王自章
- 作品数：12 被引量：184H指数：8
- 供职机构：中国科学院植物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 环境胁迫和激素诱导甘蔗ACC合成酶基因家族三个成员的表达被引量：8
- 2006年
- ACC合成酶(ACS)是高等植物乙烯生物合成途径中的限速酶。在克隆到甘蔗ACC合成酶基因家族3个成员Sc-ACS1、Sc-ACS2和Sc-ACS3的基础上,分别以它们作为探针,检测了激素诱导和环境胁迫对甘蔗苗期该3成员表达的影响。结果表明,乙烯利诱导Sc-ACS1在叶中表达,在根中不表达;Sc-ACS2在根、叶中表达;Sc-ACS3主要在根部表达,在叶中不表达。在甘蔗叶片中,Sc-ACS1对冷胁迫、暗培养和LiCl胁迫均有应答,并受植物生长激素IAA诱导而表达;Sc-ACS2无论是在生长激素诱导还是环境胁迫下,其mRNA均维持较低水平。
- 王爱勤杨丽涛王自章韦宇拓何龙飞李杨瑞
- 关键词：甘蔗ACC合成酶基因家族
- 大肠杆菌海藻糖磷酸合酶基因的克隆被引量：2
- 2002年
- 根据报道的大肠杆菌 (Escherichia coli)海藻糖 6磷酸合酶基因 (ots A) ,设计引物 ,通过 PCR技术从大肠杆菌 XLI菌株的总 DNA中扩增到一个 1 .4kb的片段。经克隆、测序分析 ,该片段长 1 42 5 bp并含一完整的开放读框 (ORF)。在核苷酸水平上 ,该 ORF与已报道的 ots A基因具有 99.86%的同源性。在氨基酸水平上 ,其推断性的编码产物蛋白与 Ots A具有 1 0 0
- 王自章张树珍李杨瑞
- 关键词：大肠杆菌克隆
- 乙烯生物合成途径中的两个关键酶基因的研究进展被引量：40
- 2004年
- 本文对植物激素乙烯生物合成途径中的两个关键酶基因即ACC合成酶基因(ACS)和ACC氧化酶基因(ACO)的克隆研究现状、表达及反馈调节等方面进行了评述。
- 王爱勤王自章杨丽涛韦宇拓李杨瑞
- 关键词：乙烯ACC合成酶ACC氧化酶反馈调节
- T-DNA转移研究进展被引量：18
- 2001年
- 植物遗传转化技术近年在农作物性状改良、植物生物反应器利用以及基因功能鉴定等方面得到了广泛的应用 .T -DNA转移是植物细胞农杆菌介导遗传转化整合和表达外源基因的基础 .农杆菌Ti质粒vir基因编码蛋白、农杆菌一些染色体基因编码蛋白及植物细胞一些基因编码蛋白或因子均参与T DNA转移 .转移过程包括农杆菌对植物细胞的识别、附着 ,细菌对植物信号物质的感受 ,细菌vir基因的诱导表达 ,T复合体的形成 ,跨膜运输 ,进核运输和整合等一序列过程 .植物细胞因子与农杆菌T DNA转移相关蛋白的相互作用最近被认为在T
- 王自章张树珍李杨瑞
- 关键词：农杆菌
- 农杆菌介导海藻糖合酶基因遗传转化甘蔗研究
- 该研究将来自担子菌灰树花的海藻糖合酶基因TSase插入到中间载体pBBB双考贝35s启动子下面构建植物表达载体pBBBT,然后导入超毒力农杆菌EHA105菌株.通过农杆菌介导法转化甘蔗的胚性愈伤组织,在PPT的选择压力下...
- 王自章
- 关键词：农杆菌介导遗传转化甘蔗
- 文献传递
- 甘蔗ACC氧化酶基因片段的克隆与序列分析被引量：23
- 2003年
- 1 -氨基环丙烷 - 1-羧酸 (ACC)氧化酶是植物乙烯合成的一个关键酶 ,乙烯作为一种内源激素 ,对植物生长、老熟过程有多方面的调节作用。根据报道的各种植物ACC氧化酶氨基酸序列上前后两个保守区设计两个简并引物 ,以甘蔗总DNA为模板 ,通过PCR扩增到一个 940bp的基因片段。将片段序列在NCBI的BLAST软件上进行同源性搜寻 ,显示的 63个序列全部是ACC氧化酶基因 ,因而认为克隆到的片段就是甘蔗ACC氧化酶基因的一个成员。经对不同植物来源的ACC氧化酶基因家族进行比较分析 ,去除一个 10 3bp的“内含子”后 ,推导的氨基酸序列为 2 79个残基 ,占推测全长氨基酸残基总数的 86%左右。经同源性分析 ,序列与毛竹和水稻ACC氧化酶的同源率达到 86%。系统进化分析表明 ,该序列最先与水稻、其次和香蕉的ACC氧化酶聚类 ,然后再与双子叶植物的ACC氧化酶聚类 ,符合按形态特征分类的血缘关系。基因的获得对下一步了解乙烯的合成表达与甘蔗生长。
- 王自章李杨瑞张树珍林俊芳郭丽琼
- 关键词：甘蔗克隆
- 甘蔗ACC氧化酶全长cDNA的克隆及序列分析被引量：10
- 2006年
