刘仁海
- 作品数：35 被引量：144H指数：7
- 供职机构：厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划福建省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 口服转胸腺素α1基因聚球藻对小鼠T细胞亚群作用的研究被引量：5
- 2003年
- 为探讨口服后转胸腺α1(Tα1)基因聚球藻对T细胞亚群的作用,将小鼠随机分为空白对照组、野生藻组、转化藻(小剂量、中剂量和大剂量)组和日达仙组,用灌服的方式,给予空白对照组20mL·kg^(-1)的生理盐水,野生藻组0.4g·kg^(-1)的野生聚球藻;转化藻小、中、大剂量组,分别0.2g·kg^(-1)、0.4g·kg^(-1)和0.6g·kg^(-1)的转Tα1基因聚球藻;日达仙组则肌注给予3.2mg·kg^(-1)的胸腺素α1(日达仙)。结果表明转Tα1基因藻口服后可显著提高CD3亚群水平,显著提高CD4亚群水平,明显提高CD4/CD8的比值。提示转Tα1基因聚球藻具有增强机体免疫功能的作用。
- 刘仁海章军周克夫徐虹徐惠娟楼士林黄守杰
- 关键词：小鼠T细胞亚群免疫功能蓝藻免疫增强剂口服
- 磷脂酰胆碱拮抗自由基致小鼠微核作用的研究被引量：1
- 1997年
- 应用小鼠外周血正染红细胞（ＮＣＥ）微核实验，评价臭氧产生的自由基对细胞遗传毒理效应及其磷脂酰胆碱对其遗传损伤的保护作用。实验结果显示：臭氧可使小鼠ＮＣＥ微核率明显增高（Ｐ＜０．０１），而磷脂酰胆碱对自由基诱导微核作用有明显的抑制。提示磷脂酰胆碱具有拮抗自由基造成的ＤＮＡ氧化损伤作用。
- 曹新谢菁曹旭东曹云刘仁海黄瑾
- 关键词：磷脂酰胆碱微核试验自由基药理
- 一种新型广谱的原核型分泌表达载体的建立及人表皮生长因子的表达被引量：1
- 2007年
- 通过Cyanobase藻类学数据库查询,从集胞藻6803转译后加工过程中的某些蛋白的分泌信号序列得到了可以用于分泌型表达的信号序列,进一步通过SignalP3.0Server分析软件预验证,从集胞藻6803得到4种不同蛋白的信号序列A、B、C、D,将这些信号序列插入pET-His-EGF表达载体hegf基因上游,得到了带有分泌型信号的pS-X系列分泌型表达载体,人表皮生长因子（hEGF）在其中的pS-A载体中实现了分泌型表达,hEGF分泌到周质空间的相对表达量约为1%,在其它3个载体中未见表达。获得的pS-A分泌型表达载体是一种新型分泌型表达载体,它利用蓝藻信号序列作为分泌表达的信号肽,实现了hEGF多肽在大肠杆菌中分泌表达,通过融合白亚细胞定位法处理得到的hEGF多肽在胞质、周质空间和培养基中表达的比例为85∶33∶25（density intensity/mm^2）,利用渗透休克处理方法得到的比例为50∶37∶25。由于A信号序列本身是集胞藻6803膜蛋白（ID：s110172/NCBI-GI：1001433）的分泌信号肽,说明pS-A载体是一种广谱的原核型分泌表达载体。这一结果为实现hEGF在螺旋藻中的分泌型表达奠定了基础。
- 郝春芳徐虹章军刘仁海
- 关键词：信号肽序列分泌型表达
- 气功外气对老龄大鼠抗氧化酶活性的影响
- 1992年
- 近年来,有关气功抗衰老作用的研究日益受到重视,同时,气功对多种老年病和衰老有一定的防治作用,特别是气功延年机理方面的研究,引起许多学者的重视。有关气功抗衰老作用的动物实验研究报道较少,本文基于衰老的自由基学说观察气功外气对老龄大鼠体内抗氧化酶,即超氧化物歧化酶(SOD)和血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化,以探讨气功的抗衰老作用。材料与方法一、动物健康Wistar老龄大鼠,20～22月龄,体重500～600g。二、方法40只大鼠随机分为雄性实验、雌性实验及各自对照组共四组。每组10只。各组实验组分笼,隔一间实验室分别饲养,饲料、光线环境相同。实验期间每日下午2时左右由牛家璋气功师施以气功外气20min。手法:气功师两手在笼之两侧相距约50cm,
- 赵复塍刘吉民刘仁海李俐周翔牛家璋
- 关键词：气功抗衰老
- 蓝藻Synechococcus sp.PCC 7942穿梭表达质粒的构建及胸腺素α_1基因的表达被引量：7
