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SARS-CoV N蛋白小鼠T细胞表位筛选及其免疫功能研究: 目的:筛选三种不同遗传背景的小鼠识别的SARS-CoV N蛋白T细胞表位,并研究N蛋白特异性T细胞的性质及其T细胞表位多肽在细胞免疫和体液免疫中的作用。方法:首先合成涵盖N蛋白全长的41条多肽(相邻多肽前后有5个氨基酸残...; 赵金存黄前荣王炜高晓明; 关键词：T细胞表位 TH1细胞免疫应答; 文献传递

T细胞免疫BALB/c小鼠诱导调节性体液免疫应答的研究: 2002年; 目的 :研究T细胞免疫后正常小鼠的调节性体液免疫应答。方法 :用经γ射线照射的体外扩增的活化OVA特异T细胞克隆免疫BALB c小鼠 ,FACS法分析血清中抗T细胞抗体水平 ,免疫共沉淀法分析靶抗原。结果 :T细胞免疫能诱导BALB c小鼠产生抑制T细胞增殖的抗T细胞抗体 ,这种抗体不是多克隆活化的结果 ,其靶抗原可能是T细胞上 93、87、5 5和 4 5kD的蛋白。结论; 刘相国王炜鲁琰高晓明; 关键词：体液免疫应答免疫共沉淀 T细胞免疫 BALB/C 小鼠

小鼠脾细胞凋亡释放RNA与自身免疫病的相关性被引量：1: 2003年; 在经放射线照射诱导的凋亡小鼠脾细胞培养上清中 ,可以提取到大量RNA ,用流式细胞仪检测发现凋亡细胞内的RNA量与正常细胞比较有所下降 .甲基绿派若宁Y染色小鼠脾脏 ,脾细胞间质呈派若宁Y染色阳性 ,提示小鼠脾细胞也可能释放RNA .将小鼠脾脏研磨后 ,发现脾脏上清中也存在大量的RNA .采用小鼠脾脏上清RNA与脾脏细胞悬液总RNA的比值作为指标来衡量细胞凋亡释放的RNA量 ,并比较了BALB c及BXSB小鼠的差异 ,发现该比值在 3周 (72 % )、3月(5 8 4 % )、6月 (4 5 % )龄BALB c小鼠中呈下降趋势 ,而BXSB小鼠一直保持较高水平 (75 %～83% ) ,该比值在 3月龄、6月龄显著高于BALB c小鼠 (P <0 0 5 ) .同时 ,采用单相酶扩散的方法检测小鼠脾脏上清中RNA酶的活性 .6月龄BXSB小鼠的RNA酶活性显著低于同龄BALB c小鼠 (P<0 0 5 ) ,而 3周及; 赵文璞刘相国王炜张岩吕平张玲高晓明; 关键词：细胞凋亡脾脏小鼠自身免疫病

神经纤毛蛋白-1的原核表达及兔抗小鼠神经纤毛蛋白-1抗体免疫学活性的研究: 2007年; 目的:在原核系统中分段表达神经纤毛蛋白-1(Nrp1);将纯化的蛋白免疫家兔后获得特异的抗体,并将其应用于检测组织和细胞中Nrp1分子的表达。方法:提取BALB/c胎鼠脑组织总RNA,通过RT-PCR分段扩增获得Nrp1基因片段,将PCR产物插入表达载体pET28a(+),获得含5个Nrp1基因片段的重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导蛋白表达并纯化;将纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔获得针对目的蛋白的特异性多克隆抗体;利用Nrp1特异性多抗检测胎鼠脑组织和HeLa细胞中Nrp1的表达。结果:在原核系统中分段表达了Nrp1蛋白,通过Ni-NTA纯化了Nrp1蛋白片段;纯化的Nrp1蛋白免疫新西兰大白兔获得了具有免疫活性的多抗;兔抗小鼠Nrp1特异性多抗可用于检测组织、真核细胞中Nrp1的表达。结论:应用原核系统成功地表达了Nrp1蛋白,兔抗小鼠Nrp1特异性多抗可用于免疫学检测Nrp1分子的表达。; 王文玲于洁薄洪贾汝静袁志宏黄前荣赵金存王炜高晓明; 关键词：神经纤毛蛋白-1 蛋白表达抗体免疫学

SARS冠状病毒NS融合蛋白的重组表达纯化与免疫学性质分析(英文)被引量：1: 2005年; 刺突蛋白(S)和核心蛋白(N)是SARS冠状病毒的主要结构蛋白.在病毒细胞受体结合和病毒包装过程起重要作用.重组融合表达这2种蛋白具有较高的诊断学价值.对SARS病毒N蛋白和S蛋白氨基酸序列进行计算机分析,选择含有优势抗原表位的N蛋白1～227位氨基酸片段和S蛋白450～650位氨基酸片段,采用序列重叠延伸策略(sequenceoverlappingextension,SOE)构建编码N1227LinkerS450650新型融合蛋白的基因片段,导入原核表达载体,实现融合蛋白在大肠杆菌的高效表达.利用组氨酸标签亲和层析的方法纯化,获得高纯度的融合蛋白.对该融合蛋白的结构特征模拟分析的结果显示,其免疫化学性质均无显著改变.采用ELISA和Western印迹方法对其识别SARS冠状病毒特异性抗体的能力进行初步鉴定,显示该融合蛋白具有较好的抗原性和特异性,可有效特异性地检测恢复期SARS病人血清中抗SARS冠状病毒结构蛋白的抗体,可以作为SARS冠状病毒感染的辅助诊断手段.; 贾汝静袁志宏赵金存王炜赵振东高晓明徐晓军; 关键词：SARS冠状病毒组氨酸标签抗原性酶联免疫吸附实验

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王炜