陈陵
- 作品数：77 被引量：236H指数：10
- 供职机构：解放军第三二四医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 针对端粒酶蛋白催化亚单位的肿瘤免疫治疗研究被引量：17
- 2005年
- 端粒酶蛋白催化亚单位(hTERT)相对分子质量Mr 127 000, 包含1 132个氨基酸,其基因位于5号染色体短臂的最末端(5p15.33),在90%以上的人类肿瘤中高表达,而正常成熟组织中则基本没有表达,可作为广谱的抗肿瘤治疗分子靶点.DC是已知体内激活静息T细胞功能最强的专职抗原递呈细胞,经DC递呈hTERT抗原表位信息后,CTL能识别从hTERT提取的多肽表位,并在体外杀伤多种组织来源的hTERT阳性的肿瘤细胞.因此hTERT是迄今发现的一个最具应用前景的肿瘤广谱相关抗原,针对hTERT的肿瘤免疫基因治疗有可能成为肿瘤免疫治疗的又一研究热点.
- 陈陵杨仕明蔡永国房殿春李晶晶罗元辉
- 关键词：亚单位抗原递呈细胞T细胞功能体外杀伤5号染色体
- hTERT基因修饰骨肉瘤U-2 OS细胞后生物学行为的改变
- 目的观察 hTERT 基因修饰对人骨肉瘤细胞系 U-2 OS 生物学行为的影响。方法采用脂质体法将克隆有人全长 cDNA hTERT 的真核荧光质粒(pIRES2-EGFP-hTERT)转染端粒酶阴性的人骨肉瘤 U -2...
- 陈陵房殿春汤旭东陈婷余松涛罗元辉杨仕明
- 文献传递
- hTERT基因修饰对树突状细胞生物学行为的影响
- ＜正＞目的:观察hTERT基因修饰对树突状细胞生物学行为的影响。方法:用负载人全长端粒酶逆转录酶（hTERT）目的基因的复制缺陷型腺病毒,感染原代培养的人树突状细胞（DC）,向DC转导hTERT基因,并进行免疫组化、We...
- 陈陵梁光萍苏勇跃蔡永国陈婷汤旭东房殿春罗元辉杨仕明
- 文献传递
- 负载hTERT复制缺陷型腺病毒的包装及鉴定被引量：8
- 2006年
- 目的:构建负载人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的复制缺陷型腺病毒.方法:将克隆有正义hTERTcDNA的腺病毒穿梭质粒pDC315-hTERT与腺病毒包装质粒pBHGlox-DeltaE1,3Cre共转染人胚肾293细胞(HEK293),包装负载hTERT基因的复制缺陷型腺病毒表达载体(Ad-hTERT).对Ad-hTERT扩增、纯化并浓缩后,进一步行感染性鉴定、电镜鉴定及双引物PCR鉴定.结果:纯化浓缩后的Ad-hTERT滴度可达5×1012pfu/L.电镜下可见在HEK293细胞中形成的病毒颗粒,PCR双引物鉴定Ad-hTERT可扩增出Ad及hTERT特异片段,而对照则不能扩出hTERT片段.结论:成功构建了负载hTERT基因的复制缺陷型腺病毒.
- 陈陵向国春李向红蔡永国李晶晶房殿春罗元辉李志宏杨仕明
- 关键词：人端粒酶逆转录酶
- 肝素酶特异性细胞毒T淋巴细胞表位多抗原肽负载的树突状细胞疫苗体外抗肿瘤免疫效应研究被引量：4
- 2011年
- 目的研究肝素酶(heparanase,Hpa)细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位多抗原肽(multi-ple antigen peptides,MAP)疫苗能否诱导更强的Hpa特异性CTL反应。方法 HLA-A2.1限制性肝素酶CTL表位多抗原肽负载正常人外周血来源(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)树突状细胞(dendritic cell,DC),诱导CTL,采用4 h标准51Cr释放实验检测上述CTL对不同肿瘤细胞的免疫杀伤效应;采用ELISPOT实验检测效应细胞分泌IFN-γ的能力。结果肝素酶CTL表位MAP疫苗诱导的CTL对Hpa阳性且HLA-A2.1匹配的KATO-Ⅲ胃癌细胞、U2OS骨肉瘤细胞、SW480结肠癌细胞具有杀伤效应,且其杀伤效应强于相应的单肽,在最大效应细胞/靶细胞(effector/target,E/T)时高出率均大于16%;其对HLA-A2.1阴性的HepG2肝癌细胞和Hpa阴性的MCF-7乳腺癌细胞不具有杀伤效应,但是对MCF-7/Hpa乳腺癌细胞和HepG2/HLA-A2肝癌细胞具有杀伤效应,且其杀伤效应强于相应的单肽,在最大E/T时高出率均大于18%;其对自体淋巴细胞和DC不具有杀伤效应。另一方面人肝素酶CTL表位MAP疫苗诱导的IFN-γ分泌水平强于相应的单肽。结论肝素酶CTL表位MAP疫苗能激发较相应单肽更强的特异性和非特异性抗肿瘤效应。
- 王国珍汤旭东吴玉云李宁李长珠陈陵房殿春杨仕明
- 关键词：肝素酶CTL表位多抗原肽树突状细胞
- hTERT基因修饰树突状细胞对肿瘤细胞的免疫效应研究
- 研究背景:肿瘤生物治疗作为肿瘤综合治疗的组成部分,即可以独立地治疗肿瘤,又可与手术及放、化疗结合,具有疗效高、特异性强、副作用小等优点,近年来越来越受到人们的关注。树突状细胞(dendritic cell,DC)是目前发...
