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补肾健脾方抑制裸鼠高转移原位肝癌切除术后肿瘤复发以及对索拉非尼的增效减毒作用被引量：8: 2015年; 目的探究补肾健脾方对人肝癌高转移原位移植瘤裸鼠切除术后肿瘤复发的影响以及对索拉非尼的增效减毒作用。方法剥取人肝癌高转移原位移植裸鼠模型(HCCLM3)肝癌瘤体,切1 mm×1 mm×1 mm大小,原位植入实验裸鼠肝脏内,术后常规无菌饲养。术后第15天开腹行新生肿块切除术,术后同前饲养。将实验裸鼠分为补肾健脾方组(A组)、索拉非尼组(B组)、联合用药组(C组)、模型对照组(D组),每组7只;于第2次手术后第3天开始,根据裸鼠体质量给予相应干预,均灌胃给药,连续给药4周,每天1次。记录给药前1天、给药后第7天、第14天、第21天、第28天(D0、7、14、21、28)裸鼠体质量以及给药后每天饲料消耗量,共28 d。最后一次给药结束48 h后处死裸鼠,采集血液、瘤体标本,测量瘤重、瘤体体积,并检测血常规指标,包括白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)。结果 1瘤重和瘤体体积:与D组比较,A、B、C组均能显著减轻复发瘤体重量并缩小体积(P<0.001);C组比A组更能降低瘤重及其体积(P<0.05)。2鼠重:与A组比较,B、C、D组差异均有统计学意义(P<0.05);与D0比较,D7、D14、D21、D28各组裸鼠体质量均有不同程度的降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。裸鼠体质量下降值从小到大依次为A组(0.60±1.75)g,C组(1.29±1.63)g,D组(1.57±1.84)g,B组(2.14±2.40)g。3饲料消耗量:A组、B组、C组和D组每组裸鼠饲料消耗总量组间比较差异显著(P<0.001);与A组比较,B、C、D组差异有统计学意义(P<0.001);D组与C组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后A组裸鼠饮食量呈上升趋势,C组呈缓慢上升后稳步下降趋势,B和D组饲料消耗量减少最为明显。4血常规:各项指标4组组间比较均有统计学差异(P<0.05)。血象4个指标可见,A组与D组比较差异无统计学意义(P>0.05),WBC、RBC、HGB水平A组均略高于D组,A组与B、C两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);各; 吴婷婷吴伟忠高东梅钟薏曹晟丞张士强杨蕴蒋海燕夏晓婷吕俊强; 关键词：补肾健脾方肝癌术后索拉非尼增效减毒

多重定量抗体芯片检测系统在肝癌早期诊断中的应用被引量：6: 2012年; 目的利用多重定量抗体芯片同时检测肝细胞癌（HCC）及肝硬化患者血清中肿瘤相关血清学标志物的水平，建立HCC早期诊断模型，以提高HCC早期诊断的准确度。方法运用双抗体夹心原理建立了相关指标的多重定量抗体芯片检测系统，8种肿瘤相关血清学标志物作为芯片检测目标：甲胎蛋白（AFP）和7种细胞因子包括肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子、白细胞介素6、白细胞介素8、白细胞介素10、转化生长因子β1和血管内皮生长因子。应用该系统检测临床确诊的160例HCC和58例肝硬化（LC）患者血清，随机抽取其中60%为训练集（HCC96人；LC36人），40%为测试集（HCC64人；LC22人），通过对结果和临床资料进行回顾性研究，应用SPSS软件做logistic回归分析，利用训练集创建诊断模型，获得受试者工作曲线（ROC曲线下面积以及cutoff值，并在测试集中验证模型的诊断价值。结果AFP联合7种细胞因子在训练集中诊断的敏感度为93．3％，特异度为83．3％，准确度为90．9%；而在测试集中敏感度为89％，特异度为77．3％，准确度为86%，传统血清AFP值（cut off值为20ng／ml）诊断的敏感度为70%，特异度为59％，准确度为64%。结论多重定量抗体芯片检测系统具有较高敏感度和特异度，AFP联合7种细胞因子诊断模型对肝癌早期诊断优于传统AFP，具有潜在的临床应用价值。; 高东梅孙璐郭坤李岩刘银坤康晓楠; 关键词：肝细胞甲胎蛋白类

