何学令
- 作品数:57 被引量:225H指数:7
- 供职机构:四川大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省科技厅科技支撑计划项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 体外电刺激诱导大鼠骨髓间充质干细胞心肌特异性标志物MEF-2C和Cx43的表达被引量:1
- 2015年
- 骨髓间充质干细胞(BMSCs)由于具有向心肌方向分化的潜能,目前已成为一种新的能够修复心脏组织损伤的重要治疗选择。在本实验中我们探讨了体外不同的电刺激时间对BMSCs向心肌方向分化的影响。实验共分为三组:1电刺激组,完全培养基培养的大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)受到电压为2V,频率为2 Hz,脉宽为5ms的电刺激,作用时间为30min/d、2h/d、4h/d、6h/d,连续作用10d;25-氮胞苷(5-Aza)组,5-Aza(10μmol/L)诱导rBMSCs 24h,然后采用完全培养基培养10d;3空白对照组,完全培养基静态培养rBMSCs 10d。通过实时荧光定量PCR方法检测各组rBMSCs的肌细胞特异性增强因子-2C(MEF-2C)mRNA和缝隙连接蛋白43(Cx43)mRNA的表达;通过Western blot方法检测各组rBMSCs的MEF-2C蛋白和Cx43蛋白的表达。实验结果显示:不同持续时间的电刺激组及5-Aza组的MEF-2CmRNA、Cx43mRNA表达量及MEF-2C蛋白、Cx43蛋白表达量均明显高于空白对照组(P<0.05)。本实验结果提示,体外电刺激可以诱导rBMSCs向心肌方向分化,其中2h/d作用效果最佳,但其机制尚未明确。
- 唐敏杨刚姜建何学令李汇明张梦颖吴文超刘小菁李良
- 关键词:大鼠骨髓间充质干细胞
- 低强度振动经雌激素受体α促去卵巢骨质疏松症大鼠成骨细胞的骨形成被引量:3
- 2020年
- 为探讨低强度振动是否能经由雌激素受体α(ERα)促进去卵巢骨质疏松症大鼠成骨细胞的骨形成,本研究通过采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术检测骨形成标志物mRNA表达量的变化,筛选出促进去卵巢骨质疏松症大鼠成骨细胞骨形成的最佳振动参数(45 Hz×0.9 g,g为重力加速度,g=9.8 m/s2)。随后,对成骨细胞施加45 Hz×0.9 g的低强度振动,采用免疫印迹(Western blot)实验检测骨形成标志物和ERα的表达;并用免疫荧光技术检测ERα的表达与分布。最后采用雌激素受体抑制剂ICI182780,抑制ERα的表达,观察低强度振动下成骨细胞骨形成标志物的变化。结果显示,低强度振动可促进去卵巢骨质疏松症大鼠成骨细胞骨形成标志物和ERα的表达(P<0.05),并使ERα向细胞核内转移;而当抑制ERα的表达后,低强度振动促进成骨细胞骨形成的作用减弱。以上结果说明,低强度振动可通过上调去卵巢骨质疏松症大鼠成骨细胞ERα的表达和促进ERα的胞核转移的方式,增强去卵巢骨质疏松症大鼠成骨细胞的骨形成功能,进而为低强度振动应用于临床绝经后骨质疏松症的防治提供理论依据。
- 朱光光俞小琴文继锐包明月唐敏王景阁何学令李良
- 关键词:成骨细胞雌激素受体Α
- 一种动物组织无菌脱细胞装置
- 本发明公开了一种动物组织无菌脱细胞装置,涉及组织工程技术领域,其技术方案要点是:包括罐体,所述罐体的底部设有出液管,所述罐体的顶部设有进液管,所述罐体内侧底部设有支撑块,所述支撑块的底部设有将出液管和罐体内部连通的积液通...
