何斌
- 作品数：14 被引量：84H指数：5
- 供职机构：四川大学华西第二医院妇产科更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小片段RNA干扰提高人卵巢癌耐药细胞对化疗药物的敏感性研究被引量：1
- 2008年
- 目的采用针对多药耐药基因MDR1的小片段RNA(siRNA)转染人卵巢癌耐药细胞株,了解转染后能否提高细胞对化疗药物的敏感性。方法用脂质体将合成针对MDR1的siRNA转染具有MDR1高表达的人卵巢癌泰素耐药细胞株OVCAR8/TR,并用ATP生物发光法检测转染前、后细胞对顺铂、5-氟脲嘧啶、阿霉素和泰素4种化疗药物敏感性的变化。结果OVCAR8/TR细胞对顺铂、阿霉素和泰素均耐药,转染后细胞能够明显提高通过P-gp转运药物泰素和阿霉素的敏感性,泰素对细胞的抑制率由转染前的26%提高到78%,阿霉素对细胞的抑制率则由转染前的37%提高到58%,对顺铂的耐药性则没有改变。单用脂质体转染组的药敏结果与未转染组差异无统计学意义。结论siRNA干扰能够逆转人卵巢癌化疗药物的多药耐药,提高对化疗药物的敏感性。
- 楼江燕彭芝兰郑莹何斌
- 关键词：卵巢癌化疗RNA干扰
- 卵巢癌化疗药敏试验ATP生物荧光法的建立及临床应用
- 彭芝兰刘珊玲楼江燕王和王红静王平张崇淑张家文钱晓蕾杨小芸唐茜萍何斌
- 该课题用生物荧光法进行检测，根据ATP下降程度评价癌细胞对芗的敏感性或耐药性。该方法敏感、预测准确性高。经临床上对71例病人进行试验及随访，可评价率94.4%，敏感性90%，特异性88.9%，阳性预测值95.7%，阴性预...
- 关键词：
- 关键词：药敏试验ATP生物荧光法卵巢癌
- FHIT基因杂合性丢失及微卫星不稳定性与宫颈癌发生发展的关系被引量：6
- 2005年
- 目的探讨FHIT基因杂合性丢失(LOH)及微卫星不稳定性(MI)在宫颈癌发生发展中的作用。方法选择FHIT基因的两个微卫星多态标记对60例浸润性宫颈癌及35例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织进行LOH和MI检测。结果在D3S1234和D3S1300座位上,浸润性宫颈癌的LOH发生率分别为45.0%(27/60)、38.3%(23/60),MI频率分别为18.3%(11/60)、11.7%(7/60)。CIN的LOH频率分别为42.9%(15/35)、37.1%(13/35)。MI频率分别为11.4%(4/35)、8.6%(3/35)。宫颈癌及CIN在两个位点的LOH和MI无统计学差异(P>0.05);两位点的LOH阳性率在宫颈癌组织高中分化与低分化之间有统计学差异(P<0.05);双座位的LOH及MI在宫颈癌有无淋巴结转移间有统计学差异(P<0.05);高级别CIN(CIN及原位癌)患者的LOH和MI的发生率高于低级别CIN(CIN、)。结论FHIT基因的改变是CIN发生过程中的较晚期事件;FHIT基因的LOH对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值。
- 刘辉彭芝兰王和刘珊玲张崇淑唐茜萍何斌
- 关键词：宫颈癌宫颈上皮内瘤样病变FHIT基因杂合性丢失微卫星不稳定性
- 实时荧光定量PCR和RT-PCR检测宫颈癌细胞株HPV-16 E6和E7基因的实验研究被引量：7
- 2007年
- 目的探讨实时荧光定量PCR和RT-PCR检测HPV-16E6和E7基因的实验方法。方法将制备的含HPV-16E6和E7基因的质粒作为标准品,建立实时荧光定量PCR和RT-PCR方法,分别对3种宫颈癌细胞株进行HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA拷贝数的定量检测。结果建立的实时荧光定量PCR标准曲线相关系数大于0.99,PCR效率在90%以上。HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA拷贝数在宫颈癌细胞株CaSki、SiHa和HeLa中从高到低依次是CaSki>SiHa>HeLa。结论用实时荧光定量PCR和RT-PCR方法研究HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA含量结果可靠,为进一步研究两个基因与宫颈病变的关系奠定了基础。
