王春苗
- 作品数：10 被引量：32H指数：4
- 供职机构：广西医科大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西医学科学实验中心开放基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 激光扫描共聚焦显微镜观测大黄素β-环糊精包合物在鼻咽癌细胞的跨膜转运及分布被引量：5
- 2014年
- 利用激光扫描共聚焦显微镜动态研究大黄素β-环糊精包合物在鼻咽癌CNE-1细胞的跨膜转运及分布。结果显示,大黄素β-环糊精包合物以颗粒的形式主要分布于胞浆中,在其浓度为5~40mg·L-1时细胞对其摄取量随浓度的增加呈非线性增加;NaN3、甘露醇可抑制CNE-1细胞对大黄素β-环糊精包合物的摄入量,环孢菌素A(CsA)在药物浓度低(小于5mg·L-1)时可显著增加细胞对大黄素β-环糊精包合物的摄入量,而在药物浓度大时,反而抑制细胞的摄取量。相对大黄素而言,大黄素β-环糊精包合物在细胞内持续时间较长。大黄素β环糊精包合物在鼻咽癌CNE-1细胞的跨膜转运主要遵循能量依赖的内吞模式且受P-gp蛋白的调控,这一特性可为药物剂型研究提供参考。
- 王春苗侯华新黎丹戎陈云龙莫春燕李竟莫媛媛
- 关键词：激光扫描共聚焦显微镜
- 调控RAC1/NADPH信号通路对不同分化类型鼻咽癌细胞的放射敏感性研究
- 目的：通过激活和抑制鼻咽癌CNE-1和CNE-2细胞中的RAC1/NADPH信号通路，探讨RAC1/NADPH信号通路与鼻咽癌CNE-1和CNE-2细胞放射敏感性的关系以及化合物GXHSWAQ-4作为鼻咽癌放射增敏剂的潜...
- 王春苗
- 关键词：鼻咽癌凋亡率
- 芦荟大黄素α-氨基膦酸酯衍生物的设计合成及抗乙肝病毒活性研究
- 2020年
- 目的:设计合成芦荟大黄素α-氨基膦酸酯类衍生物并评价其抗乙肝病毒(HBV)的活性。方法:以芦荟大黄素为先导化合物,利用药效团拼合原理,经氧化、缩合、加成反应合成芦荟大黄素α-氨基膦酸酯衍生物,衍生物结构均经高分辨质谱(HRMS)、核磁共振氢谱(1H-NMR)和核磁共振碳谱(13C-NMR)确证;采用MTT法测定目标化合物对HepG2.2.15细胞的生长抑制作用,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定目标化合物体外抗HBV的活性。结果:成功合成了5个芦荟大黄素α-氨基膦酸酯衍生物,衍生物均具有一定的抗HBV活性,尤其是对HBeAg分泌的抑制。其中衍生物3b、3c对HBeAg的抑制率最高,分别是拉米夫定的1.5倍和先导化合物芦荟大黄素的4.3倍;衍生物3d对HBsAg的抑制率为15.22%,3e的抑制率为23.67%,明显高于先导化合物芦荟大黄素(P<0.05)。结论:芦荟大黄素α-氨基膦酸酯衍生物具有一定的抗HBV活性,有希望成为新的抗HBV候选化合物。
- 李俊莹黄慧冬蓝富梁丹丹庞会锋李钊全王春苗侯华新
- 关键词：芦荟大黄素Α-氨基膦酸酯抗乙肝病毒活性
- 萤光素酶报告基因细胞模型在筛选靶向调控RAC1的大黄酸衍生物中的应用被引量：2
- 2019年
- 目的 构建含RAC1启动子萤光素酶报告基因CNE1-RAC1-Luc2稳转细胞模型,探讨其在转录水平筛选靶向调控RAC1抗肿瘤活性的大黄酸衍生物中的应用。方法 利用RAC1启动子序列,设计合成萤光素酶报告基因-慢病毒重组载体,感染鼻咽癌CNE1细胞,获得稳定表达萤光素酶的细胞;采用萤光素酶报告基因检测试剂盒,检测RAC1激活剂PMA和抑制剂NSC23766刺激该细胞后的萤光素酶发光值,并观察系列大黄酸衍生物对RAC1启动子萤光素酶活性的影响,Western blot验证细胞RAC1蛋白表达的变化。结果 双酶切实验显示,含RAC1启动子萤光素酶报告基因的慢病毒表达载体构建成功;经嘌呤霉素筛选,获稳定表达萤光素酶的CNE1-RAC1-Luc2细胞,转染效率达90%以上;RAC1萤光素酶报告基因检测系统对RAC1激活剂和抑制剂反应灵敏,萤光素酶活性与Western blot实验中RAC1蛋白表达结果一致;系列大黄酸衍生物对CNE1-RAC1-Luc2细胞萤光素酶活性的调控作用与Western blot结果基本一致。结论 成功构建了含RAC1启动子的萤光素酶报告系统的细胞模型,为高通量进行靶向RAC1药物的筛选提供一个实用的平台。