- 刘艳何学令彭旭张晓梅
- 文献传递
- 力学刺激调控骨髓间充质细胞向软骨的分化被引量:4
- 2016年
- 背景:骨髓间充质细胞是组织工程和细胞治疗的理想种子细胞,有研究基于自然的力学传导途径来提高体外骨髓间充质细胞活力,继而进行的体外软骨修复的策略。目的:分析力学因素是如何影响骨髓间充质细胞的命运和有效地利用力学诱导软骨形成这一策略。方法:由第一作者应用计算机对CNKI,PubM ed,Medline和Elsevier数据库中1985至2015年的文献进行检索,以"力学作用;骨髓间充质细胞;软骨;mechanical regulation,bone marrow mesenchymal cells;bone marrow mesenchymal stem cells;chondrogenic differentiation;cartilage differentiation"为关键词,对相关文献进行整理归纳。结果与结论:总结力学刺激对骨髓间充质细胞软骨向分化的最新研究成果,论述不同力学刺激对骨髓间充质细胞软骨向分化的影响,并归纳骨髓间充质细胞软骨向分化过程中细胞感应力学刺激并转化为生物学信号的机制和信号通路,同时对基于间充质干细胞和机械应力的新生组织的软骨再生和修复策略等重点研究的问题进行了展望。
- 张晓梅彭旭魏诗航施雪旎刘艳何学令
- 关键词:骨髓间充质细胞细胞分化软骨细胞多向分化潜能脂肪细胞
- 急性肝损伤模型鼠血清中microRNAs绝对定量与肝损伤程度的相关性研究被引量:3
- 2017年
- 目的观察四氯化碳(CCl_4)诱导的大鼠急性肝损伤模型和对乙酰氨基酚(APAP)诱导的小鼠急性肝损伤模型血清中microRNAs(miR-122、miR-451、miR-92a、miR-192)的绝对定量随时间的变化情况,并分析血清中microRNAs绝对定量与对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤组织病理评分之间的相关性。方法建立CCl_4(1.5mL/kg)诱导的大鼠急性肝损伤模型和APAP(160mg/kg)诱导的小鼠急性肝损伤模型,收集建模过程中各时间点的血清,通过MiRbay^(TM) SV miRNA检测试剂盒对血清中microRNAs的含量进行绝对定量,探究血清中microRNAs的变化情况。同时收集APAP诱导的小鼠急性肝损伤模型中各时间点的肝损伤组织,进行组织病理染色、组织病理评分;随后对小鼠血清中microRNAs的绝对定量与肝损伤组织病理评分进行相关性分析。结果在两种急性肝损伤模型中,均发现血清中miR-122和miR-192的绝对定量在肝损伤8h或2h就出现明显的升高,在24h左右维持在最高的水平,72h逐渐下降至正常水平。miR-92a在CCl_4诱导的大鼠急性肝损伤模型中,出现波动性的变化,无明显的变化规律,miR-451则出现了轻微下降的趋势。miR-92a和miR-451在APAP诱导的小鼠肝损伤进展中,均有逐渐下降的趋势,在48h到达最低点,随后开始恢复。相关性分析发现,小鼠血清中miR-122和miR-192的绝对定量与APAP诱导的小鼠肝损伤组织病理评分(DILI-PSS)呈现良好的正相关(分别为r=0.741 3,P<0.05;r=0.788 3,P<0.01)。结论血清中microR-122和microR-192的绝对定量在大鼠或小鼠急性肝损伤后24h左右达峰,72h降低,并且与APAP诱导的小鼠急性肝损伤组织病理评分具有良好的相关性。
- 左忆楠何学令施雪旎魏诗航尹海林
- 关键词:肝损伤MICRORNAS
- 甲状腺转录因子-2持续表达的转基因小鼠模型建立
- 2006年
- 甲状腺转录因子-2(TTF-2)在个体发生中的表达具有高度组织特异性和发育阶段特异性,是甲状腺、腭等器官正常发育的重要调节因子。为研究TTF-2基因活动规律和表达模式发生变化,对胚胎发育过程中器官发生产生的影响,为揭示新生儿出生缺陷形成的分子机制积累资料,构建了TTF-2基因重组表达载体pBROAD3-titf-2,通过显微注射法将目的基因注入小鼠受精卵的雄原核,成功建立了TTF-2持续表达的转基因小鼠模型。
- 何学令尹海林黄磊夏庆杰
- 关键词:转基因动物
- 力学刺激经ERα/β-catenin信号途径调节大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化能力
- <正>力学环境是骨组织重要的微环境之一。力学负荷不仅影响骨组织的生长发育,同时也影响骨代谢平衡。骨质疏松后,除了成骨细胞对力学刺激的敏感性降低外,其前体细胞——骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived m...
