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Ⅱ型登革病毒E基因的克隆及其酵母表达被引量：1: 2003年; 目的　克隆 2型登革病毒E基因并用酵母真核表达 ,获得全长的重组E蛋白 ,为其结构与功能的研究提供条件。方法　从感染DEN2 (NGC株 )后病变的C6 /36细胞上清中提取RNA ,通过RT -PCR扩增E基因片段 ,与载体pPICZαB连接筛选得到重组质粒 ,电穿孔法将重组体整合入酵母菌P pastoris,经抗生素Zeocin筛选产生的转化子进行表型鉴定 ,取Mut+菌诱导表达 ,SDS -PAGE、免疫印迹检测表达产物。结果　RT -PCR得到 1 5kb的E基因片段 ,酶切鉴定与测序显示重组质粒含DEN2全长E基因 ;Mut+ 酵母转化菌可分泌表达约 6 9kDa的蛋白 ,与DEN2E单抗的免疫印迹证实它为型特异的重组E蛋白。结论　成功将克隆的全长DEN2E基因在酵母菌中表达 ,获得的重组E蛋白具有免疫反应性。; 薛耀华江丽芳魏惠永方丹云郭辉玉; 关键词：登革病毒 E基因克隆酵母

聚合酶链反应检测结核杆菌结果分析: 1995年; 聚合酶链反应检测结核杆菌结果分析广东省老年医学研究所（５１００８０）董婷，魏惠永，蔡雪珍，李质怀长期以来，结核病的实验诊断，仍依赖于传统的涂片染色法与培养法。由于受诸多因素的影响，这两种方法对临床标本阳性检出率低，且涂片法特异性差，培养法耗时冗长，都...; 董婷魏惠永蔡雪珍李质怀; 关键词：聚合酶链反应结核杆菌

登革病毒致病与免疫机制的系列研究: 江丽芳魏惠永郭辉玉薛耀华洪帮兴周俊梅高阳晏辉钧曹艳英江振友方丹云曾祥凤; 该项目在细胞水平、分子水平和基因水平上对登革病毒致病与免疫机制进行了系列研究，研究结果初步阐明了登革病毒与人血管内皮细胞及单个核细胞的相互作用；首次证明了人血管内皮细胞表面存在登革病毒特异性受体；首次报道在酵母菌中高效表...; 关键词：; 关键词：登革病毒免疫

聚合酶链反应诊断肾结核的初步研究: 1994年; The method of polymrase chain reaction(PCR) was used to amplify the insertion sequence-like element 6110 which is specific toMycobacterial tuberculosis complex (MTBC). A123 base pairs fragment was specificallyamplified from the MTBC genome. Neitheratypical Mycobacteria nor other species bacteriawas found this amplification.The PCK candetect the purified MTBC genome in as littleas 10 fg. In the detected urine sample of the59 episodes, the specific PCK positiuity andnegatiuity was 83.33% and 100% respectively.It is indicated that the diagnosis of PCK forrenal tuberculosis is senitive, specific and rapid,and should be developed in future.; 魏惠永董婷谭新洪李质怀黄革黄小穗汪玎妍; 关键词：聚合酶链反应泌尿生殖系结核尿液标本非典型分支杆菌涂片染色中段尿

登革2型病毒全长NS1基因真核表达载体的构建及序列分析: 2004年; 目的克隆登革2型病毒(DEN2)全长NS1基因,构建NS1基因的真核表达重组质粒。方法用RT-PCR技术扩增DEN2(NGC株)全长的NS1基因序列,并定向克隆入pPICZαB的KpnⅠ/XbalⅠ位点,构建真核表达载体pPICZαB-NS1,转化E.coliDH5a菌。阳性重组质粒用PCR、酶切及序列测定等方法鉴定。结果阳性质粒经PCR及KpnⅠ/XbaⅠ双酶切获得了一个核苷酸长度为1134bp的基因;序列测定证实该基因与DEN2(NGC株AF038403)NS1基因序列有99%同源。结论成功构建了含有DEN2全长NS1基因的真核表达载体pPICZαB-NS1,为NS1的进一步酵母表达奠定了良好的基础。; 曾祥凤江丽芳邵焰方丹云魏惠永; 关键词：登革病毒 NS1基因测序真核表达