- 陈陵
- 关键词：端粒酶逆转录酶树突状细胞DNA重组腺病毒免疫效应
- 文献传递
- 负载hTERT调控相关miR-138慢病毒的包装及鉴定
- 2011年
- 目的:构建hTERT(人端粒酶逆转录酶)调控相关miR-138慢病毒表达载体。方法:化学合成miR-138前体序列,连接到包含U6启动子及GFP(绿色荧光蛋白)报告基因的慢病毒载体pGCL-GFP中,获得重组质粒,经双酶切和测序鉴定后,与慢病毒包装质粒pHelper 1.0及pHelper 2.0共转染至HEK 293T细胞包装病毒,并对病毒进行鉴定。结果:双酶切和测序结果证实miR-138前体核苷酸链序列插入正确,包装的慢病毒滴度达7×107TU/ml;包装成功的慢病毒可有效增加感染细胞内miR-138的表达丰度,并可下调hTERT表达水平。结论:成功包装并鉴定人miR-138慢病毒表达载体。
- 陈陵熊晓峰高军邹利全张方征王洪斌
- 关键词：微RNAS慢病毒属人端粒酶逆转录酶转录后调控
- 人肝素酶RNAi序列的筛选及鉴定被引量：7
- 2007年
- 目的筛选及鉴定有效人肝素酶(heparanase,Hpa)RNA干扰(RNA interference)序列。方法通过在线网络软件选择3个Hpa RNAi的靶点,再设计1组无关序列作阴性对照。通过基因重组技术,把3个干扰片段及阴性对照片段分别克隆入质粒pGenesile-1,脂质体法稳定转染至HepG2肝癌细胞;经G418抗性筛选后各挑选2个阳性克隆进行扩大培养;Western blot检测不同克隆肝素酶蛋白的表达水平,并进一步采用RT-PCR验证筛选克隆肝素酶mRNA的表达水平。结果通过在线网络软件设计3个RNA干扰序列,分别为Hpa/RNAi-1:GGCTATCTCTTCTGTTCAA,Hpa/RNAi-2:TCCT-GTCCGTCACCATTGA,Hpa/RNAi-3:CTCAGTTGCTCCTGGACTA及阴性对照序列Hpa/RNAi-N:CTACCGTTGTATAGGTGT;测序证实克隆入pGenesil-1载体的3个干扰序列及阴性对照序列与设计序列完全一致;经G418抗性筛选后形成的阳性克隆采用Western blot检测其肝素酶蛋白的表达,结果表明3个干扰序列对HepG2细胞人肝素酶蛋白的表达均有抑制作用,其中Hpa/RNAi-1和Hpa/RNAi-3干扰链的抑制效果最好,分别达到57%和71%;RT-PCR检测结果亦表明Hpa/RNAi-1和Hpa/RNAi-3序列在mRNA水平对肝素酶有较好的抑制效果。结论成功筛选出有效的人肝素酶RANi序列。
- 熊震汤旭东房殿春陈婷余松涛陈陵罗元辉杨仕明
- 关键词：RNA干扰SIRNA肝癌
- hTERT基因修饰DC对不同类型肿瘤细胞的免疫杀伤效应研究
- 目的研究 hTERT 基因修饰树突状细胞(DC)诱导产生的细胞毒 T 淋巴细胞(CTLs)对不同肿瘤细胞系的免疫杀伤效应。方法采用密度梯度离心法分离并得到人外周血白细胞(PBMCs),利用 rhGM -CSF、rhIL-...
- 陈陵蔡永国房殿春汤旭东陈婷余松涛熊震罗元辉杨仕明
- 文献传递
- 肝素酶：一种新的广谱的肿瘤转移相关抗原在中晚期肿瘤免疫治疗中的作用研究进展
- 肿瘤细胞要发生转移,就必须同时破坏构成细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的两种主要成分：结构蛋白和蛋白多糖。在过去的10多年中,研究兴趣大多集中在以结构蛋白为底物的基质金属蛋白酶 (MMPs)...
- 杨仕明房殿春汤旭东陈婷熊震陈陵蔡永国
- 文献传递