- 2003年
- 利用本实验室构建的含蓝藻Plectonema boryanum内源小质粒的穿梭质粒pPRS-1,改建成含热诱导启动子、泛素融合的胸腺素α_1(UB-Tα_1)目的基因、卡那霉素抗性选择标记、rbcs终止子的新的穿梭表达重组质粒pPRFUT。将这种重组质粒转化蓝藻Synechococcus sp.PCC7942,通过抗性筛选获得了具卡那霉素抗性的转化藻株。经Southern-blot杂交证实,穿梭表达质粒已转入蓝藻Synechococcus sp. PCC7942细胞中;在42℃热诱导30min后,目的基因UB-Tα_1得到较高水平表达,表达量约占总蛋白量的7.5%。
- 章军秦燕欧阳青徐虹周克夫刘仁海楼士林
- 关键词：蓝藻穿梭质粒胸腺素Α1基因表达
- 磷脂酰胆碱对老年大鼠血液流变性的影响被引量：2
- 1994年
- 老年大鼠用磷脂酰胆碱灌胃（６００ｍｇ／ｋｇ），每日１次，连续８日，观察其血液流变性的变化。结果表明，较之对照组，实验组血浆比粘度（ηｐ）显著降低（Ｐ＜０．０１），全血比粘度（ηｂ），红细胞压积（Ｈｃｔ）和红细胞沉降率均明显降低（Ｐ＜０．０５），全血还原粘度（ηｒ）无显著改变。提示磷脂酰胆碱可改善衰老机体的血液流变性，具有延缓衰老的作用。
- 刘仁海何玲王江成唐光辉李悦山
- 关键词：磷脂酰胆碱血液流变性衰老
- 磷脂酰胆碱抗氧化效应及对遗传损伤的保护作用被引量：2
- 1996年
- 磷脂酰胆碱５００ｍｇ／ｋｇ灌胃２０日可使Ｏ_３环境中的小鼠超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性显著增强，血浆丙二醛（ＭＤＡ）含量及外周血正染红细胞（ＮＣＥ）微核率明显下降。结果提示：磷脂酰胆碱具有抗氧化作用及拮抗自由基造成遗传的损伤。进一步证实了自由基在微核形成中具有重要意义。
- 曹新黄瑾刘仁海
- 关键词：磷脂酰胆碱抗氧化效应药理学
- 采用PhR-L20C光生物反应器培养转胸腺素α1基因蓝藻的研究被引量：2
- 2004年
- 采用PhR L20C光生物反应器对转胸腺素α1基因聚球藻Synechococcussp.PCC7942进行6批次的培养,结果表明,采用本实验室优化后的培养条件,根据该型气升式光生物反应器所具备的各项性能指标和参数条件进行培养,一个培养收获周期为6d,平均生长速率为0.61OD730/d,6d后藻细胞平均终浓度达到OD730=4.27,绘制了转基因藻细胞的光密度与其干质量的标准曲线,通过曲线得出产率平均约为0.36g/(Ld),最高0.40g/(Ld);最终细胞密度平均可达2.52g/L,最高2.84g/L.
- 刘俊郑锦乾黄小花郝春芳周克夫徐虹刘仁海章军
- 关键词：蓝藻免疫调节剂
- 抗胸腺素α1(Tα1)多克隆抗体的纯化及转基因藻中Tα1的检测被引量：2
- 2004年
- 采用不同浓度的硫酸铵分级盐析纯化抗Tα1多克隆抗体,然后用不同量的牛血清白蛋白(BSA)与兔抗Tα1抗体进行中和,以去除血清中的抗BSA抗体,并利用纯化后的抗Tα1多克隆抗体检测转基因藻中Tα1.结果表明:采用25%(NH4)2SO4进行分离纯化,并将BSA加入到血清中进行中和,37℃处理30min,BSA的量与血清的比例以1μL血清+15μgBSA可达到中和血清中的抗BSA抗体的目的.获得的抗Tα1抗体效价与未进行分离前基本相同,并且阴性本底低.采用ELISA方法检测野生藻和转基因藻中的Tα1,转基因藻的Tα1OD450值比野生藻的高2.1倍以上,提示Tα1在转基因藻中成功表达.实验证明,此方法能有效纯化抗胸腺素α1多克隆抗体,获得特异性强的抗胸腺素Tα1抗体,并且效价不受影响.
- 黄小花周克夫章军刘仁海徐虹
- 关键词：酶联免疫吸附反应纯化抗体转基因藻
- 人源超氧化物歧化酶基因突变及在大肠杆菌中表达
- 目的:在克隆人源铜锌超氧化物歧化酶基因(hCu,Zn-SOD)的基础上,对hCu,Zn-SOD进行定点突变,使其在E.coliDH5α中表达,为进一步改造hCu,Zn-SOD基因奠定基础. 方法:首先构建质粒pESOD,...
- 周赞虎 陈枝华 张海艳刘仁海
- 关键词：定点突变基因表达大肠杆菌
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