- 新型、简捷、有效的方法构建基于腺病毒载体系统的cDNA表达文库
- 基因组测序和生物信息学的进展产生了大量未知功能的基因;多年来已知基因的完整功能谱还很缺乏;由于特殊细胞型或发育阶段中基因及环境因子间的复杂相互作用,基因功能也具可变性。cDNA克隆表达是鉴定赋予特殊细胞可选择表型的基因的...
- 马立新马琪徐松
- 文献传递
- 高纯度甘露低聚糖的研究
- 马立新黄代勇汪修武蒋思婧刘全新马琪黄元清李小虎熊永松彭冬秋
- 该项目以东方天琪(仙桃)生物工程有限公司和湖北大学合作研制开发的以魔芋工程菌为基础，研究探索出了魔芋工程菌发酵产生中性β-甘露聚糖酶的生产工艺，并以魔芋精粉为原料，制备出高纯度甘露低聚糖。该项目涉及基因工程、生物工程、发...
- 关键词：
- 关键词：甘露低聚糖食品配料饲料添加剂生产工艺
- 构建T载体用于PCR克隆
- 2005年
- 通过克隆甘露聚糖酶基因到pMD-18T载体构建了质粒pMD-18Tman2XcmI,克隆的甘露聚糖酶基因两侧各引进了一个特定的XcmI酶切位点;用XcmI酶切质粒pMD-18Tman2XcmI可以制备T载体.因为甘露聚糖酶基因作为填充片段和筛选标记受半乳糖苷酶基因启动子的控制,甘露聚糖酶能够表达,从而水解甘露聚糖产生水解圈,指示转化了部分酶切质粒的背景菌落.此外,在甘露聚糖酶基因中存在第3个不同序列的XcmI酶切位点,因此残余的甘露聚糖酶基因引起的背景可以进一步降低.抽提大量质粒贮存,随时制备T载体使用,增加了克隆的稳定性.该T载体克服了一般T载体质量不稳定,费钱,克隆效率低,假阳性高的缺点.使用构建的T载体完成了10个基因的克隆,结果表明重组效率达到了90%～100%.
- 马琪周莉马立新
- 关键词：T载体DNA克隆PCR
