高明明
- 作品数：10 被引量：21H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学医药卫生更多>>
- 对动物生物化学课程教学的几点建议被引量：2
- 2012年
- 面对社会需求高素质人才,以本科生必修课程"动物生物化学"的教学过程为背景,探讨教学过程中本课程的特点,使课程内容具有系统性、前沿性、基础性;合理配置实验内容,巩固消化基础知识;加强实验室建设,开设综合性实验;增加科研训练,拓展综合素质;完善课程考核模式,促进高素质的人才培养。
- 申红贾斌张辉周刚高明明武玉飞罗玉江
- 关键词：动物生物化学课程教学
- 猪链球菌乳酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的反应原性研究
- 2015年
- 为了验证双向电泳筛选出的7型猪链球菌WH分离株免疫相关蛋白乳酸脱氢酶的反应原性,本实验采用克隆表达的方法对其进行研究。根据质谱鉴定的NCBI登录号查找乳酸脱氢酶基因序列,并设计特异性引物,对乳酸脱氢酶基因进行扩增,克隆入p ET30a载体,构建重组质粒p ET30a-LDH,测序后转化入大肠埃希氏菌中。用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。SDS-PAGE分析结果显示表达的重组融合蛋白相对分子量为41ku;Western blot分析结果显示该重组蛋白可与7型猪链球菌WH分离株多克隆抗体发生特异性血清学反应。这表明表达的重组LDH蛋白具有良好的反应原性,为预防和控制猪链球菌病提供有效的疫苗候选分子奠定基础。
- 高明明王淑杰王俊金家民张璐刘永刚李爱东陶冶李莉姜成刚王刚申红
- 关键词：猪链球菌乳酸脱氢酶反应原性原核表达
- 一株致病性血清2型猪链球菌的多位点序列分型及其灭活后对小鼠的免疫保护效果评价
- 2015年
- 为鉴定一株2012年分离自广东省的致病菌并评价其免疫原性,本研究对该分离株进行分型鉴定和MSLT分型分析。鉴定结果显示,该分离株为血清2型猪链球菌(S.suis);其MSLT分型为ST1型,等位基因图谱是1、1、1、1、1、1、1,与高致病性的世界流行株P1/7同型;毒力基因型为Mrp+/Ef+/Sly+,将其命名为GD。进一步使用GD灭活菌以3×108cfu剂量3次免疫小鼠,免疫后分别采用GD,7型、9型S.suis WH和ZD进行攻毒试验。动物试验结果显示,免疫后小鼠抗体水平显著升高;对GD、WH和ZD的保护率分别为87.5%、87.5%和75%;免疫组小鼠血液和脏器内的细菌载量均显著低于对照组,而且无明显病变。本研究结果表明,GD灭活疫苗可以对不同血清型S.suis攻毒提供有效的免疫保护,可以作为预防S.suis病的有效灭活疫苗候选株。
- 高明明王淑杰金家民刘永刚陶冶李爱东张璐李莉姜成刚王刚申红蔡雪辉
- 关键词：猪链球菌灭活疫苗免疫保护
- 猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体制备及线性抗原表位鉴定被引量：2
- 2014年
- 为制备猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究采用PCV2去核定位信号Cap蛋白(dCap),通过杂交瘤技术制备1株杂交瘤细胞株(4E2),制备小鼠腹水效价达1∶64 000,亚类鉴定为IgG1/κ链。Western blot分析显示,该株MAb与毕赤酵母表达的dCap和原核表达的Cap蛋白均可以发生特异性免疫反应。采用肽扫描法对MAb的非核定位信号区进行抗原表位鉴定,结果表明该MAb可以识别的线性表位区域为131TKATALTYDPYVNYSS146。本实验结果为进一步研究Cap蛋白的结构和PCV2临床检测方法的建立奠定基础。
- 张璐王延群郝立沙高明明李爱东陶冶李莉涂亚斌蔡雪辉路义鑫
- 关键词：猪圆环病毒2型DCAP单克隆抗体表位
- 大肠杆菌刺激蝇蛆产生抗菌肽浓度和抑菌活性的测定被引量：2
- 2013年
- [目的]确定大肠杆菌菌液刺激蝇蛆产生浓度高、活性强的抗菌肽时间和蝇蛆饲喂家禽的安全性。[方法]采用不同浓度的大肠杆菌菌液分别与麸皮混合饲喂蝇蛆,于10、24、48 h分别收集存活蝇蛆并对其粗提取抗菌肽,通过考马斯亮蓝法和抑菌试验分别测定各试验组抗菌肽粗提液的浓度和抑菌力,同时用CFU计数法测定细菌培养的家蝇幼虫的细菌含量以确定其作为绿色抗生素的安全性。[结果]浓度为3.0×107cfu/ml的大肠杆菌作用24 h的蝇蛆组产生的抗菌肽浓度最高、活性最强,且蝇蛆体内细菌含量为1.6×105cfu/g,低于国家规定的饲料细菌标准含量最低值(2×106cfu/g)。[结论]为进一步利用动物死尸、畜禽粪便生物转化蝇蛆产生大量安全、浓度高且活性强的蝇蛆抗菌肽作为绿色抗生素运用于禽类养殖业奠定了基础。