我国部分地区儿童A组链球菌耐药性的研究被引量：32: 1999年; 目的探讨我国部分地区学龄儿童Ａ组溶血性链球菌（ＧＡＳ）对抗生素耐药的流行状况。方法采用ＶＩＴＥＫ自动微生物鉴定系统，测试３７６株从９～１岁学龄儿童咽部分离出的ＧＡＳ，吉林９７株、湖北８４株、四川８１株、广州农村６２株、广州城市５２株。结果四省总耐药率６７．３％，主要耐药依次为四环素６５．７％、红霉素４３．３％、氯林可霉素３４．０％、氯霉素６．９％、氨苄青霉素０．５％，未发现对青霉素、头孢噻吩、喹诺酮类药物耐药的菌株。不同地区间耐药率存在差异（Ｐ＜０．００５），吉林最高达９４．８％，依次为广州农村８３．８％、重庆５８．０％、湖北５０．０％、广州城市３８．５％。结论目前治疗ＧＡＳ感染和风湿热一、二级预防不宜使用红霉素和氯林可霉素；ＧＡＳ感染仍首选青霉素。; 董太明苏健黄震东黄震东陈运贞魏惠永胡虞志陈运贞吴红穗徐丽华罗健胡虞志; 关键词：链球菌抗生素抗药性 GAS

应用反转录PCR检测临诊可疑丙型肝炎感染的结果分析被引量：1: 1994年; 应用反转录ＰＣＲ检测临诊可疑丙型肝炎感染的结果分析广东省老年医学研究所蔡雪珍，董婷，魏惠永，李质怀聚合酶链反应（ＰＣＲ）是一种体外快速扩增特异ＤＮＡ片段的分子生物学技术，通过体外引物定向酶促放大作用，使微量的靶ＤＮＡ放大至百万倍而被检出，因此非常适合...; 蔡雪珍董婷魏惠永李质怀; 关键词：聚合酶链反应丙型肝炎

聚合酶链反应在结核性脑膜炎早期快速诊断中的价值: 1996年; 应用聚合酶链反应(PCR)检测14例结脑患者脑脊液中结核杆菌 DNA,并与细菌培养、Elisa 法比较,三种方法的敏感性和特异性分别为85.71%和100%,21.43%和100%,50%和95.0%。20例对照组中,PCR 均为阴性。结脑组与对照组相比差异显著(P<0.01)。作者认为,PCR 是目前结脑最敏感和特异的早期、快速病原学诊断方法,值得临床推广。; 邓远飞詹国华魏惠永; 关键词：聚合酶链反应结核性脑膜炎脑脊液 DNA

奈替米星等对老年人肺部感染菌株的敏感性被引量：4: 1999年; 对２４０株老年人肺部感染临床分离菌用常规纸片法做定性药敏试验及Ｅ－ｔｅｓｔ法检测ＭＩＣ值定量药敏试验，两种方法结果基本一致。数据表明奈替米星（ｎｅｔｉｌｍｉｃｉｎ，ＮＴＬ）对革兰氏阴性杆菌的抗菌活性接近阿米卡星和头孢他啶，优于庆大霉素、妥布霉素与广谱青霉素；ＮＴＬ对葡萄球菌的作用为氨基糖苷类中最强的，也优于氟喹诺酮类与第三代头孢菌素。提示ＮＴＬ可用于老年人肺部革兰氏阴性杆菌与部分葡萄球菌感染。; 魏惠永董婷黄革张燕平黄爱伟; 关键词：奈替米星老年人肺部感染药敏试验

登革2型病毒E蛋白在酵母菌中的分泌表达被引量：7: 2002年; 以 pPICZαB为载体 ,应用RT PCR从感染D2V的C6 / 36病变细胞中克隆全长E基因 ,电转化法将重组质粒整合入巴斯德毕赤氏酵母菌 ,经抗生素筛选、表型鉴定和PCR分析得到Mut+ 型的多拷贝整合菌 ,经甲醇诱导培养可产生 6 9kD的融合蛋白 ,与含组氨酸尾的D2V包膜糖蛋白分子量理论值相符 ;免疫印迹证实该表达产物可与D2VE特异性单抗和D2V多抗进行反应 ;表达产物经金属螯合亲和层析可获得纯化的含组氨酸尾的E融合蛋白并保留其免疫反应性。研究显示克隆的全长D2VE基因可在毕赤氏酵母菌中高效分泌表达 ,E融合蛋白最大表达量 0 .1g/L。; 魏惠永江丽芳薛耀华郭辉玉; 关键词：登革2型病毒 E蛋白分泌表达

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