核性脑膜炎
- EGFR和PD-L1双靶向嵌合抗原受体构建及表达被引量：1
- 2020年
- 目的:构建肿瘤相关抗原表皮生长因子受体特异性嵌合抗原受体(EGFR-CAR)和程序性死亡受体-配体1(PD-L1)抗体双修饰慢病毒载体表达系统。方法:人PD-L1-Fc蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、亚克隆筛选高分泌PD-L1特异性抗体的稳定杂交瘤,酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot检测抗体特异性,流式细胞术(FACS)鉴定对PD-1配受体封阻性能,Fortebio测定抗体亲和力,抗体全长测序,经保留鼠源CRD1、CRD2和CRD3人源化改造后构建单链抗体(single-chain variable fragment,scFv);人EGFR单克隆抗体杂交瘤系,经5′RACE技术扩增其轻链和重链可变区(VL和VH)基因,构建scFv,克隆至真核载体pcDNA3.1表达鉴定。基因合成EGFR-CAR(引入CD137协同信号胞内功能域)与PD-L1-scFv借助2A序列连接,克隆入慢病毒pLVX-EF1a-IRES-ZsGreen1表达载体,使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G)共同转染293T细胞,获得包装病毒,感染293V细胞,FACS测定CAR膜表达,ELISA检测CAR感染293V细胞培养上清中PD-L1-scFv表达情况,转染激活人外周血T细胞,验证CAR膜表达。结果:获得PD-L1抗体11E3,具备高度配受体封阻性能,经人源化改造后,亲和力稳定(2.67×10 -10 mol/L),EGFR-scFv获得有效表达。进一步构建了EGFR-CAR和PD-L1双修饰慢病毒分泌型CAR(CTC0537-1)及膜表达型CAR(CTC0537-2),其病毒感染293V细胞阳性率为10%。CTZ0431-1感染293V细胞后,细胞膜表面表达EGFR-scFv,检测培养上清存在PD-L1-ScFv;CTZ0431-2感染293V细胞后,细胞膜表面EGFR-scFv和PD-L1-scFv有效表达,双表达病毒感染活化T细胞的CAR表达率为39.3%。 结论:成功构建了EGFR-CAR和PD-L1-scFv双表达慢病毒载体,EGFR-CAR中度结合亲和力,此为EGFR靶向和PD-L1抗体双修饰CAR-T细胞的实体瘤治疗研究提供了关键工具。
- 李姝萍王小珏杨斌王和林王和林闫卓红易玲韦攀健郝建清张洪涛
- 肿瘤坏死因子-α、腺苷脱氨酶同工酶、干扰素-γ及白细胞介素-10对结核性胸腔积液的诊断意义被引量：7
- 2014年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、腺苷脱氨酶同工酶(ADA2)、干扰素-γ(IFN-γ)及白细胞介素-10(IL-10)对结核性胸腔积液的诊断意义。方法选取80例未经治疗的胸腔积液患者作为研究对象,其中结核性胸腔积液组42例,恶性胸腔积液组38例。用酶联免疫吸附测定法检测胸腔积液标本中TNF-α、IFN-γ、IL-10的水平,酶速率法检测腺苷脱氨酶(ADA)和ADA2的活性。比较2组患者胸腔积液中ADA、ADA2活性,以及TNF-α、IFN-γ、IL-10水平。结果结核性胸腔积液组患者胸腔积液中ADA和ADA2活性及TNF-α、IFN-γ水平均高于恶性胸腔积液组,差异有统计学意义(P<0.001);2组患者IL-10水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。ADA和ADA2活性、TNF-α、IFN-γ水平对结核性与恶性胸腔积液的鉴别均有意义,TNF-α和ADA2联合检测诊断结核性胸腔积液的准确性最高(88.3%)。结论 TNF-α、ADA2、IFN-γ可以作为鉴别结核性及恶性胸腔积液的指标,其中TNF-α和ADA2联合检测诊断效能最高。
- 李明瑛王和林席秀娥王霞崔俊伟
- 关键词：结核胸腔积液肿瘤坏死因子-Α腺苷脱氨酶干扰素-Γ白细胞介素-10
- 抗结核药致肝功能损害的临床分析
- 2010年
- 探讨抗结核药致肝功能损害的l临床特点。方法回顾性2003年6月至2009年12月，我院收治的126例肺结核患者在药物抗结核治疗中出现肝功能损害的临床资料，分析出现的临床相关因素及可能的机制。结果抗结核药致药物性肝炎与患者性别、年龄、用药时间、有无肝炎病史有关。结论多种临床因素导致抗结核药致肝功能损害，定时检测肝功能，及早保肝治疗，可以保障抗结核治疗。
- 李振魁王煜霞牛俊梅王和林郭玉凤
- 关键词：结核肝功能损害
- 166例小儿肺结核临床分析
- 2010年
- 目的加强对小儿肺结核的认识,提高诊断率及治愈率,减少误诊。方法回顾性分析2006年1月～2009年12月收治的166例肺结核患儿的临床表现、实验室检查及影像资料。结果患儿发热、咳嗽、消瘦、浅表淋巴结肿大的发生率较高;146例患儿进行了结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)试验,阳性者115例;肺部斑片状阴影者107例,肺门或纵隔淋巴结肿大者98例。结论临床医生在诊断小儿肺结核时,应结合临床表现与实验室检查等综合分析,以便早期诊断和治疗。
- 李振魁宋晓荣牛俊梅王和林
- 关键词：小儿肺结核结核菌素纯蛋白衍生物
- 一种用于气管止血的联体双囊气管导管
- 本发明公开了一种用于气管止血的联体双囊气管导管，所述导管本体为钢丝强化硅胶管，所述导管本体前端为导管尖端，所述导管尖端的长度为0.2cm，且导管尖端为平口结构，导管尖端的管壁上不含金属弹簧丝，所述导管本体的前端包裹有两个...
