郑学勤
- 作品数：326 被引量：2,962H指数：29
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 香蕉花叶心腐病的血清学诊断及检测方法的建立被引量：5
- 1994年
- 利用葡萄球菌Ａ蛋白、辣根过氧化物酶标记Ａ蛋白和黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）专化性抗血清组合成ＳＰＡ—ＥＬＩＳＡ，建立了香蕉花叶心腐病病原ＣＭＶ的血清学检测方法。该方法灵敏、快速、特异性强。实验结果表明，Ａ蛋白包被浓度可在１０—０．１μｇ／ｍＬ范围内选择，本实验用１μｇ／ｍＩＳＰＡ包被酶联板，用１：１００１稀释度的抗血清直接作第一抗体，用１：１０００相同的抗血清作第二抗体，所用酶标Ａ蛋白的工作浓度为１：１００。用该方法可检测到低于７８ｎｇ／ｍＬ的提纯病毒，香蕉病株汁液稀释到３１２５倍仍呈阳性反应。对田间表现各种症状的病株从叶片、中脉、假茎不同部位诊样取断，结果表明，该方法能有效地区分由ＣＭＶ引起的香蕉花叶心腐病和束顶病以及健康植株。
- 刘志昕潘俊松郑学勤
- 关键词：香蕉花叶心腐病黄瓜花叶病毒酶联免疫吸附测定血清学诊断病毒检测
- CMV香蕉分离物抗血清的制备及应用研究被引量：8
- 1994年
- 用从海南的香蕉花叶心腐病病株中获得的黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）分离物作毒源，利用烟草进行肉毒繁殖，并通过ＰＥＧ、差速离心获得了较高纯度的提纯病毒，用其对家兔间隔多次注射方法进行免疫，成功地制备出大量抗血清。琼脂免疫双扩散和间接ＥＬＩＳＡ方法测抗血清效价分别达１／１２８和１０－６。实验结果表明，该血清和ＣＭＶ有特异件，在ＣＭＶ不同分离物间的反应没有明显差别。该血清被用于香蕉花叶心腐病的血清学检测研究，在ＳＰＡ—ＥＬＩＳＡ实验中用做第一、第二专化抗血清的适宜工作浓度分别为１０－４和１０－３，在此条件下检测提纯病毒的灵敏度可达到２．４ｎｇ／ｍＬ，并通过实验方法证明香蕉汁液中近乎相同含量的病毒可被检测出来。本文还利用血清学方法对田间香蕉病株中病毒的分布，试管苗繁殖过程中病毒的传带等问题进行了研究和讨论。
- 刘志昕潘俊松郑学勤
- 关键词：香蕉花叶心腐病黄瓜花叶病毒血清学
- 香蕉束顶病毒提纯研究初报被引量：3
- 1994年
- 用液氮冷冻粉碎病组织，经匀浆后进行差速离心和蔗糖密度梯度离心的方法，从海南采集的感染束顶病的香蕉病株中提纯到一种直径１８ｎｍ的类似球形病毒的粒体，这种粒体可被澳大利亚ＢＢＴＶ抗体在免疫电镜中捕获。经硫酸铯平衡梯度离心后的提纯液具有典型的紫外吸收峰，最高吸收在２５８ｎｍ波长处，最低吸收在２４０ｎｍ波长处，Ａ２６０／Ａ２８０值为１．４２，提纯病毒产量每公斤组织少于０．５ｍｇ。
- 刘志昕郑学勤相宁张成良
- 关键词：香蕉香蕉束顶病毒提纯血清学诊断电子显微镜检查
- 用RAPD技术鉴定橡胶树抗白粉病基因连锁标记被引量：30
- 1994年
- 用52种RAPD引物对橡胶树11个抗白粉病品系和11个感病品系基因组DNA进行RAPD分析,找到了一个和橡胶树抗白粉病表型密切相关的DNA片段,此片段长390bp,命名为opv—390。opv—390为11个抗性品系所共有和11个感病品系所没有。用ECL(enhanced cheminesence)酶标法标记抗性品系RRIC52(CK)的OPV390为探针,经Southern blot表明,该序列在6个抗性品系中均为单一拷贝或低拷贝,而感病品系皆不含此序列,由此看来,OPV—390可作为橡胶树抗白粉病基因紧密连锁的RAPD标记。这为今后钓取橡胶树抗白粉病基因的工作打下了基础。
- 陈守才邵寒霜胡东琼林盛郑学勤
- 关键词：RAPD标记橡胶树白粉病抗病性
- 侵染兰花的齿兰环斑病毒的分离、鉴定及检测研究被引量：8
- 1994年
