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胸膜肺炎放线杆菌ApxIA在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化被引量：1: 2011年; 以胸膜肺炎放线杆菌1型参考菌株App-259株基因组DNA为模板,PCR扩增apxIA全基因,构建表达重组质粒apxIA-c2X,并将其转化至大肠杆菌TB1,SDS-PAGE和Western-blot分析表达产物。结果表明:成功构建了apxIA-C2x表达质粒,重组菌在15℃经0.2 mmol/L IPTG诱导16 h获得高效表达,融合蛋白大小为150 ku左右,目的蛋白约50%可溶,可溶蛋白经Amylose树脂亲和柱纯化,纯度可达到95%。本研究为猪传染性胸膜肺炎诊断抗原和亚单位疫苗的研制奠定了基础。; 黄良宗彭启明王淑敏张桂红顾万军; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌 APXIA 蛋白纯化

猪繁殖与呼吸综合征检测与监测技术要点: 2024年; 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起的一种严重危害全球养猪生产的传染病,其主要危害是引起母猪繁殖障碍和生长猪呼吸道疾病以及发病猪群的继发感染。; 张宝真刘明杰陈盛楠颜广智涂常松黄良宗白挨泉; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征母猪繁殖障碍猪呼吸道疾病继发感染 PRRSV

基因Ⅶ型NDV强毒株F基因重要功能区的克隆与序列分析: 新城疫是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起的严重危害养鸡业发展的疾病之一。它是一种以呼吸道、消化道粘膜出血为特征的急性、烈性、高度致死性传染病。病毒表面有囊膜,病毒的核衣壳呈螺旋对...; 王淑敏黄良宗冼琼珍黎敏顾万军; 文献传递

开放学科研究型实验室培养学生综合实践能力和创新能力被引量：3: 2007年; 教育部在《2003—2007年教育振兴行动计划》中强调，创造能力与创新人才的培养是近年我国教育的主要任务，而实践教学是培养学生综合实践能力和创新能力的重要手段。高校实验室服务于教学与科研，拥有丰富的实验教学资源，实施开放式实践教学，对探索创新型人才培养模式有积极的意义。目前许多高校对如何推进实验教学改革，建设开放式实验室作了很多有益的探讨，; 冼琼珍王淑敏顾万军黄良宗; 关键词：综合实践能力高校实验室实践教学

一种检测牛巴泰病毒的环介导等温扩增引物组及试剂盒: 本发明公开了一种牛巴泰病毒环介导等温扩增检测引物组及试剂盒。本发明通过比对Genbank中牛巴泰病毒的所有序列，在其相对保守的M基因设计LAMP引物，经筛选后得到一组用于牛巴泰病毒检测的LAMP引物组合物。同时，在上述L...; 刘昊卢梓烁唐甜李丽霞黄誉汉黄捷黄良宗

猪伪狂犬病毒和猪细小病毒二联PCR诊断方法的建立: 本实验旨在建立PRV和PPV的二联PCR方法,即在同一PCR管中,能够同时进行这两种病毒各自的特异基因片段的扩增,以达到简化诊断程序、快速确诊和最大限度降低诊断成本的目的,使之能更好地应用到实际的诊断工作中.; 冼琼珍黄良宗彭启明王淑敏顾万军; 关键词：猪伪狂犬病毒猪细小病毒; 文献传递

猪TRIM3基因克隆、生物信息学及组织表达分析被引量：2: 2022年; 【目的】克隆大白猪三基序结合蛋白3(tripartite motif-containing 3,TRIM3)基因,并对其进行生物信息学和组织表达分析。【方法】采用PCR技术扩增并克隆大白猪TRIM3基因CDS全长序列,连接pMD18-T载体并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,通过蓝白斑筛选阳性克隆,菌液PCR鉴定后测序,与不同物种TRIM3基因序列比对并构建系统进化树;应用多种在线软件对其编码蛋白进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR方法检测TRIM3基因在大白猪不同组织中的相对表达量。【结果】大白猪TRIM3基因CDS序列全长2235 bp,编码744个氨基酸。相似性和遗传进化分析结果显示,大白猪与野猪的相似性最高,达99.7%,与鸭的相似性最低,为75.1%;大白猪TRIM3基因与野猪先聚为一类,与牛和山羊亲缘关系较近。生物信息学分析显示,大白猪TRIM3蛋白分子质量为80.58 ku,理论等电点(pI)为8.32,不稳定系数为40.85,为亲水性蛋白,但不是分泌蛋白,无糖基化位点,预测其有60个磷酸化位点,主要存在于细胞质内;在TRIM3蛋白二级结构中以无规则卷曲为主,占41.67%,三级结构模型预测结果与二级结构一致。组织表达分析表明,大白猪TRIM3基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、气管、结肠中均有分布,肺脏中表达量最多且显著高于其他组织(P<0.05)。【结论】本研究成功克隆大白猪TRIM3基因CDS全长序列,并进行了生物信息学和组织表达分析,为进一步研究大白猪TRIM3蛋白的免疫学功能提供理论依据,对探究大白猪TRIM3基因参与先天性免疫和抗病毒感染分子机制具有重要意义。; 张航沙惠阳李华玮黄良宗黄良宗; 关键词：大白猪克隆

罗非鱼链球菌的分离鉴定及药敏试验: 从广东省佛山市2个水产养殖场患病罗非鱼(Hybrid Tilapia)中分离到2株细菌,分别编号为T4SH和G6C.经形态学观察和16SrDNA基因序列分析和生理生化鉴定.结果表明:2株分离菌株均为革兰氏阳性菌,呈β溶血...; 邝伟键黄良宗刘明杰涂常松顾万军; 关键词：罗非鱼无乳链球菌药物敏感性

H1N1亚型猪流感病毒的生物学特性测定及其HA基因序列分析被引量：3: 2006年; 测定了A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）猪流感病毒的部分生物学特性；运用RT—PCR方法扩增其HA基因，并对其进行了克隆和序列分析。结果表明，该株病毒的EID50／0．2mL及TCID50／0．1mL分别为10^-2.3和10^-2.1，小鼠感染试验亦说明该病毒具有致病性。序列分析表明，HA基因全长为1701bp，与国内外流行株同源性达90．8％～99．0％。; 马祥顾万军刘镇明黄良宗彭启明; 关键词：猪流感逆转录-聚合酶链反应

猪伪狂犬病病毒PCR检测方法的优化建立及初步应用被引量：1: 2010年; 为了建立敏感性高、特异性高、重复性好的猪伪狂犬病病原的PCR检测方法,试验根据初步建立的猪伪狂犬病病毒(PRV)聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,对其PCR反应条件进行了优化,并对25个猪场210份可疑猪伪狂犬病病毒感染的病料进行了检测。结果表明:25个猪场有24个检出PR阳性,猪场检出率为96%;猪伪狂犬病病毒总体感染阳性率达60.5%(127/210),感染阳性率最高为100%,最低为0。; 曾强陈响坤顾万军黄良宗白挨泉; 关键词：猪伪狂犬病病毒 PCR检测方法

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黄良宗

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