- 王和林李明瑛
- 芪甲利肺胶囊辅助治疗复治肺结核合并2型糖尿病的疗效及T淋巴细胞亚群的变化被引量：18
- 2016年
- 目的探讨芪甲利肺胶囊辅助治疗复治肺结核合并2型糖尿病患者的疗效及T淋巴细胞亚群的变化。方法将280例经细菌学确诊的复治肺结核合并2型糖尿病患者按入院先后顺序随机分为观察组和对照组,每组140例。2组患者均应用3HRZES/9HRE(H:异烟肼,R:利福平,Z:吡嗪酰胺,E:乙胺丁醇,S:链霉素)方案抗结核治疗,观察组患者在此基础上加用芪甲利肺胶囊辅助治疗,每次3粒,口服,每日3次,疗程8个月。比较2组患者痰菌转阴情况、病灶及空洞变化情况、中医证候疗效及细胞免疫功能的差异。结果观察组患者强化期治疗结束时和疗程结束时痰菌阴转率分别为73.72%(101/137)、91.24%(125/137),对照组患者分别为57.97%(80/138)、80.43%(111/138),观察组患者强化期治疗结束时和疗程结束时痰菌阴转率均高于对照组(P<0.05)。观察组患者强化期结束时和疗程结束时病灶吸收的显效率分别为68.62%(94/137)、87.59%(120/137),对照组患者分别为45.65%(63/138)、69.57%(96/138),观察组患者强化期结束时和疗程结束时病灶吸收的显效率均高于对照组(P<0.05)。观察组患者强化期结束时和疗程结束时空洞闭合率分别为21.9%(30/137)、54.01%(74/137),对照组患者分别为10.87%(15/138)、28.26%(39/138),观察组患者强化期结束时和疗程结束时空洞闭合率均高于对照组(P<0.05)。疗程结束时观察组和对照组患者中医证候疗效总有效率分别为89.78%(123/137)、79.71%(110/138),观察组患者中医证候疗效总有效率高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,观察组患者强化期结束时和疗程结束时CD3^+、CD4^+水平及CD4^+/CD8^+升高(P<0.05);2组患者强化期结束时和疗程结束时CD8^+水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论芪甲利肺胶囊辅助治疗复治肺结核合并2型糖尿病能提高痰菌转阴率、病灶显效率和空洞闭合率,并能提高中医证候疗效和细胞免疫功能。
- 王和林李明瑛韩伟肖志坚
- 关键词：肺结核糖尿病中成药抗结核药T淋巴细胞亚群
- 小儿营养不良对结核菌素试验结果及结核病诊断的影响被引量：6
- 2010年
- 目的探讨营养状况对小儿肺结核病结核菌素(PPD)试验结果及诊治的影响,为诊治结核病提供参考。方法回顾性分析2005年6月-2009年6月本院收治的106例肺结核患儿临床表现、PPD试验结果、营养状况,分析营养状况对PPD试验结果的影响。结果 106例中PPD阳性69例,强阳性8例,阴性29例。营养不良肺结核患儿PPD试验阴性率与营养状况正常的肺结核患儿比较差异有统计学意义;营养不良程度越重,PPD试验阴性率越高。结论 PPD试验是明确诊断儿童结核病的重要实验室依据,小儿营养状况会影响PPD试验结果 ,临床医师需慎重对待。
- 李振魁宋晓荣牛俊梅王和林
- 关键词：营养状况结核菌素试验肺结核
