黄瑞芳
- 作品数：19 被引量：34H指数：4
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- 发文基金：深圳市科技局立项课题深圳市科技局资助项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胰激肽释放酶基因的克隆及表达载体的构建被引量：1
- 2002年
- 目的 :克隆中国人胰组织激肽释放酶基因 ,构建原核、真核表达载体 ,为开发生产人源激肽释放酶基因工程产品及人源激肽释放酶基因药物奠定基础。方法 :提取人胰腺组织总RNA ,逆转录后琼脂糖电泳初步鉴定PCR产物。将激肽释放酶cDNA回收、补平后插入克隆质粒KS ,酶切鉴定后 ,对激肽释放酶基因进行序列测定分析。用双酶切法 ,插入原核表达载体PET 2 8b ,真核表达载体pBacPAK9质粒中。酶切鉴定后 ,进行序列测定分析。结果 :本实验克隆的激肽释放酶基因与GenBank报告的激肽释放酶基因相比 ,碱基序列相同。测序分析表明人胰组织激肽释放酶基因经酶切 ,正确插入到原核表达载体PET 2 8b ,真核表达载体pBacPAK9质粒中。结论 :克隆并构建成功中国人组织激肽释放酶基因的原核、真核表达载体 。
- 杜珙李体远黄瑞芳陈德珩戴勇
- 关键词：激肽释放酶基因载体胰腺真核表达载体肾小球肾炎
- 系统性红斑狼疮患者树突状细胞白细胞介素-12和干扰素-α表达与各亚型的关系被引量：5
- 2004年
- 目的诱导系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞分化树突状细胞(DC),检测DC分泌白细胞介素(IL)-12和干扰素(IFN)-α水平,并分析与DC各亚型的相关性,以了解树突状细胞在SLE疾病中的作用。方法联合应用粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)、IL-4和肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导分化DC成熟。酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测培养上清中IL-12和IFN-α表达,免疫荧光标记,流式细胞仪测定DC各亚型,分析IL-12和IFN-α表达水平与DC各亚型的相关性。结果①SLE组在第7天和第9天分泌的IL-12水平[(8.8±0.8)和(9.8±0.8)pg/ml]较对照组[(7.5±0.7)和(8.1±0.9)pg/ml]明显增加(P<0.05);SLE组第7天IFN-α水平[(4.0±0.8)pg/ml]较正常对照组[(2.9±0.8)pg/ml]水平升高显著(P<0.001)。②SLE组DC表达的CD1a、CD11c+、CD40、和CD123百分率(59±8、54±11、37±8、13±4)较对照组(48±4、43±9、29±7、10±4)明显增加(P<0.05),SLE患者DC表达的CD80和CD83(55±10、58±12)较对照组(48±12;48±9)升高不明显(P>0.05)。③分泌第7天和第9天的IL-12与CD1a、CD11c+、CD40保持良好的相关性(P<0.05),与CD80、CD83、CD123相关性不明显。第7天和第9天的IFN-α与CD1a、CD11c+、CD40、CD123存在明显相关性(P<0.05),而与CD80、CD83无相关性。
- 齐晖李富荣肖学吕刘冬舟任莉莉王新根黄瑞芳文锦丽戴勇
- 关键词：SLEIL-12IFN-Α百分率
- 不同面积脑梗死患者的血清血管内皮生长因子动态观察被引量：1
- 2004年
- 目的 动态观察不同面积脑梗死患者血清血管内皮生长因子 (VEGF)水平 ,探讨急性脑梗死患者血清VEGF的变化规律。方法 根据脑梗死面积分为大、中、小三种类型 ,按入院即时、入院后 1天、3天、7天、14天分别抽取静脉血 2ml,采用双抗体夹心酶联免疫分析法测量VEGF水平。结果 三种面积脑梗死患者血清VEGF升高的程度有显著性差异 (P <0 0 5 )。病程中血清VEGF水平有一个逐渐上升和下降的过程 ,多数患者在第 3天达高峰 ,第 7天开始下降。结论 不同面积脑梗死血清VEGF水平有明显差异 ,其水平随面积增大而增高 ,并随病程变化有一个逐渐上升和下降的过程 ,在发病早期即可检测出来。
- 黄瑞芳杜珙徐宜英李体远
- 关键词：急性脑梗死血管内皮生长因子梗死面积
- 中国人胰腺组织激肽释放酶的基因克隆、制备及功能研究
- 李体远戴勇杜珙黄瑞芳石之磷陈德珩朱莹彭武建
- 利用基因工程技术，提取正常人胰腺组织mRNA， 采用oligo（dT）引物进行RT-PCR，扩增中国人胰组织激肽释放酶基因，完成系列原核、真核载体的构建，选择最佳的实验条件进行中国人胰激肽释放酶的表达。应用改良电位滴定法...
