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王甲甲: 作品数：42 被引量：130H指数：6; 供职机构：四川省人民医院更多>>; 发文基金：博士科研启动基金中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术农业科学更多>>

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γ-干扰素释放实验在结核病诊断中的应用价值分析: 目的：探讨γ-干扰素释放实验(interferon-gamma release assays,IGRA)在结核病诊断中的应用价值。方法：采用结核IGRA(Tuberculosis-IGRA,TB-IGRA)法分别检测11...; 王甲甲唐义斌张玲英洪华谭泰昌王智斌; 关键词：Γ-干扰素释放试验结核病涂阴肺结核

过氧化物酶6在肝脏缺血再灌注损伤模型中的表达及其意义被引量：1: 2015年; 【目的】探讨过氧化物酶6（PRDX6）在肝脏缺血再灌注损伤模型中的表达及其意义。【方法】建立肝脏缺血再灌注损伤模型，并设立正常对照组、假手术组、缺血再灌注组及槲皮素处理组。分别收集各组肝脏组织并提取总蛋白质，进行双向凝胶电泳、基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱鉴定，并用免疫组织化学法对PRDX6的表达进行验证。【结果】双向凝胶电泳显示，缺血再灌注损伤组、槲皮素组分别可检测到大约（825±29）、（831±27）个蛋白质点，经成组比较共计有44个蛋白质点差异明显，上调25个，下调19个。槲皮素能够诱导PRDX6的表达，且在再灌注后12 h点表达最高。【结论】PRDX6可能与槲皮素保护肝脏缺血再灌注损伤有关，将为槲皮素保护肝脏缺血再灌注损伤提供新的实验依据。; 王甲甲张娟钟佳伶黄文芳; 关键词：过氧化物酶

鼻咽癌双特异性抗独特型抗体疫苗的生物学活性鉴定及免疫机制研究: 第一章、鼻咽癌人源双特异性抗独特型抗体疫苗的制备及活性鉴定　　目的：构建能够表达全人源鼻咽癌双特异性抗独特型抗体的原核表达载体pET25b-G22-I50及单价抗独特型抗体的原核表达载体pET25b-G22、pET2...; 王甲甲; 关键词：鼻咽癌生物学活性体液免疫

基因工程双价抗体在肿瘤中的研究进展被引量：4: 2008年; 基因工程抗体技术的发展加速了单链抗体的应用,但其稳定性差,亲和力低,功能单一,体内清除过快等特点影响了它的广泛应用。双价抗体作为一种新型小分子抗体,具有双价的结合位点,能够使抗原分子上的两个表位交联或使两个分子连接,可以模拟完整的单克隆抗体的抗原抗体反应,其构建方法有亮氨酸拉链法、利用部分抗体恒定区法、连接肽法、利用双聚化结构法、knobs into holes技术等,在乳腺癌、直肠癌、淋巴瘤等的诊治方面均有很好的应用价值。; 王甲甲李官成; 关键词：双价抗体基因工程肿瘤

全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体的筛选与鉴定: 2009年; 目的从全人源抗鼻咽癌噬菌体抗体库中筛选特异性单链抗体（ScFv），并对其特异性进行鉴定。方法通过噬菌体表面展示技术把ScFv表达在噬菌体表面，以鼻咽癌细胞作为抗原，用抗原递减法，通过“吸附-洗脱-扩增”过程筛选并富集特异性抗体，及ELISA筛选，获得特异阳性克隆进行免疫组化鉴定并测序。结果通过对抗体库进行三轮正负淘洗和富集后，随机挑选4212个克隆进行ELISA，发现3个克隆对CNE2呈强阳性反应，而与人正常细胞系HUVEC等呈弱阳性反应或不反应。对克隆HNSA033进一步进行免疫细胞化学验证，结果与ELISA反应一致；免疫组织化学鉴定表明克隆HNSA033与鼻咽癌组织和鼻咽组织阳性率的差别有统计学意义。结论通过淘选富集、ELISA和免疫化学鉴定获得特异性较强的噬菌体克隆，为鼻咽癌发病机制的研究和临床诊断以及治疗奠定了基础。; 李艳东谢平丽王甲甲李跃辉胡锦跃李官成; 关键词：抗体

人源鼻咽癌双价抗独特型抗体疫苗的制备及活性鉴定: 目的:构建全人源鼻咽癌双价抗独特型抗体原核表达载体,并对其表达产物作初步鉴定。方法:利用分子克隆技术依次将人源鼻咽癌抗独特型抗体G22、I50基因插入到原核表达载体pET25b(+)中,经菌落PCR,双酶切验证并测序。阳...; 王甲甲郭锋杰李跃辉李官成; 关键词：鼻咽癌抗独特型抗体疫苗原核表达; 文献传递

