刘永杰
- 作品数：108 被引量：139H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家肉羊产业技术体系建设项目国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 一种高效分离非洲猪瘟病毒的PAMs/WSh细胞及其分离方法与应用
- 本发明公开了一种高效分离非洲猪瘟病毒的PAMs/WSh细胞及其分离方法与应用，本发明在常规分离PAMs细胞并重悬后，依次用不同孔径细胞筛过滤除杂、用不含RNA酶的无核酸酶水在20 s内重悬，然后加入含90%胎牛血清+10...
- 吴锦艳何继军侯俊玲申超超兰喜刘永杰马维民党文田宏郑海学
- 我国一些地区羊衣原体血清流行病学调查分析被引量：13
- 2015年
- 羊衣原体是由专性细胞内寄生的流产嗜衣原体引起的一种人兽共患传染病,危害严重。为了解近年我国一些地区羊衣原体的流行情况,特以间接血凝试验(IHA)对采自全国8个省(区)的羊血清样本进行检测,阳性率达46.09%(342/742)。其中湖北省、安徽省、山东省、新疆省、吉林省、四川省、宁夏省和甘肃省分别为60%(12/20)、42.86%(51/119)、52.75%(48/91)、40.13%(122/304)、51.91%(68/131)、30.56%(11/36)、67.74%(21/31)和90%(9/10),显示羊衣原体在我国流行严重。与以往资料相比较,感染率在全国呈逐年增加趋势。绵羊、山羊的抗体阳性率分别为47.27%(268/576)和42.28%(74/175),表明前者感染率要高于后者。
- 成伟伟彭靖雯张克山刘永杰孔汉金尚佑军刘湘涛刘磊
- 关键词：间接血凝试验血清学调查
- 羊传染性脓疱病毒疫苗株和野毒株VIR基因的比较分析被引量：2
- 2016年
- 羊传染性脓疱(Orf)是由羊传染性脓疱病毒(orf virus,ORFV)感染引起的一种人兽共患传染病。VIR是ORFV编码的抗干扰素基因。为比较分析ORFV疫苗弱毒株和野毒株编码的VIR基因的特征,本试验扩增并测定了ORFV疫苗株和野毒株的VIR基因序列,比较分析了两者核酸水平和氨基酸水平的变异情况以及二、三级蛋白结构。结果表明:本次测定的ORFV疫苗株与野毒VIR基因核苷酸序列相似性为94.6%,氨基酸序列相似性为91.8%,两者在Z-DNA结合结构域和ds-RNA结合结构域均有突变。
- 王玲玲刘永杰郑海学张克山刘湘涛
- 关键词：羊口疮病毒疫苗株野毒株
- Asia1型FMDV前导蛋白的BHK-21亚细胞定位及其所致细胞蛋白质组变化研究
- 口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus, FMDV)属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属,为大约8500 nt的单股正链RNA病毒。FMDV感染宿主后,病毒RNA被翻译成一个多聚蛋白,经前导蛋白(...
- 刘永杰
- 关键词：亚细胞定位蛋白质组学双向电泳质谱鉴定
- 文献传递
- 一种用于塞内卡病毒抗体检测的固相竞争ELISA试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种用于塞内卡病毒抗体检测的固相竞争ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括塞内卡病毒灭活抗原包被的酶标板以及HRP标记的塞内卡病毒兔抗IgG。本发明使用HRP标记兔抗IgG，替代传统ELISA中的一抗和二...
- 郑海学田宏杨帆石正旺刘华南张克山朱紫祥李丹曹伟军刘永杰
- 文献传递
- 一种用于检测羊传染性脓疱皮炎病毒的试剂盒及其检测方法
- 本发明提供了一种用于检测羊传染性脓疱皮炎病毒的检测方法，通过设计一对引物和一条探针对样品的DNA模板进行实时荧光定量PCR检测，本发明还提供了利用上述检测方法检测羊传染性脓疱皮炎病毒的试剂盒。本发明针对ORFV的保守区域...
- 刘湘涛田宏吴锦艳陈妍尚佑军张克山尹双辉王光祥杨顺利刘永杰
- 文献传递
- 基于单域抗体9-4-1免疫磁珠的直扩检测小反刍兽疫病毒的试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑1免疫磁珠的直扩检测小反刍兽疫病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQIDNO.1所示的小反刍兽疫病毒单域抗体9‑4‑1通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑1免...
- 吴锦艳尚佑军田宏侯俊玲吕律刘永杰何继军李玲霞杜国玉张成孙健飞
- 氯化锰或含有氯化锰的组合物在制备用于治疗非洲猪瘟的药物中的新用途
- 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域，具体涉及氯化锰(MnCl<Sub>2</Sub>)或含有氯化锰的组合物用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途。本发明首先发现，氯化锰能够抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72的表达，抑制非洲猪瘟病毒基因拷贝数...
- 郑海学李丹易佳敏彭江玲杨文萍张敬茹毅田宏杨帆刘永杰卢炳洲张克山
- 文献传递
- 一种A型口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用
- 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种A型口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明以我国2013年A型口蹄疫病毒流行株(A/GDMM/2013)的三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的氨基酸序列为基础进行优化设计，并...
- 茹毅刘华南张贵财杨帆李丹郭建宏何继军张娇燕李亚军马坤伍春平郝荣增卢炳州田宏朱紫祥张克山曹伟军刘永杰靳野马旭升党文
- 文献传递
- 羊口疮病毒ORF129基因的原核表达、纯化及鉴定被引量：4
- 2018年
- 试验旨在克隆羊口疮病毒ORF129基因,并对其编码蛋白进行表达及纯化。参照GenBank已发表羊口疮病毒OV-IA82株ORF129基因序列(登录号:AY386263.1),用Primer Premier 5.0软件设计合成1对特异性引物,利用PCR方法扩增ORF129全基因序列,将其与质粒pET-28a(+)经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后连接,构建重组质粒pET-28a(+)-ORF129。重组质粒经双酶切和测序鉴定后转化大肠杆菌Rosttta感受态细胞,利用IPTG诱导ORF129基因的表达,经SDS-PAGE分析后,将表达产物超声破碎、洗涤、溶解,然后采用尿素梯度透析方法进行复性,经亲和层析法纯化目的蛋白并通过Western blotting对其进行鉴定。双酶切鉴定和测序结果表明,本试验成功构建了重组质粒,读码框正确,菌液起始D600nm值为0.4~0.8,37℃、220r/min、1mmol/L IPTG诱导3h时能得到ORF129包涵体蛋白,蛋白大小为58ku,在加入精氨酸、甘油的复性液中,蛋白复性率较高,将复性后蛋白与Ni柱结合,在咪唑浓度为500mmol/L时,能将蛋白洗脱,纯化的蛋白经Western blotting鉴定正确,证明蛋白成功表达。本研究成功构建了羊口疮病毒ORF129基因原核表达重组质粒,并成功表达和纯化了ORF129蛋白,为后续羊口疮病毒检测方法的建立奠定基础。
- 杜国玉刘永杰吴锦艳王光祥尚佑军张勇
- 关键词：羊口疮病毒原核表达
