王德普
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 供职机构:宁夏医科大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 利用GST-标签大肠杆菌表达系统制备HPV58E7蛋白
- 研究背景:宫颈癌是严重威胁妇女健康的恶性肿瘤之一,已证实,宫颈癌的发生与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染关系密切,总体来说,HPV16,18型在全球范围内占主导地位,但高危型别HPV的流行与分布亦有明显的地域特点,已有研...
- 王德普
- 关键词:大肠杆菌人乳头瘤病毒E7蛋白
- 利用基因工程技术制备HPV58E7蛋白
- 2011年
- 目的利用基因工程技术制备HPV58E7蛋白。方法设计E7基因片段特异性PCR引物,以HPV58全基因组为模板,经PCR扩增E7基因片段,利用pGEX-4T3表达质粒,构建pGEX-4T3/HPV58E7重组体,转化BL21宿主细胞,IPTG诱导表达带有GST标签的可溶性融合蛋白。经谷胱甘肽凝胶柱亲和层析纯化,凝血酶切GST标签。结果 SDS-PAGE分析显示在分子量约为40KD处有新生蛋白条带,经凝血酶消化融合蛋白,所获纯化HPV58E7蛋白与预期理论值相吻合。结论利用带有GST标签的原核表达系统及其相应纯化策略,获得HPV58E7蛋白的高效制备。
- 王德普霍正浩张晨华闫小飞