- 姚晓琳何学令严中琴陈槐卿李良
- 文献传递
- 腺病毒介导的nm23-H1对人恶性黑色素瘤A375体外抑制作用的研究被引量:5
- 2011年
- 目的观察Ad-GFP-nm23-Hl抑制人恶性黑色素瘤(Malignant melanoma,MM)A375细胞生长和转移的作用,为后期nm23-Hl基因和腺病毒载体用于MM及其它肿瘤的基因治疗提供一定的理论和方法。方法采用MTT法检测Ad-GFP-nm23-Hl,对A375细胞增殖力的影响,用细胞基质胶黏附实验黏附力和侵袭能力实验来分别检测Ad-GFP-nm23-Hl,对A375细胞粘附力和侵袭能力的影响。结果Ad-GFP-nm23-Hl可以明显抑制A375细胞的增殖、黏附和侵袭能力,其抑制作用呈剂量—效应关系。结论Ad-GFP-nm23-Hl,对人恶性黑色素瘤A375细胞的生长和转移具有抑制作用。
- 李宗河何学令刘艳尹海林
- 关键词:NM23-H1
- Ad-GFP-nm23-H1体内外抑制人高转移肺巨细胞癌株95D生长和转移作用的研究
- 2010年
- 目的观察Ad-GFP-nm23-Hl抑制人高转移肺巨细胞癌株95D细胞生长和转移的作用,为后期nm23-Hl基因和腺病毒载体用于95D及其他肿瘤的基因治疗提供一定的理论和方法。方法应用MTT法及Transwell小室法分别检测95D细胞经Ad-GFP-nm23-Hl作用后的细胞体外增殖活性、黏附能力以及侵袭力的变化。同时应用人高转移肺巨细胞癌株95D裸鼠移植瘤模型,研究Ad-GFP-nm23-Hl对此移植瘤生长的抑制作用。结果108PFU/ml、109PFU/ml、1010PFU/ml处理组,可以明显抑制95D细胞的增殖、黏附和侵袭能力,其抑制作用呈剂量-效应关系。109PFU/ml的Ad-GFP-nm23-Hl对移植瘤的抑瘤率为38.23%,较对照组差异显著。结论Ad-GFP-nm23-Hl对人高转移肺巨细胞癌株95D细胞的生长和转移以及95D实体瘤具有抑制作用。
- 鲁远飞王琦刘艳何学令尹海林
- 关键词:NM23-H1基因治疗
- 低频脉冲电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞软骨样细胞分化被引量:7
- 2012年
- 骨髓间充质干细胞(BMSCs)是一类具有多向分化潜能的细胞。低频脉冲电磁场(LEPEMFs)治疗可导致哺乳动物细胞水平的生物化学变化,加速组织修复。因此,我们假设LFPEMFs可以促进体外大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向软骨样细胞分化。实验分为3组:1)LFPEMFs组,rBMSCs暴露于50Hz、1mT低频脉冲电磁场,30min/d;2)成软骨诱导组,采用软骨诱导介质培养rBMSCs;3)对照组,采用完全培养介质培养rBMSCs。通过倒置相差显微镜逐日连续观察rBMSCs的生长状况和形态特征。分别于实验第10、15和20d收集各组rBMSCs标本,采用实时荧光定量PCR方法检测Ⅱ型胶原(ColⅡ)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)mRNA表达,采用组织化学与免疫组化方法检测aggrecan和ColⅡ的蛋白表达。结果表明:在各时间点,LFPEMFs组与成软骨诱导组的ColⅡ、ag-grecan mRNA表达和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。本实验提示,LFPEMFs可以促进rBMSCs向软骨样细胞分化。
- 邱飞远何学令姚晓琳李凯况薇吴文超李良
- 关键词:低频脉冲电磁场大鼠骨髓间充质干细胞聚集蛋白聚糖