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袁青

作品数：1 被引量：5H指数：1
供职机构：山东省医学科学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇酶链反应
  • 1篇膜炎
  • 1篇聚合酶
  • 1篇聚合酶链反应
  • 1篇棘阿米巴
  • 1篇棘阿米巴角膜...
  • 1篇角膜
  • 1篇角膜炎
  • 1篇合酶
  • 1篇感染性
  • 1篇阿米巴

机构

  • 1篇山东省医学科...

作者

  • 1篇孙士营
  • 1篇宋子成
  • 1篇袁青
  • 1篇赵格

传媒

  • 1篇中华实验眼科...

年份

  • 1篇2013
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
直接PCR法对感染性棘阿米巴角膜炎的诊断价值被引量：5
2013年
背景棘阿米巴角膜炎的致盲率极高，发病初期易误诊为真菌性角膜炎或病毒性角膜炎，常规的临床诊断方法费时较长，特异性差，极易错过治疗的“时间窗”。常规PCR法检测简单、特异、有效，但由于病变标本取材量少，不易提取组织DNA，限制了其临床应用。目的探讨非提取组织DNA的直接PCR法扩增棘阿米巴虫株18SrRNA保守序列在棘阿米巴角膜炎快速诊断中的可行性。方法从山东省眼科研究所暨青岛眼科医院诊治的10例棘阿米巴角膜炎患者的病变角膜中分离10株棘阿米巴虫株，经鉴定均为T4基因型虫株。用直接PCR法分别扩增棘阿米巴原虫、白念珠菌、绿脓杆菌、I型单纯疱疹病毒以及正常人角膜上皮细胞以确定该方法的特异性。将棘阿米巴原虫稀释至不同的浓度以确定直接PCR法的敏感性。采用SPF级6周龄健康雌性BALB／c小鼠构建棘阿米巴角膜炎动物模型，于感染后第1、3、5、7、10、15天获取角膜组织，分别进行直接PCR、实时定量PCR（real—timePCR）、K0H封片镜检和原虫培养鉴定，比较各种方法的有效性和可行性。结果直接PCR法仅能扩增棘阿米巴DNA，其他病原体DNA均未扩增出；在每个获取的棘阿米巴角膜炎样本中最少可检测到10个棘阿米巴原虫。在棘阿米巴角膜炎小鼠模型中，直接PCR法在感染后第1、3、5、7、10、15天的阳性检出率分别为80．0％、90．0％、80．0％、70．0％、70．0％和50．0％，总阳性率为73．3％，高于原虫培养法的31．7％，差异有统计学意义（P=0．005）；K0H封片镜检的总阳性率为56．7％，real—timePCR法检测的总阳性率为61．7％，均略低于直接PCR法，差异均无统计学意义（P=0．056、0．172）。结论直接PCR法操作简单，在上述4种方法中对棘阿米巴原虫检测的特异性和敏感性最高，能够快速诊断棘阿米巴角膜炎，尤其对于待检标本少而
袁青宋子成孙士营赵格
关键词：棘阿米巴角膜炎聚合酶链反应
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