不孕妇女TORCH病原体的感染及相关因素分析被引量：2: 2015年; 目的研究育龄妇女TORCH病原体感染与不孕的相关性,并对其可能的影响因素进行分析。方法采用化学发光法对2 343例孕早期妇女及1 356例不孕妇女进行TORCH 4项检测,对其阳性率进行比较。结果不孕妇女RV、HSV的感染率较高,且以30-34岁年龄段为主。不同季节不孕妇女TORCH的感染有统计学差异（P〈0.05）。不孕妇女TORCH的感染与受教育程度、家庭来源、动物接触史相关（P〈0.05）。结论受教育少、农村、有动物接触史均为TORCH感染的高危因素,不孕妇女应积极做好TORCH感染的筛查工作。; 王甲甲王智斌黄文芳; 关键词：育龄妇女不孕 TORCH

人源抗肝癌单链抗体SA3与增强型绿色荧光蛋白的融合表达及其体内靶向性研究(英文)被引量：1: 2011年; 目的:探讨人源抗肝癌单链抗体SA3与增强型绿色荧光蛋白(EGFP-SA3)的融合表达、纯化、复性及其体内靶向性。方法:将SA3,EGFP基因,插入pET-25b(+),构建EGFP-SA3/pET-25b(+)原核表达载体,测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导融合蛋白EGFP-SA3的表达,复性、纯化后经SDS-PAGE鉴定;EGFP-SA3与HepG2细胞经体外孵育后在荧光显微镜下观察单链抗体SA3与肝癌细胞的结合作用;然后通过尾静脉将其注射入荷肝癌裸鼠体内观察EGFP-SA3的体内靶向作用。结果:SA3,EGFP基因分别插入载体pET-25b(+)后,重组表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)分别行NcoI-XhoI和NcoI-EcoRI双酶切,结果发现在750 bp左右出现一条带,与EGFP基因大小一致,在1.5 kb左右处出现一条带,与EGFP和SA3两个基因片段的总大小一致,DNA测序结果证实融合表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)构建成功;重组表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE显示融合蛋白EGFP-SA3分子质量为58 kD,主要以包涵体的形式存在;纯化、复性后,免疫荧光检测结果显示SA3与HepG2细胞能特异性地靶向结合;注射了EGFP-SA3的荷肝癌小鼠的肿瘤部位有绿色荧光发出,显示EGFP-SA3具有良好的肿瘤特异性。结论:融合蛋白EGFP-SA3与HepG2细胞有较强的结合能力,单链抗体SA3有望用于肝癌的分子诊断和靶向治疗。; 黄建李跃辉郭锋杰童永清王甲甲胡锦跃李官成; 关键词：肝癌 SCFV EGFP

γ-干扰素释放实验在结核病诊断中的应用价值分析: 目的探讨γ-干扰素释放实验(interferon-gamma release assays,IGRA)在结核病诊断中的应用价值.方法采用结核IGRA(Tuberculosis-IGRA,TB-IGRA)法分别检测11...; 王甲甲唐义斌张玲英洪华谭泰昌王智斌; 关键词：Γ-干扰素释放试验结核病涂阴肺结核

槲皮素对缺血再灌注大鼠肝脏损伤的保护作用被引量：5: 2015年; 目的评估槲皮素对缺血再灌注大鼠肝脏损伤大鼠的保护作用。方法健康大鼠80只被随机分为对照组5只、假手术组25只、缺血再灌注组25只和槲皮素组25只,后3组再按不同灌注时限(0、6、12、24、72 h)分为5个亚组,每个亚组5只。分别于实验结束后留取大鼠血液及肝脏组织,用全自动生化分析仪检测血清中ALT、AST水平,竞争抑制ELISA法检测血清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平;HE染色法观察肝脏的形态学改变,并用原位末端标记法检测肝脏细胞的凋亡情况。结果肝脏缺血再灌注组各时点血清中ALT、AST、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α均有所升高,且以12 h最高,与对照组、假手术组相比差异有统计学意义(P均<0.05);除IL-6外,槲皮素组各时点以上检测指标与缺血再灌注组比较有统计学差异(P均<0.05)。光镜下,对照组、假手术组肝脏无明显改变;而在缺血再灌注后12 h,肝细胞变性明显,肝索结构消失,部分肝细胞灶状坏死;槲皮素组的肝脏仅部分细胞变性,部分肝索结构存在,该形态学变化与细胞凋亡指数的检测结果一致。结论槲皮素能够有效地改善大鼠肝脏缺血再灌注损伤。; 王甲甲钟佳伶张娟黄文芳; 关键词：槲皮素缺血再灌注损伤凋亡炎症因子

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