- 陈悦悦彭芝兰刘珊玲何斌胡敏
- 关键词：人乳头瘤病毒16实时荧光定量PCR
- RNA干扰技术逆转卵巢上皮性癌细胞多药耐药的研究被引量：13
- 2006年
- 目的探讨应用RNA干扰(RNAi)技术逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞多药耐药的可行性。方法将设计合成的针对多药耐药基因MDR1的特异性小分子干扰RNA(siRNA),用脂质体转染具有MDR1基因高表达的卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OVCAR8/TR。用荧光定量RT-PCR技术和流式细胞仪分别测定转染前后细胞MDR1mRNA及糖蛋白P-gp表达的变化;三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法检测转染前后细胞对顺铂、氟尿嘧啶、阿霉素和紫杉醇药物敏感性(以ATP抑制率判断)的变化情况。结果转染后24、48、72、96和120h,OVCAR8/TR细胞MDR1mRNA的抑制率分别为26·42%、84·00%、78·43%、45·85%和0;转染后48h MDR1mRNA的抑制率达到最高峰。转染后24、48、72、96和120h,OVCAR8/TR细胞P-gp的抑制率分别为16·71%、49·64%、85·23%、65·98%和9·44%;转染后72h P-gp的抑制率达到最高。转染MDR1siRNA后,能够明显提高OVCAR8/TR细胞对紫杉醇和阿霉素的敏感性,在紫杉醇的作用下,转染前后OVCAR8/TR细胞的ATP抑制率分别为(25·8±3·1)%和(78·0±9·8)%,转染前后比较,差异有统计学意义(P<0·05)。结论在OVCAR8/TR细胞中,针对MDR1合成的siRNA能够有效地抑制MDR1mRNA和P-gp的表达,并能恢复其对紫杉醇和阿霉素的敏感性。应用RNAi技术,能够逆转卵巢癌细胞对化疗药物的多药耐药。
- 楼江燕彭芝兰郑莹王和何斌王红静
- 关键词：小分子干扰MDR细胞系
- 中孕期唐氏综合征血清学筛查在高龄孕妇中的应用价值探讨被引量：31
- 2016年
- 目的探讨中孕期唐氏综合征(DS)血清学筛查在高龄孕妇中的应用价值。方法选取2009年1月至2014年12月于四川大学华西第二医院妇产科产前诊断中心接受中孕期DS血清学筛查的1 571例高龄孕妇(预产年龄≥35岁),以及2012年1~12月于本院妇产科产前诊断中心接受中孕期DS血清学筛查的10 881例低龄孕妇(预产年龄<35岁)为研究对象,分别纳入高龄组(n=1 571)和低龄组(n=10 881)。本研究纳入标准:妊娠期妇女,孕龄为14~20+6孕周,单胎妊娠,自愿接受中孕期DS血清学筛查。排除标准:有染色体异常和先天性畸形家族史者,妊娠期内合并内外科疾病者,双胎或多胎妊娠者,以及糖尿病患者。采用血清游离β-人绒毛膜促性腺激素(hCG)、甲胎蛋白(AFP)和游离雌三醇(uE3)DS三联筛查法对两组孕妇进行DS筛查,设定DS血清学高风险临界值为l/270。对DS血清学筛查风险值≥l/270的DS血清学筛查高风险孕妇,均建议行羊膜腔穿刺染色体检查,以确诊胎儿是否为DS;对未接受羊膜腔穿刺染色体检查的孕妇,采用电话随访方式随访其妊娠结局。分别计算两组孕妇DS血清学筛查的假阳性率和筛查效率,并进行统计学比较。两组受试对象的孕龄和体重等比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,DS血清学产前筛查前均征得受试对象的知情同意。结果 1高龄组1 571例孕妇中,DS血清学筛查高风险孕妇为121例,4例胎儿最终被确诊为DS;DS血清学筛查低风险孕妇为1 450例,未发现DS胎儿。低龄组10 881例孕妇中,DS血清学筛查高风险孕妇为759例,6例胎儿最终被确诊为DS;DS血清学筛查低风险孕妇为10 122例,1例胎儿最终被确诊为DS,为DS血清学筛查假阴性病例。2高龄组孕妇DS血清学筛查假阳性率为7.4%(117/1 571),低龄组为6.9%(753/10 881),二者筛查假阳性率
- 刘春燕何斌韩代文刘之英赖怡秦利袁粒星刘珊玲王和
- 关键词：唐氏综合征血清学筛查妊娠中期假阳性率