补肾健脾方对裸鼠原位肝癌切除术后复发瘤体血管生成拟态形成以及肺转移影响的研究被引量：4: 2017年; 目的观察补肾健脾方对人肝癌高转移原位移植瘤裸鼠切除术后血管生成拟态(Vasculogenic Mimicry,VM)形成以及肺转移的影响。方法建立HCCLM3原位荷瘤切除术后复发转移裸鼠模型,分为补肾健脾方组(A组)、索拉非尼组(B组)、联合用药组(C组)、模型对照组(D组),每组7只。术后第3天起,给予相应药物灌胃,共给药28天,每天1次。末次给药后48 h处死裸鼠并取材,采用免疫组化法检测复发瘤体VE-cadherin、Eph A2、PI3K、FAK蛋白表达,计算血管生成拟态密度(Vasculogenic mimicry density,VMD)以及肺转移细胞数。结果 (1)VMD:C组与其余3组比较,VECadherin蛋白阳性面积显著降低(P<0.05)。与D组相比较,A和C组Eph A2蛋白表达显著降低(P<0.05);A、B、C组PI3K、FAK蛋白表达均显著下调(P<0.05)。VMD由低到高依次为C、A、B、D组,与D组比较,下调倍数依次为1.4、1.2、1.1倍,但差异无统计学意义(P>0.05)。(2)肺转移细胞数:与D组比较,A、C组肺转移肿瘤细胞数显著减少(P<0.05)。结论补肾健脾方能有效降低VE-Cadherin、Eph A2、PI3K、FAK蛋白的表达,减少肺部转移;与索拉非尼联用时,对VE-Cadherin、Eph A2蛋白表达抑制尤为显著,能最大程度阻止VM的形成,降低肺部转移。; 付淑娟吴伟忠高东梅吴婷婷张士强杨蕴蒋海燕夏晓婷吕俊强周张杰钟薏; 关键词：补肾健脾方术后复发肺转移血管生成拟态裸鼠

喜滴克对肝癌相关基因及AFP表达的调节被引量：8: 2002年; [目的]观察细胞分化剂喜滴克对肝癌相关基因及血清AFP水平的调节。[方法]人移植性高转移肝癌裸鼠模型LCI D20,随机分为对照组(C组) ,喜滴克低剂量组(L组) ,喜滴克中剂量组(M组) ,喜滴克高剂量组(H组)和喜滴克高剂量 +5 Fu组(H +CT组)。接种后第11天给药 ,连续20天 ,计算抑瘤率 ,测定血清AFP水平和观察腹腔转移。应用RT PCR方法 ,研究基因的表达。应用Western印迹检测整合素β1和E 钙粘素的表达 ,观测高转移人肝癌细胞株MHCC97对纤维连接蛋白的粘附抑制作用。[结果]不同剂量组的喜滴克均呈现一定的抑瘤作用。喜滴克治疗组血清AFP水平比对照组有明显下降 ;对原癌基因c myc、N ras、c jun、c fos及mmp 9基因的表达有明显的下调作用(P<0.01)。喜滴克亦能下调整合素β1蛋白表达和增加E 钙粘素的表达 ;有抑制高转移人肝癌细胞株MHCC97对纤维连接蛋白粘附的能力。[结论]喜滴克对肝癌相关基因及AFP表达的调节可能是其抑制肿瘤生长和转移的分子基础。; 刘银坤李岩马晓明鲍卫华陈军薛琼高东梅张予叶胜龙汤钊猷; 关键词：肝肿瘤原癌基因甲胎蛋白

槐耳浸膏对人肝癌高转移细胞系转移的抑制作用研究被引量：9: 2006年; [目的]探索槐耳浸膏抑制肝癌细胞转移的机制,为槐耳浸膏在临床上治疗肝肿瘤提供理论依据。[方法]将高转移潜能人肝癌细胞系(MHCC97H)分别与槐耳浸膏(1.0mg/ml,3.0mg/ml,5.0mg/ml,10.0mg/ml)及DMEM(含10%胎牛血清)作用24h,测定其肿瘤细胞黏附率、运动抑制率及侵袭抑制率。[结果]各组MHCC97H细胞经槐耳浸膏作用24h后,其细胞黏附率明显下降,而运动抑制率及侵袭抑制率明显上升,与对照组相比差别均有统计学意义,且槐耳浸膏浓度与肿瘤细胞黏附率、运动抑制率及侵袭抑制率均有相关性。[结论]槐耳浸膏能明显抑制肝癌细胞的黏附、运动及侵袭能力,故可以阻抑肝癌细胞的转移。; 李立新叶胜龙王艳红孙瑞霞薛琼陈洁高东梅汤钊猷; 关键词：槐耳浸膏肝癌细胞系

聚乙二醇化干扰素-α联合卡培他滨对肝癌生长作用的影响被引量：1: 2006年; 目的探讨联合应用聚乙二醇化干扰素-α与肿瘤选择性化疗药卡培他滨抑制肝癌生长的作用。方法用30只LCI-D20人肝癌高转移裸鼠模型,随机分为对照组、聚乙二醇化干扰素- α组(1．875μg／周)、卡培他滨组(每日2．10mmol／kg体重)和联合用药组。用药4周后,观察裸鼠肝内移植瘤体积变化及肝内转移情况,检测血常规、肝肾功能和体重变化。结果对照组、聚乙二醇化干扰索-α组、卡培他滨组和联合用药组肿瘤体积分别为(2 275±1 337)、(336±220)、(889±614) 和(26±56)mm^3。与对照组相比,用药组肿瘤体积明显缩小,联合用药组尤为突出(P<0．01)。各用药组血常规、肝功能和体重的变化差异无统计学意义(P>0．05)。结论聚乙二醇化干扰素-α与卡培他滨联合应用能显著抑制LCI-D20裸鼠模型中肝移植瘤的生长和浸润,副作用不明显。; 沈早卓周俭肖永胜樊嘉薛琼高东梅汤钊猷; 关键词：干扰素-Α 卡培他滨裸鼠

