目的探讨HBx上调肝细胞癌(肝癌)中高表达的长链非编码RNA(lncR NA-HEIH)对肝癌细胞增殖的影响。方法标本来源于2015年9月至2016年3月中山大学附属第三医院和中山大学附属肿瘤医院30例HBV相关性肝癌患者手术组织。所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。其中男24例,女6例;年龄20~65岁,中位年龄52岁。采用RT-PCR检测30例患者肝癌组织及癌旁组织中HBx、lncRNA-HEIH m RNA的表达水平。构建稳定表达HBx的肝癌细胞系SMMC-7721-HBx及Bel-7404-HBx(实验细胞),及其对照细胞SMMC-7721-Vector和Bel-7404-Vector。RT-PCR及Western blot检测细胞株lncRNA-HEIH的表达。根据有否转染s i R N A-H E I H,将实验细胞分别分为干扰组和非干扰组。MTT检测两组吸光度值(A_(490))。实验数据比较采用t检验,lncRNA-HEIH与HBx表达相关性检验采用Pearson相关。结果肝癌组织中HBx、lncRNA-HEIH m RNA表达量分别为0.91±0.04、0.93±0.05,明显高于癌旁组织的0.53±0.01、0.35±0.02(t=7.95,10.42;P<0.05)。lncRNA-HEIH m RNA与HBx m RNA的表达水平呈正相关(r=0.840,P<0.05)。实验细胞SMMC-7721-HBx和Bel-7404-HBx中lncRNA-HEIH表达量分别为1.05±0.22、1.20±0.17,明显高于对照细胞的0.45±0.10、0.50±0.12(t=5.69,3.78;P<0.05)。SMMC-7721-HBx和Bel-7404-HBx干扰组48、72、96 h的A_(490)分别为0.26±0.05、0.38±0.04、0.43±0.10和0.27±0.05、0.30±0.12、0.39±0.05,明显低于非干扰组的0.37±0.07、0.59±0.12、0.80±0.10和0.38±0.07、0.62±0.12、0.78±0.11(t=-5.72,-3.47,-3.82和-3.89,-5.57,-8.34;P<0.05)。结论 lncRNA-HEIH高表达可能与HBV相关性肝癌发生有关,HBx基因可通过上调lncRNA-HEIH的表达参与HBx基因促进肝癌细胞增殖。
目的探讨体外膜肺氧合(ECMO)辅助心脏死亡器官捐献(DCD)肝移植疗效。方法回顾性分析2015年5月至2016年9月于中山大学附属第三医院诊治的36例DCD供者及26例肝移植受者临床资料。供者男29例,女7例;年龄11~65岁,中位年龄39岁;原发病:重型颅脑外伤14例,脑血管意外16例,缺血缺氧性疾病6例。根据是否接受ECMO支持,将供者分为ECMO组(9例)和非ECMO组(27例)。ECMO组9例均存在明显的血流动力学不稳定。所有受者均为初次肝移植,均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。供者均符合《中国心脏死亡器官捐献工作指南》,按标准成功完成肝脏和肾脏捐献。两组热缺血时间比较采用t检验,肝肾功能比较采用秩和检验。结果ECMO组1例供者因ECMO机械故障导致肝、肾丢弃,非ECMO组2例因热缺血时间过长导致肝、肾丢弃。ECMO组供肝热缺血时间(4.8±0.4)min,明显少于非ECMO组的(24.1±8.0)min(t=-7.89,P<0.05)。ECMO组肝移植受者术后5、7 d ALT,术后7 d Scr明显低于非ECMO组(Z=-2.10,-2.14,-2.03;P<0.05)。结论ECMO支持可使血流动力学不稳定的DCD供者肝肾热缺血时间缩短,肝移植受者可获得良好的手术效果。