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刘若尘
作品数:
1
被引量:13
H指数:1
供职机构:
中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室
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发文基金:
国家自然科学基金
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
罗正
中国农业大学生物学院农业生物技...
郑世军
中国农业大学生物学院农业生物技...
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郑世军
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罗正
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刘若尘
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生物工程学报
年份
1篇
2009
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单核增生性李氏杆菌溶血素的原核表达及其单克隆抗体的制备
被引量:13
2009年
为了深入研究单核增生性李氏杆菌(LM)致病机理,从其基因组中克隆李氏杆菌溶血素基因hly,并将其与原核表达载体连接在大肠杆菌BL21中表达携带His标签的李氏杆菌溶血素(LLO)融合蛋白,经镍柱纯化得到重组LLO蛋白作为免疫原并免疫小鼠。取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(Sp2/0)进行融合,经过3次亚克隆后获得3株稳定分泌针对LLO蛋白单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为Anti-LLO1、Anti-LLO2、Anti-LLO3;经ELISA测定其细胞培养上清效价分别为1:3.6×104、1:6.4×104、1:1.6×104,腹水效价分别为1:2×107、1:2×107、1:1×107;亲和力解离常数(Kd)分别为6.18×10-11、7.50×10-11、6.27×10-11;3株单抗的IgG亚类均为IgG1。经Westernblotting鉴定证明,该3株抗体均能特异地识别李氏杆菌LLO蛋白,该单抗的制备为深入研究LM的致病机理奠定了基础。
罗正
刘若尘
郑世军
关键词:
原核表达
单克隆抗体
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