- 关键词：
- 关键词：高血压生物医药
- 增敏^(89)Sr内照射时小鼠骨髓DNA损伤的实验研究被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨89Sr内照射治疗时增敏剂烟酰胺和Carbogen对小鼠骨髓网织红细胞DNA损伤的影响。方法 昆明系小鼠 ,按组注射烟酰胺和 (或 )吸入气体Carbogen ,对照组注射同体积生理盐水。经小鼠尾静脉“弹丸”注射 2 0 0 μl89SrCl,放射性活度 74 0 0kBq( 2 0 0 μCi)。正常组注射同体积生理盐水。分别于注射后第 1,2 ,3,4 ,6 ,8,15 ,2 0 ,30 ,6 0和 90天批量处死小鼠 ,立即分离股骨骨髓 ,荧光法进行小鼠骨髓网织红细胞微核测定。结果 治疗组微核出现频率随观察时间呈双峰 ,各组第 1峰出现时间在第 2～ 4天 ,第 2峰在第 10～ 14天。阴性对照和阳性对照组比较 ,微核产生频率差异有显著性 (F =15 5 17,P <0 0 0 1)。其余各组 ( 89Sr+N +C ,89Sr,89Sr+N和89Sr+C)间相比较差异无显著性 (F =0 717,P >0 0 5 )。与89Sr组比较 ,单微核、双微核及三微核形成率差异均无显著性。未观察到四微核细胞。
- 李体远张英男黄瑞芳郑向鹏郭一玲顾望为林继红
- 关键词：小鼠CARBOGEN增敏剂
- 人组织激肽释放酶成熟蛋白在大肠杆菌中的高效表达被引量：8
- 2003年
- 将编码人组织激肽释放酶成熟蛋白的基因片段扩增并分别克隆到原核表达载体pET2 8(b)及分泌型表达载体pET2 0 (b)中 ,使其C端融合 6×HisTag序列 .转化不同受体菌 ,IPTG诱导表达后利用SDS PAGE、免疫印记等方法对重组蛋白进行分析 .在 6株基因工程菌株中 ,均表达出分子量约30kD的激肽释放酶融合蛋白 ,其中激肽释放酶在pET2 8载体中的表达水平高于pET2 0载体 .pET2 8和pET2 0载体表达的重组激肽释放酶蛋白分别占菌体总蛋白约 2 6 %和 10 % .Western印迹分析表明 ,目的蛋白可与抗人血清KK单克隆抗体发生特异性反应 .未经纯化的激肽释放酶融合蛋白具有一定的水解苯甲酰精胺酸乙酯 (BAEE)的能力 .在大肠杆菌中获得了人组织激肽释放酶的高效表达 ,表达产物具有免疫原性和生物活力 。
- 李体远杜珙蔡筱彦石之磷黄瑞芳陈德珩戴勇肖德明
- 关键词：人组织激肽释放酶大肠杆菌基因克隆
- 系统性红斑狼疮患者淋巴细胞异常活化和调亡机制及临床价值的研究
- 李富荣叶志中齐晖戴勇任莉莉孙保东洪小平黄瑞芳
- SLE患者的淋巴细胞CD69表达比正常人群细胞呈高反应。T、B细胞CD69表达水平与SLE疾病活动化指数存在明显的相关性。CD4+、CD8+T细胞活化均需要CD69的参与。SLE患者CD69/CD3的表达显著高于正常人群...
- 关键词：
- 关键词：系统性红斑狼疮淋巴细胞细胞活化
- IL-13等因素对肾小球系膜细胞表达细胞周期调节负控蛋白p27的影响
- 2003年
- 目的 :探讨IL 13、ET 1、甲基强的松龙及肝素钠对肾小球系膜细胞表达细胞周期负控蛋白p2 7的变化。方法 :不同浓度IL 13 (10ng/mL、10 0ng/mL)、ET 1(10 7mol/L)、甲基强的松龙 0 5μg/mL、肝素钠 2 0 0mg/L和10 0 μg/L ,作用于培养的系膜细胞。流式细胞仪检测p2 7表达水平。结果 :IL 13 10ng/mL浓度组和 10 0ng/mL浓度组p2 7表达为 46 74± 3 2 5和 2 3 8± 2 56,与对照组比较差异有显著意义 (P <0 0 0 1,P <0 0 5) ,两不同浓度组之间差异有显著意义 (P <0 0 1)。ET 1刺激 14h和 18h后p2 7的表达分别为 14 76± 1 49和 12 18± 1 3 0 ,与对照组比较差异均有显著意义 (P <0 0 5,P <0 0 5)。甲基强的松龙 48h及 72h后p2 7表达为 9 9± 1 0 1和 9 12±0 93 ,与对照组比较明显降低 ,P <0 0 0 1。肝素钠 10 0mg/L浓度组和 2 0 0mg/L浓度组p2 7的表达分别为 2 6 94±1 2 3和 2 8 0 4± 0 99,较对照组明显升高 (P <0 0 5) ,不同浓度组间比较无明显差异。结论 :肾小球系膜细胞受不同因素作用后细胞周期调节负控蛋白p2 7表达水平不同。p2
- 齐晖李富荣王新根黄瑞芳戴勇
- 关键词：IL-13肾小球系膜细胞表达P27
- 尿毒症和血液透析患者细胞免疫状态及成因
- 戴勇王沙燕齐晖李体远黄瑞芳李富荣彭保李德萍
- 该组采用Ficoll-Hypaque淋巴细胞分层液常规分离法制备外周血单个核细胞（PBMC），测定NK细胞活性，运用ELISA法检测血清中sTNFαR、sFas、IL-6 、IL-10 、TNF-α、IL-13、 sIL...
- 关键词：
- 关键词：尿毒症血液透析细胞免疫
- 系统性红斑狼疮与狼疮性肾炎患者凋亡因子的变化
- 戴勇王沙燕李富荣齐晖张阮章李体远黄瑞芳
- 本研究采用ELISA法检测系统性红斑狼疮与狼疮性肾炎患者血清sFas、sFasL及其密切相关因子IL-18的变化，并探讨sFas、sFasL与临床各指标之间及sFas、sFasL与IL-18之间的相互关系。结果提示SLE...
- 关键词：
- 关键词：系统性红斑狼疮狼疮性肾炎凋亡