- 从叶片表现褪绿、褐色坏死斑的卡特兰病株中获得一个病毒分离物，利用番杏进行多次单斑分离纯化，并用其做繁殖寄主，来用ＰＥＧ沉淀和差速离心等方法获得提纯病毒。该病毒分离物提纯液具有典型的核蛋白紫外吸收特征，电镇观察病毒粒体呈直杆状，可被齿兰环斑病毒抗血清特异装饰，琼脂免疫双扩散和ＥＬＩＳＡ实验表明，读分离物和ＯＲＳＶ血清学关系密切，和ＴＭＶ有部分同源关系，ＳＤＳ—ＰＡＧＥ表明病毒外壳蛋白由一种分子量为１７．３ＫＤ亚基构成，琼脂糖电泳显示单—ＲＮＡ组份。根据鉴别寄主症状、位体形态组成等理化特征，以及血清学特性，鉴定该分离物属于烟草花叶病毒组，和齿兰环斑病毒已报导的一些分离物比较接近。用纯化病毒免疫家兔，成功地制备出特异性抗血清，并用ＳＰＡ—ＥＬＩＳＡ方法对一些兰花病株进行了检测研究。
- 刘志昕潘俊松郑学勤
- 关键词：兰花齿兰环斑病毒烟草花叶病毒血清学检测
- 番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因及抗菌肽D基因双抗表达载体的构建被引量：3
- 1994年
- 选取分别被克隆到Ｃｏ２４质粒和ＢＳ质粒上的番木瓜环斑病毒外壳蛋白（ＰＲＳＶ—ＣＰ）基因和柞蚕抗菌肚Ｄ（ＣｅｃｒｏｐｉｎＤ）基因为材料，构建了单抗表达载体ＦＫ３和ＰＣｏ２５，进一步构建了双抗植物表达载体ｐＫＰＴ。这为开展单抗和多抗植物基因工程的研究提供了重要途径。
- 张锡炎郑学勤伍世平王君健梁小友
- 关键词：番木瓜
- 卡瓦胡椒及胡椒的荧光AFLP分子标记研究被引量：2
- 2007年
- 对6份卡瓦胡椒材料、23份栽培胡椒和野生胡椒材料、1份不同属的草胡椒材料、1份不同科的普通烟材料,共计31份试验材料,进行荧光AFLP分子标记,研究卡瓦胡椒与胡椒及其他近缘野生种的亲缘关系。结果表明,在相似系数0.52处将31份种质划分为5个类群,第1个类群有普通烟,第2个类群有草胡椒,第3个类群是卡瓦胡椒,第4个类群有胡椒,第5个类群有山胡椒、蒌叶和蒟蒌。说明卡瓦胡椒与胡椒及其他近缘野生种的亲缘关系有一定距离,为卡瓦胡椒真伪性的分子鉴定和构建卡瓦胡椒的指纹图谱提供了基础性的工作。
- 施江辛莉杨彦郑学勤
- 关键词：卡瓦胡椒胡椒扩增片段长度多态性亲缘关系
- 柞蚕抗菌肽D基因转化广藿香的研究被引量：9
- 1994年
- 结果表明，柞蚕抗菌肽Ｄ（Ｃｅｃｒｏｐｉｎ－Ｄ）对广藿香青枯病的病原细菌ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓＳｏｌａｎａｃｅｒｕｍ有很强的抑制作用。通过农杆菌介导的方法将Ｃｅｃｒｏｐｉｎ－Ｄ基因导入广蕾香细胞，获得５株转基因植株，并繁殖成无性系。５个无性系在与病原菌共培养时都表现出一定的抗性。
- 张家明郑学勤孙雪飘
- 关键词：基因转移广藿香
- 新型嵌合抗菌肽SB基因的合成被引量：3
- 2002年
- 根据天然抗菌肽B的结构特点,选用植物偏爱密码子,设计相应编码区,加接大麦α-淀粉酶信号肽序列,并对碱基序列作如下调整:（1）将编码区中Met替换成Val;（2）N端增加三个氨基酸;（3）用Gly残基替代C端的酰胺。利用三个寡聚核苷酸单链互为引物与模板,PCR扩增技术合成全长207bp的新型抗菌肽基因,克隆于pGEM-T Easy载体上,经DNA序列分析证实,合成的SB嵌合基因碱基序列符合设计要求。
- 李文斌祁贤张治礼郑学勤
- 关键词：抗菌肽植物细菌性病害转基因
- 双价抗菌肽基因表达载体的构建被引量：2
- 1994年
- 将人工合成的抗菌肽Ｄ基因和抗菌肽Ｂ基因克隆到同一植物表达载体ｐＢⅠ１２１，且各自具有其３５ｓ启动子和Ｎｏｓ终止子。先将抗菌肽Ｄ基因及其启动子和终止子克隆到ｐＢ１２１ＨｉｎｄⅢ位点获得ｐＥＣＶⅠ重组子。然后将抗菌肽Ｂ基因克隆到ｐＥＣＶⅠ的ＢａｍＨⅠ位点，经Ａｇａｒｏｓｅｇｅｌ检测和酶切鉴定获得具有抗菌肽Ｄ，抗菌肽Ｂ基因的双价基因表达载体ｐＥＣＶⅡ。
- 张银东金小平曾宪松彭存智郑学勤
- 关键词：抗菌肽D基因