小鼠胚胎干细胞分化为肝细胞的基因芯片分析: 2009年; 弄清胚胎肝脏发育的分化调节机制,对指导干细胞在肝再生中的应用以及研究肝分化相关疾病分子机制具有重要意义.胚胎干细胞的全能性使得体外建立肝向分化模型成为可能,采用单层贴壁培养方式,分阶段加入成纤维细胞生长因子(FGF)、肝细胞生长因子(HGF)、制瘤素(OSM)等因子,诱导小鼠胚胎干细胞D3(mESC-D3)的肝向分化.分化细胞在光镜和电镜下呈现肝样细胞形态,RT-PCR、细胞免疫荧光检测以及PAS染色分析表明,这些细胞具有肝细胞特征性的基因表达和生化功能.采用干细胞分化相关基因芯片比较早期肝定向分化前后的基因表达差异,结果显示,48个差异表达基因中(大于2倍),20个上调、28个下调.进一步的生物信息学分析发现,它们集中体现在细胞外基质、细胞连接、FGF、BMP分子及Notch、Wnt信号通路上,提示这些改变可能与胚胎早期的肝向分化密切相关.; 李岩李雪飞郭坤高东梅赵燕刘银坤; 关键词：胚胎干细胞肝细胞细胞分化基因芯片

大鼠肝卵圆样细胞恶性转化过程中的基因表达谱分析被引量：1: 2008年; 目的分析肝卵圆细胞恶性转化过程中基因表达谱的改变，探讨差异基因的意义。方法经直接致癌剂N-甲基-N＇-硝基N-亚硝基胍启动的大鼠肝卵圆细胞样WBF344暴露于过氧化氢，每周1次，重复21次诱发其恶性转化。通过形态学、遗传学和软琼脂克隆形成等实验验证细胞的转化。并应用四甲基偶氮唑盐法检测转化细胞的增殖能力。采用大鼠癌通路发现者功能芯片比较恶性转化过程中正常对照（WB），WB-5（过氧化氢刺激5次），WB21（过氧化氢刺激21次）3组细胞基因表达的差异。结果转化的细胞获得了异倍体核型，具有非停泊依赖生长特性。电镜下转化细胞的细胞器增多，出现缝隙连接和微绒毛等结构。基因表达谱分析显示共有21个基因差异表达，主要参与调节细胞增殖、凋亡、细胞黏附运动等，其中连续上调的有pten，连续下调的有cdknla，而先上调再下调的基因有myc、fos、casp8等。结论细胞增殖和凋亡的异常在卵圆细胞恶性转化过程中起重要作用，而cdknla、pten、myc、los等基因可能是起关键作用的分子。; 李雪飞李岩高东梅康晓楠郭坤王念赵燕孙璐刘银坤; 关键词：肝细胞细胞转化肝卵圆细胞

槐耳清膏联合氟尿嘧啶抑制肝癌生长转移的实验研究被引量：4: 2007年; 槐耳清膏的主要活性成分是多糖蛋白（polysaccharide of trametes robiniophila murr，PS—T），能诱导人直肠癌细胞株（HR8348细胞）发生凋亡，对血管内皮细胞体外构建新生血管有抑制作用。但槐耳清膏对肝癌在体内的生长和转移的干预作用尚无报道。本研究利用裸鼠人肝癌转移模型LCI-D20进行了抑制肿瘤生长和转移的动物实验，现报道如下。; 张巨波孙惠川薛琼钱永兵荚卫东高东梅潘奇孙冰生陈军汤钊猷; 关键词：槐耳清膏氟尿嘧啶肝癌血管内皮细胞抑制肿瘤生长

氧调节蛋白150在人肝细胞癌中的过度表达及其对凋亡的作用(英文)被引量：4: 2009年; 在前期研究中发现,氧调节蛋白150(ORP150)是与肝细胞癌相关的糖蛋白.进一步研究了ORP150的表达水平与肝细胞癌的相关性.免疫印迹、细胞免疫化学和定量PCR分别在蛋白质水平和mRNA水平检测了ORP150的表达.运用RNA干扰技术检测了其对凋亡和肝细胞癌侵袭性的影响.发现:无论是蛋白质水平还是mRNA水平,与正常肝细胞相比,ORP150在肝细胞癌中表达明显上调;经RNA干扰后,肝细胞癌的凋亡明显增加,但肿瘤细胞的侵袭性无改变.肝细胞癌中,ORP150表达上调,它可能抑制肿瘤细胞的凋亡而促进其生长.ORP150有可能成为肝细胞癌的治疗靶点.; 周海军黑振宇史炯郭坤孙冰生武金才赵越付丽芸戴春高东梅孙瑞霞赵燕陈洁王鲁钦伦秀刘银坤; 关键词：人肝细胞癌凋亡

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高东梅

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