- 不同超声测量指标计算孕龄对唐氏综合征筛查结果影响的分析被引量：2
- 2015年
- 目的探讨不同超声测量指标计算孕龄对中孕期唐氏综合征（DS）筛查效率的影响。方法选择2012年1~12月在四川大学华西第二医院产前诊断中心于中孕期抽血行DS筛查的5 934例孕妇为研究对象,按照不同孕龄计算方法,将其分为顶臀长组（n=2 967,采用早孕期胎儿顶臀长计算孕龄）和双顶径组（n=2 967,采用中孕期胎儿双顶径计算孕龄）。对两组DS筛查阳性率及DS筛查效率进行对比分析。两组孕妇的年龄、体质量等一般临床资料比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结果 1顶臀长组孕妇接受DS筛查主要集中于孕龄为15~17孕周,而双顶径组孕妇接受DS筛查的孕龄为15~20孕周。2双顶径组的DS筛查阳性率（9.80%）高于顶臀长组（6.20%）,两组比较,差异有统计学意义（χ2=26.641,P〈0.000 1）;双顶径组的DS筛查效率（1.03%）低于顶臀长组（2.17%）,但两组比较,差异无统计学意义（χ2=0.386,P〉0.05）。结论早孕期超声检查测量胎儿顶臀长计算孕龄用于中孕期DS筛查可能优于中孕期超声检查测量胎儿双顶径计算孕龄方法。
- 刘春燕何斌韩代文袁粒星刘珊玲王和
- 关键词：唐氏综合征妊娠中期孕龄双顶径
- 小干扰RNA诱导人卵巢癌细胞MDR1基因沉默的研究被引量：4
- 2007年
- 目的采用RNA干扰技术逆转人卵巢癌OVCAR8/TR细胞中多药耐药基因,探讨该技术能否有效地抑制多药耐药基因MDR1的表达,降低该基因编码的糖蛋白P-gp的水平。方法设计合成针对MDR1的小片段RNA(siRNA),将合成的siRNA用脂质体转染具有多药耐药基因MDR1高表达的人卵巢癌泰素耐药细胞株OVCAR8/TR,用荧光定量RT-PCR检测转染后不同时间点MDR1的mRNA的变化,流式细胞仪定量测定转染后不同时间点P-gp表达的情况。结果MDR1的siRNA转染细胞48 h基因的抑制达最高,转染的第5 d回到正常水平。阴性对照组mRNA的量与未转染组的mRNA的量差异无统计学意义。P-gp在转染后的72 h其抑制最强,至第5 d时恢复接近正常水平,阴性对照组蛋白表达与未转染组的蛋白表达差异无统计学意义。结论siRNA能够有效地抑制多药耐药基因MDR1的mRNA和P-gp的表达,为逆转卵巢癌的多药耐药带来了新的希望。
- 楼江燕彭芝兰郑莹王和何斌王红静
- 关键词：RNA干扰卵巢癌基因治疗
- FHIT基因与宫颈癌的相关性研究被引量：5
- 2002年
- 目的 探讨 FHIT基因在宫颈癌发生中的作用及与宫颈癌的临床分期和组织分化程度间的关系。方法 选择 FHIT基因的 2个微卫星多态标记对 4 2例宫颈癌进行杂合性丢失 (L OH)和微卫星不稳定性 (MI)分析。结果 在 D3S12 34和 D3S130 0座位上 ,L OH频率分别为 5 2 .5 % (2 1/ 4 0 )、70 .8% (17/ 2 4 ) ,MI频率分别为2 2 .5 % (9/ 4 0 )、2 0 .83% (5 / 2 4 )。FHIT基因改变与宫颈癌的临床分期和组织分化程度无关。结论 FHIT基因参与了宫颈癌的发生。
- 刘辉彭芝兰刘珊玲王和唐茜萍何斌
- 关键词：宫颈癌FHIT基因杂合性丢失微卫星不稳定性
- 白血病细胞可变铁池的检测及其意义被引量：2
- 2006年
- 为了研究细胞可变铁池(labileironpool,LIP)的检测方法,用不同浓度的去铁胺(DFO)与K562及HL-60细胞共同培养0、6、12、24、48小时,用钙荧光素(caicein)负荷K562及HL-60细胞,荧光分辨仪检测细胞荧光量;用快速铁螯合剂螯合铁,使恢复荧光,然后计算2次荧光差值。结果表明:浓度为50和100μmol/L的DFO作用于K562及HL-60细胞12小时后,荧光值明显高于对照组(P<0.05),且LIP的荧光差值(ΔLIP)随DFO作用时间的延长及浓度增加而降低,即呈一定的时间及剂量依赖性。结论:DFO通过螯合细胞内铁降低了白血病细胞LIP;calceinAM荧光可作为检测细胞LIP变化的比较可靠的方法。
- 贾国存高举廖清奎李丰益袁粒星何斌
- 关键词：铁去铁胺K562HL-60
