王磊
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：新疆乌鲁木齐兵团医院更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 建立一种简便的大鼠背根神经节神经元原代培养方法的建立
- 2014年
- 目的:建立一种简便易行地获取大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元原代培养的方法。方法:窒息法处死大鼠,打开胸腔经心脏放血后,从背部取出一段脊柱。将脊柱稍加修剪后,从中轴线处打开脊柱,暴露脊髓,在其两侧找到椎间孔内的为DRG,用器械离断神经纤维,取出DRG。Ⅰ胶原酶联合Trypsin-EDTA先消化DRG,再用吹法DRG以获得单个神经元;用TNB-100 basal Medium的复合培养液在经过0.1 mg/ml PolyD-lysine hydrobromide和0.01 mg/ml lamina包被的培养皿内,于5%CO2,37℃孵箱内培养48 h。免疫组织化学方法检测神经元内标志物BetaⅢTubulin的表达,用Alexa flour 488标记的二抗进行显色,倒置荧光显微镜下观察。结果:获得了单层贴壁的神经元,其胞体形状多样,突起生长良好,细胞之间正在逐步形成网络连接;免疫荧光染色显示,细胞的胞体和突起中均可高表达BetaⅢTubulin,且荧光染色较强。结论:运用该方法可以简便地从大鼠DRG内获得单层贴壁的原代神经元。
- 郭琼李甜冯树梅王磊
- 关键词：原代培养
- TGFβ_1及其受体在大鼠整胚及软骨雏形发育过程中的表达被引量：2
- 2012年
- 目的观察TGFβ1及TβRⅠ、TβRⅡ在大鼠整胚及软骨雏形中的表达,初步探讨它们与大鼠整胚及软骨雏形发育间可能的相互关系和作用机制。方法半定量RT-PCR分析3种因子在13～17d全胚中的变化情况;免疫组化法观察3种因子在13～17d软骨雏形中的表达及该组织发育结构特点。结果半定量RT-PCR显示,3种因子在发育13～15d表达呈递增趋势,16～17d出现下降。免疫组化显示,TGFβ1主要位于软骨雏形内的软骨骨祖细胞,TβRI、TβRII即可位于软骨骨祖细胞内,也可位于软骨外周的膜上及软骨雏形周围的间质内。结论 TGFβ1及TβRⅠ、TβRⅡ在大鼠整胚及软骨雏形发育过程中可能起着重要的调控作用,尤其是对组织器官形态的发生。
- 郭琼姜孝芳陈艳王磊
- 关键词：转化生长因子Β1胚胎
- 远端同源异型盒2和叉头盒O3a在大鼠脑皮质发育过程中的分布与表达被引量：1
- 2017年
- 目的探讨远端同源异型盒2(Dlx2)和叉头盒O3a(FoxO3a)在SD大鼠脑皮质发育过程中的表达特点。方法应用Real-time PCR法检测Dlx2 mRNA和FoxO3a mRNA分别在受孕11d(E11)、E13、E15、E17、E19及生后1d(P1)的表达情况;应用免疫组织化学技术显示Dlx2和FoxO3a在E11、E13、E15、E17、E19及P1蛋白的表达情况。结果 FoxO3a与Dlx2 mRNA在E11~P1均有表达,而FoxO3a mRNA表达高峰明显早于Dlx2 mRNA;Dlx2mRNA表达在E15~E17时大幅度上升,而在此之后始终保持这一高水平的表达;Dlx2 mRNA与FoxO3a mRNA的表达在E15~P1呈现出一致的变化趋势;Dlx2基因在E19时出现mRNA水平的高表达而未见蛋白表达。结论Dlx2和FoxO3a基因在胚胎后期鼠脑皮质中均有表达,且其表达趋势具有一定的一致性;两基因的分布随皮质分层而改变。
- 慕雅婷李艳郭琼王磊
- 关键词：大脑皮质实时定量聚合酶链反应