- 李钊全粟正英梁丹丹王春苗蓝富李俊莹田炜黎丹戎侯华新
- 关键词：RAC1萤光素酶报告基因细胞模型药物筛选
- 8-溴乙氧基大黄酸的合成及其对肝癌 HepG2．2．15细胞乙肝病毒抑制作用的研究被引量：11
- 2016年
- 目的合成8-溴乙氧基大黄酸,探讨8-溴乙氧基大黄酸对肝癌Hep G2.2.15细胞分泌的乙型肝炎病毒表面抗原(HBs Ag)和e抗原(HBe Ag)的抑制作用和机制。方法以大黄酸为结构基础,化学全合成8-溴乙氧基大黄酸,采用红外光谱(IR)、核磁共振氢谱(~1H-NMR)及碳谱(^(13)C-NMR)对其结构进行表征;MTT法测定8-溴乙氧基大黄酸对细胞生长的抑制作用;ELISA检测Hep G2.2.15细胞分泌的HBs Ag和HBe Ag;Western blot法检测细胞内乙肝病毒X基因(HBx)蛋白的表达;流式细胞仪分析细胞周期;激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙离子浓度。结果 IR、~1H-NMR和13C-NMR的结果确证合成产物为8-溴乙氧基大黄酸,合成产物和大黄酸对Hep G2.2.15细胞具有较好的抑制细胞生长的作用,作用72 h后IC_(50)分别为14.29 mg·L^(-1)和11.59mg·L^(-1)。采用无细胞毒剂量的8-溴乙氧基大黄酸处理细胞后,对细胞分泌的HBs Ag和HBe Ag有抑制作用,其抑制作用随着浓度的增加,呈现剂量依赖性,且合成产物的抑制效果优于大黄酸;8-溴乙氧基大黄酸可降低HBx蛋白表达水平和细胞内钙离子浓度,阻碍乙型肝炎病毒(HBV)复制,但不影响细胞周期。结论本研究合成的8-溴乙氧基大黄酸显示了比大黄酸更为优越的抑制HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg的分泌作用的活性,其作用机制可能是通过降低HBx蛋白表达、减少钙离子浓度而实现。
- 潘智育李竟陈云龙王春苗彭政粟正英黎丹戎侯华新
- 关键词：大黄酸肝癌细胞内钙离子
- 大黄酸衍生物4B诱导内质网应激触发顺铂耐药卵巢癌细胞凋亡的活性研究被引量：3
- 2021年
- 目的:探究大黄酸衍生物4B杀伤顺铂耐药卵巢癌细胞的作用及相关机制。方法:以卵巢癌细胞(SKOV3)、顺铂耐药卵巢癌细胞(SKOV3/DDP)、正常卵巢细胞(IOSE80)为研究对象,采用MTT和流式细胞术分别检测大黄酸衍生物4B处理后细胞的存活率和凋亡率,苏木精-伊红(HE)染色和ER-Tracker-Red分别检测药物对细胞形态和内质网的影响,Western blotting法检测内质网相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和内质网类蛋白激酶(PERK)的表达。结果:大黄酸衍生物4B在体外可明显抑制SKOV3和SKOV3/DDP的增殖,SKOV3、SKOV3/DDP、IOSE80的半数抑制浓度(IC_(50))分别为(3.68±0.71)μmol/L、(3.54±0.37)μmol/L、(5.00±0.18)μmol/L,且呈剂量依赖性地诱导SKOV3和SKOV3/DDP细胞凋亡(P<0.05)。大黄酸衍生物4B作用后,HE染色可见SKOV3和SKOV3/DDP细胞质出现大量空泡,ER-Tracker-Red染色发现空泡来源于内质网。大黄酸衍生物4B可明显上调SKOV3、SKOV3/DDP细胞GRP78和PERK蛋白表达,而内质网应激抑制剂4-PBA可有效逆转大黄酸衍生物4B引起的细胞空泡并降低其杀伤活力(P<0.05)。结论:大黄酸衍生物4B可通过激活内质网应激诱导顺铂耐药卵巢癌细胞凋亡。
- 赵玉华李俊莹王春苗翟利娜李欣晓侯华新黎丹戎
- 关键词：卵巢癌耐药内质网应激凋亡
- 对Racl蛋白抑制作用的生物还原剂的虚拟筛选
- 2015年
- ;乏氧是肿瘤组织的重要特点,而在肿瘤组织中高表达的Racl蛋白是与氧化还原过程密切相关的蛋白质,且参与肿瘤发展的多个过程。Racl抑制剂可有效抑制肿瘤细胞的侵润与发展。因此,有效的Racl抑制剂可成为潜在抗癌药物。目前能用于临床治疗肿瘤的Racl抑制剂鲜有报道。生物还原剂是一大类对乏氧细胞有特异毒性的化合物,可以靶向作用于乏氧细胞,抑制乏氧肿瘤细胞的生长。本文根据Racl的三维结构,利用虚拟筛选软件PyRx,在化合物库中对约1.5万个硝基杂环化合物、芳香氮氧化合物、脂肪氮氧化合物、醌类化合物等生物还原剂进行筛选,根据结合能、结合位点、结合模式等条件筛选出6个候选Racl抑制剂,为靶向乏氧肿瘤细胞的生物还原剂的开发、构效关系研究提供理论依据。