- 武玉飞刘海燕高明明周钢王俊刚申红
- 关键词：蝇蛆大肠杆菌抗菌肽抑菌活性
- 猪链球菌7型强弱毒株SBP_bac_5差异表达蛋白的鉴定
- 2013年
- 前期研究表明细菌胞外溶质结合蛋白家族5(SBP_bac_5)基因在猪链球菌7型(S.suis 7)型强毒株WC0711中表达量高于弱毒株M13中,推测SBP_bac_5为S.suis 7型强弱毒株差异性表达蛋白。为进一步证实该结果,本研究采用real-time RT-PCR技术在基因水平检测S.suis 7型强弱毒株中SBP_bac_5 mRNA的表达量差异,结果显示,强毒株WC0711中SBP_bac_5的mRNA表达量为在弱毒株M13中的4.59倍。将SBP_bac_5的PCR产物克隆于pET-30a中,通过E.coli BL21诱导表达,纯化后的蛋白免疫新西兰白兔制备抗血清检测S.suis强弱病毒株中SBP_bac_5的表达量差异。结果显示,重组蛋白获得高效表达,S.suis 7型强毒株WC0711中SBP_bac_5表达量是弱毒株M13的3.8倍。
- 金家民王淑杰高明明王延群李玉明汪志艳石文达刘鹤姜成刚张秀英蔡雪辉
- 关键词：猪链球菌强毒株弱毒株
- 蝇蛆抗菌肽的诱导及其抗菌性能研究被引量：5
- 2013年
- 为了探究灭活沙门氏菌对蝇蛆抗菌肽的诱导效果,试验用灭活沙门氏菌和沙门氏菌培养蝇蛆,粗提蝇蛆抗菌肽,分时间点测定其浓度及抗菌性能,同时对蝇蛆体内细菌含量进行计数。结果显示,诱导组抗菌肽浓度均高于未诱导组(P<0.05),且在24h时浓度最高;诱导组对沙门氏菌的抑菌圈直径显著大于未诱导组(P<0.05),显著小于抗生素组(P<0.05),最低抑菌浓度(MIC)值为0.5mg/mL;蝇蛆体内细菌含量为1.6×105 CFU/g,低于国家规定标准饲料中细菌总数最低值2×106 CFU/g。提示,用灭活沙门氏菌诱导蝇蛆能提高抗菌肽的表达量,且具有较强的抗菌性能及安全性。
- 周钢申红王俊刚高明明武玉飞刘海燕赞哈尔
- 关键词：蝇蛆抗菌肽灭活抗菌性能
- 7型猪链球菌免疫相关性蛋白乳酸脱氢酶的筛选与分析被引量：3
- 2015年
- 【目的】快速高效筛选7型猪链球菌免疫原性蛋白,以作为猪链球菌疫苗的候选分子。【方法】以7型猪链球菌分离株WH07为样品,应用免疫蛋白质组学技术建立了WH07株全菌蛋白的双向电泳体系,并利用蛋白质免疫杂交技术筛选免疫原性蛋白。【结果】获得了分辨率及重复性良好的双向电泳（2-DE）图谱,且得到3个具有免疫反应性的蛋白质点,经质谱鉴定其归属于1个蛋白,即乳酸脱氢酶（LDH）。生物信息学预测表明,该蛋白分子质量为35 420ku,理论等电点为5.05,具有2个跨膜区,分别位于第10~28位和第110~129位,并根据预测分析结果成功模拟了蛋白质的三级结构。【结论】从猪链球菌WH07菌株中筛选并鉴定了1个具有免疫原性的蛋白,即乳酸脱氢酶,并模拟了其三级结构。
- 高明明王淑杰刘永刚姜成刚王刚涂亚斌蔡雪辉
- 关键词：猪链球菌双向电泳质谱鉴定蛋白结构预测
- 腹泻鸡粪培养蝇蛆抗菌肽对大肠杆菌感染雏鸡疗效的观察被引量：9
- 2013年
- 为了探究用腹泻鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽对大肠杆菌感染雏鸡的疗效,试验选用艾维茵肉仔鸡120只,大肠杆菌感染致腹泻组(90只),未感染健康组(30只)。收集各组粪培养的蝇蛆,粗提抗菌肽并测定其浓度,再用腹泻鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽和抗生素分别治疗腹泻鸡,测定各试验组腹泻鸡血液免疫细胞、肠道细菌数,治愈率。结果显示:蝇蛆抗菌肽与抗生素治疗腹泻组后,红细胞、白细胞、淋巴细胞数量均显著低于对照组(未治疗组)(P<0.01),肠道细菌数量也显著低于对照组(未治疗组)(P<0.05)。虽然抗生素治疗鸡腹泻的效果稍微优于蝇蛆抗菌肽,但这也说明腹泻鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽对大肠杆菌感染引起的腹泻鸡也具有治疗作用。
- 陈号刘海燕刘芳周钢高明明王俊刚申红
- 关键词：抗菌肽蝇蛆粪便培养
- 不同血清型S.suis免疫保护效果评价以及反应原性蛋白的筛选
- 猪链球菌/(Streptococcus suis，S. suis/)是一种革兰氏阳性、兼性厌氧性球菌，根据荚膜多糖抗原特性的不同，可分为35个血清型，即1-34型和1//2型。其中2型流行最广，致病力也最强，但在近几年的...
- 高明明
- 关键词：猪链球菌免疫保护双向电泳原核表达
- 文献传递
