申艳敏
- 作品数：2 被引量：16H指数：1
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：江苏省科技攻关计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人源抗菌肽LL-37在毕赤酵母中的高效表达及其活性检测被引量：15
- 2008年
- 根据GenBank CAA86115中的LL-37氨基酸序列,选择毕赤酵母偏好密码子,采用SOE方法合成了人源抗菌肽LL-37基因。所合成的LL-37基因全长为141bp,并在其N端引入kex2裂解位点,以保证表达抗菌肽具有天然N端。基因克隆入pPICZα-A质粒,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-LL-37。pPICZα-A-LL-37经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。PCR鉴定为阳性的酵母转化子经甲醇诱导分泌LL-37于发酵上清液,其表达量为206mg/L。表达产物LL-37耐热性强,在100℃条件下40min内抗菌活性不变,煮沸3h以上仍具有活性。琼脂糖孔穴扩散法检测显示LL-37对多种革兰氏阴性菌和阳性菌均具有很好的抑制活性,其对金黄色葡萄球菌CowanⅠ(Staphylococcus aureus)、致病性大肠杆菌K99(Enteropathogenic E.coli)和鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)的最小抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)分别为1.56μg/mL、3.12μg/mL和1.56μg/mL。
- 申艳敏魏建超尚书文牛明福周玉珍周斌曹瑞兵陈溥言侯继波
- 关键词：基因设计分泌表达活性检测
- 人源抗菌肽LL-37在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性研究
- 自发现青霉素以来,抗生素一直是人类治疗病原微生物感染疾病的有力武器,但随着抗生素的长期广泛应用,病原菌耐药性的形成日趋严重,因此迫切需要开发新型抗生素,目前从微生物中寻找新生物的难度已愈来愈大。抗菌肽的发现为开发新型抗生...
- 申艳敏
- 关键词：毕赤酵母分泌表达生物活性
- 文献传递
