蔡松柏
- 作品数:4 被引量:17H指数:4
- 供职机构:上海市第一人民医院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 至真方调控Hedgehog信号通路对HCT-8/VCR多药耐药的影响被引量:5
- 2015年
- [目的]探讨至真方含药血清对人大肠癌耐长春新碱细胞株HCT-8/VCR多药耐药性的逆转作用,及对Hedgehog信号通路中Smo、Gli1表达的影响。[方法]CCK-8法测定细胞多药耐药性及存活率;Real-time PCR及Western blot分别从基因及蛋白水平检测P-gp和Hedgehog信号通路中Smo、Gli1的表达。[结果]至真方含药血清作用24h、48h后,HCT-8/VCR生存率明显降低;至真方含药血清作用24h后,HCT-8/VCR细胞P-gp(P-Glycoprotein)、Smo、Gli1基因及蛋白表达均降低,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),与阳性对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]至真方对HCT-8/VCR的逆转作用可能与其抑制Hedgehog信号通路,下调该通路相关蛋白表达进而下调P-gp表达,增加HCT-8/VCR对化疗药物的敏感性有关。
- 梁伟王慧君唐阳蔡松柏张旭王松坡
- 关键词:大肠癌多药耐药HEDGEHOG信号通路
- Hedgehog信号通路异常对人结肠腺癌多药耐药性的影响被引量:5
- 2012年
- 目的:探讨Hedgehog(Hh)信号通路与人结肠腺癌细胞多药耐药的关系。方法:以结肠腺癌敏感细胞株HCT-8和多药耐药细胞株HCT-8/VCR为研究对象,采用Hh信号通路激动剂SAG及抑制剂GANT61进行干预。实验分为4组:HCT-8组、HCT-8/VCR组、HCT-8+SAG组(3nmol/L SAG干预48h)以及HCT-8/VCR+GANT61组(5μmol/L GANT61干预48h)。采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞耐药性及存活率。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别从基因和蛋白水平检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)及Hedgehog信号通路相关蛋白Smo和Gli1的表达。结果:HCT-8/VCR组Smo、Gli1和P-gp基因及蛋白表达高于HCT-8组(P<0.05);HCT-8+SAG组24和48h时的细胞存活率及Smo、Gli1、P-gp基因和蛋白表达水平均高于HCT-8组(P<0.05);HCT-8/VCR+GANT61组24和48h时的细胞存活率及Smo、Gli1、P-gp基因和蛋白表达均低于HCT-8/VCR(P<0.05)。结论:人结肠腺癌细胞多药耐药性与Hh信号通路异常激活有关。
- 唐阳蔡松柏张旭王松坡
- 关键词:结肠肿瘤P糖蛋白
- 至真方含药血清对人大肠癌多药耐药细胞HCT-8/VCR内核因子κB活性及P-糖蛋白表达与功能的抑制作用被引量:5
- 2011年
- 目的:探讨至真方是否能够调节核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)并影响P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达与功能。方法:细胞增殖-毒性检验(cell counting kit-8,CCK-8)法鉴定HCT-8/VCR细胞株的多药耐药性。分别用8%、16%、32%体积分数的至真方含药血清干预人大肠癌敏感细胞株HCT-8与多药耐药细胞株HCT-8/VCR,时间为24h。CCK-8法检测细胞的存活率以筛选含药血清的实验浓度,酶联免疫吸附测定法检测细胞核内NF-κB的转录活性,激光共聚焦显微镜检测P-gp在细胞内的分布,流式细胞仪测定细胞内罗丹明123(rhodamine 123,Rh123)的平均荧光强度。结果:HCT-8/VCR含药血清组NF-κB活性较HCT-8/VCR阴性对照组明显降低(P<0.01),在一定范围内与浓度呈负相关。P-gp逐渐弥漫分布于细胞质和细胞核,并出现核固缩、核裂解,同时平均荧光强度呈浓度梯度下降(P<0.01)。在Rh123蓄积实验中,经8%、16%、32%含药血清作用后,HCT-8/VCR细胞波峰右移,细胞内荧光强度明显增强(P<0.01)。结论:至真方含药血清能抑制HCT-8/VCR细胞内NF-κB的活性,降低P-gp的表达与功能。
- 蔡松柏张旭陈志霞孔令春王松坡
- 关键词:结直肠肿瘤P糖蛋白
- 至真方对人大肠癌多药耐药细胞株HCT-8/VCR中核因子-κB及P糖蛋白表达的影响被引量:5
- 2011年
- [目的]从核因子-κB(NF-κB)途径研究至真方对大肠癌多药耐药(MDR)细胞株———人大肠癌细胞株及长春新碱细胞株(HCT-8/VCR)的逆转作用及P糖蛋白(P-gp)表达的影响。[方法]CCK-8法测定HCT-8/VCR的MDR性及至真方含药血清对HCT-8/VCR细胞株的逆转作用;Real-time PCR及Western blot检测NF-κB/p65、MDR1mRNA,NF-κB/p65、P-gp蛋白的表达。[结果]至真方含药血清可明显抑制HCT-8/VCR细胞生长。不同浓度至真方含药血清作用24h后,HCT-8/VCR细胞NF-κB/p65、MDR1mRNA及NF-κB/p65、P-gp蛋白表达均降低,且呈浓度依赖性,与阴性对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]至真方对人大肠癌MDR细胞株HCT-8/VCR的逆转作用可能与其下调NF-κB、P-gp的表达相关。
- 张旭蔡松柏陈志霞孔令春王松坡
- 关键词:大肠癌多药耐药核因子-ΚBP糖蛋白