- 李竟侯华新黎丹戎莫春燕王春苗
- 关键词：RAC1抑制剂生物还原剂
- 大黄素乙酰化物致鼻咽癌CNE-1细胞线粒体自噬活性的研究被引量：4
- 2014年
- 目的研究大黄素乙酰化物作用鼻咽癌CNE-1细胞后,其线粒体损伤及其与线粒体自噬的关系。方法以5 mg·L-1及10 mg·L-1大黄素乙酰化物作用鼻咽癌CNE-1细胞,通过透射电镜观察大黄素乙酰化物导致鼻咽癌CNE-1细胞自噬体形成的超微结构;激光共聚焦显微镜测定线粒体膜电位、细胞内钙离子、细胞内活性氧的浓度变化及线粒体自噬的活性。结果与空白对照组比较,两个实验组细胞都出现线粒体损伤以及线粒体自噬体。大黄素乙酰化物作用后的细胞线粒体膜电位降低(P<0.05);细胞内游离的钙离子浓度升高(P<0.05);细胞内活性氧增加(P<0.05),且呈剂量依赖性。经线粒体与溶酶体示踪分析,可见大黄素乙酰化物作用的实验组均出现酸性溶酶体增殖,其中包含线粒体探针标记的线粒体碎片等典型的自噬特征,且增加的趋势呈剂量效应关系。结论大黄素乙酰化物可致鼻咽癌CNE-1细胞线粒体损伤,并与线粒体自噬密切相关。
- 莫媛媛侯华新黎丹戎陈云龙梁燕莫春燕王春苗李竟
- 关键词：鼻咽肿瘤透射电镜激光共聚焦显微镜
- 激光共聚焦显微镜实时动态观察不同微环境中鼻咽癌细胞摄取大黄素差异研究被引量：5
- 2014年
- 目的:以人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞为研究对象,采用激光共聚焦显微镜动态检测细胞对大黄素的摄取,探讨不同微环境对CNE-1、CNE-2细胞摄取大黄素的影响。方法:通过MTT方法检测大黄素对CNE-1和CNE-2细胞在乏氧和正常培养的条件下的生长抑制作用,选择无细胞毒性浓度的大黄素,激光共聚焦显微镜完美对焦系统分别观察两种细胞在乏氧、无血清、与血管内皮细胞共培养后对大黄素的摄取及这些过程的细胞形态学变化。结果:鼻咽癌2种细胞无论单独培养和共培养,在乏氧及无血清条件下摄取大黄素后,与相应的对照组细胞比较荧光强度最强,达到最大摄取浓度所需时间最短(P<0.05);总体而言,CNE-2细胞对大黄素的摄取速度快于CNE-1细胞,共培养体系中CNE-1细胞对大黄素的摄取速度慢于单细胞培养体系,而CNE-2细胞则相反。乏氧状态的鼻咽癌细胞在摄取大黄素后会出现明显的细胞皱缩、变圆、起泡等凋亡的形态学变化。大黄素对鼻咽癌CNE-1和CNE-2细胞在乏氧和不乏氧情况下半数抑制浓度(IC50)分别为18.34、16.87μg·mL-1和20.44、19.87μg·mL-1。结论:鼻咽癌细胞对大黄素的摄取与细胞的培养条件、乏氧状态等微环境有关,改变微环境有利于提高药物的靶向性。
- 陈云龙侯华新莫春燕王春苗黎丹戎
- 关键词：激光共聚焦显微镜鼻咽癌细胞
- 含表皮生长因子受体(EGFR)启动子萤光素酶报告基因的三阴性乳腺癌细胞模型的建立被引量：2
- 2020年
- 目的建立稳定表达人表皮生长因子受体(EGFR)启动子及萤光素酶(Luc)报告基因的三阴性乳腺癌细胞系,并对其应用进行初步验证。方法采用基因重组技术,构建含有EGFR启动子以及Luc报告基因的慢病毒载体,并感染MDA-MB231细胞,经过嘌呤霉素筛选获得能稳定表达Luc活性的MDA-MB231-EGFR-Luc2细胞系;分别采用EGFR激活剂EGF以及抑制剂吉非替尼处理细胞后检测Luc活性变化。结果通过基因测序和质粒双酶切鉴定,EGFR基因启动子Luc报告基因-慢病毒表达载体构建成功,经过嘌呤霉素筛选获得稳定表达Luc的MDA-MB231-EGFR-Luc2细胞;EGF可剂量依赖性的增加细胞中Luc的活性,而吉非替尼则相反。结论建立了MDA-MB231-EGFR-Luc2稳定表达EGFR启动子及Luc报告基因细胞系,为高通量筛选靶向EGFR的抗肿瘤药物提供一类新的细胞模型。
- 梁丹丹王春苗李俊莹覃良淑粟正英侯华新
- 关键词：表皮生长因子受体启动子萤光素酶报告基因三阴性乳腺癌