- ACC氧化酶是高等植物乙烯生物合成途径中的限速酶。根据报道的植物ACC氧化酶基因序列设计特异引物，从甘蔗cDNA文库中克隆到-ACC氧化酶基因片段，命名为GZ-AC0，该基因长792bp，与甘蔗基因组文库中克隆的ACO基因片段仅18个碱基之差。根据该cDNA片段序列，设计两对末端扩增的特异引物，利用RACE-PCR技术，获得GZ-ACO片段的5’端和3’端序列。用VectorNTI7．0软件对三个序列进行拼接和分析，结果得到全长的甘蔗GZ-ACO氧化酶基因。GZ-ACO cDNA核苷酸序列长1307bp，具有一个972bp完整的读码框，启动子ATG位于126bp，终止子TAA位于1097bp，推导编码323个氨基酸。系统进化分析表明，GZ-ACO基因氨基酸序列与其它植物已报道的ACC氧化酶基因具有65％～86％的同源率，且与单子叶禾本科植物首先聚类，其次与单子叶芭蕉科、兰科植物聚类，最后与双子叶植物聚类，与植物形态的系统进化结果一致。该基因已在DDBJ／EMBL／GenBank基因数据库注册，注册号为AY521566。
- 王爱勤杨丽涛王自章韦宇拓何龙飞李杨瑞
- 关键词：ACC氧化酶CDNA克隆甘蔗基因
- 甘蔗基因组DNA提取方法的比较被引量：5
- 2004年
- 采用2×CTAB法和两种改进的SDS法分别从甘蔗不同的器官中提取DNA。通过对所提取的DNA浓度和纯度进行方差分析,并将所提取的DNA进行基因克隆和多态性扩增(RAPD),得到了较清晰的扩增图谱,克隆出目的基因片段,证明改进的SDSⅡ法是一种高质量去除多糖、色素和蛋白质等杂质的有效方法,所提取的DNA适合于甘蔗各分子生物学研究。
- 王爱勤杨丽涛王自章韦宇拓何龙飞李杨瑞
- 关键词：甘蔗CTABSDS
- 花生中DREB类转录因子PNDREB1的克隆及鉴定被引量：10
- 2009年
- 脱水响应元件结合因子(DREB)是一类对多个抗逆相关基因表达起调控作用的植物特有的转录因子,在植物抗逆能力综合改良方面具有重要作用。本研究通过筛选花生未成熟种子的cDNA文库,分离到一个DREB类基因——PNDREB1(FM955398)。该基因序列长度为687bp,推测编码蛋白含有229个氨基酸残基,相对分子量为24.7kD,理论等电点为5.97,与其他物种中该类转录因子序列同源性较高。利用酵母单杂交系统,对花生PNDREB1与DRE元件的特异识别和结合能力及其C-末端转录激活活性进行检测,显示,转入含有该基因及阳性对照基因的载体均可使酵母菌株正常生长,且具有显色反应,而转入空载体的酵母菌株不能生长,证明基因PNDREB1中的AP2结构域具有和DRE元件特异性结合的能力;同时,只有转入含有该基因C-末端片段及阳性对照基因的载体可使酵母菌株正常生长,并具有显色反应,而转入空载体的酵母菌株不能生长,说明其C-末端片段具有转录激活活性,该基因为DREB类转录因子。基因表达模式分析显示,PNDREB1为组成型表达,且被低温强烈、迅速诱导表达,并对干旱胁迫也有一定程度的响应,但对高盐和ABA处理没有响应。
- 张梅刘炜毕玉平王自章
- 关键词：花生DREB类转录因子酵母单杂交干旱
- 甘蔗乙烯合成酶基因家族三个成员的克隆与序列分析被引量：15
- 2005年
- ACC(1-aminocyclopropane-1-carboxylicacid)合成酶是高等植物乙烯生物合成途径中的限速酶。根据已克隆的植物ACS(1-aminocyclopropane-1-carboxylicacidsynthase)基因同源序列,设计简并引物,以甘蔗叶片总DNA为模板,通过PCR扩增,得到3条特异性强的扩增片段:Sc-ACS1为1041bp、Sc-ACS2为1345bp和Sc-ACS3为1707bp。将序列在GenBank核酸数据库进行同源性搜索,结果表明,3个片段均为ACS基因,推导编码的蛋白质序列分别包含326、242和310个氨基酸。其中,Sc-ACS1和Sc-ACS3同源性最高,核苷酸序列和蛋白质氨基酸序列分别有98%和96%同源,与禾本科植物玉米ZmACS6、水稻OS-ACS2、毛竹等ACS基因家族也有很高的同源性,核苷酸序列同源性为88%-98%,蛋白质氨基酸序列同源性为73%-81%。甘蔗Sc-ACS2与水稻OS-ACS5在核苷酸和氨基酸序列上分别有91%和79%同源性,但与甘蔗Sc-ACS1和Sc-ACS3基因成员之间,氨基酸同源性分别只有45%和49%。系统进化分析表明,Sc-ACS1和Sc-ACS3基因与玉米ZmACS6基因亲缘关系最近,而Sc-ACS2基因与水稻OS-ACS5基因亲缘关系最近。Southern杂交表明三基因在基因组中确实存在而且是多拷贝基因。三个片段已在GenBank数据库中注册,注册号分别为AY620985、AY620986和AY788919。
- 王爱勤杨丽涛王自章韦宇拓何龙飞李杨瑞
- 关键词：甘蔗ACC合成酶基因家族克隆
