孙岩
- 作品数：34 被引量：46H指数：4
- 供职机构：天津医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技计划天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- pRNAT-U6.1/Neo系统在E2F-3基因RNA干扰载体构建中的应用被引量：5
- 2009年
- 目的:构建针对E2F-3基因的siRNA表达载体。方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F-3基因的寡核苷酸链,各64个碱基,退火、克隆到经BamHI、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6.1/Neo载体上,重组构建RNAi质粒。通过双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建效果。结果:重组构建的pRNAT-U6.1/Neo载体经PCR分析及插入基因片段序列分析,结果表明64个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致,插入序列无点突变位点。结论:载体的成功构建为进一步研究E2F-3基因在膀胱肿瘤中的作用奠定了基础,为进一步以其为靶点进行膀胱癌细胞系体外实验创造了条件。
- 胡海龙吴长利孙岩张文岚韩瑞发
- 关键词：RNA干扰质粒
- 天津地区汉族人群rs798766单核苷酸多态性与膀胱尿路上皮癌发病风险相关性被引量：1
- 2015年
- 目的：探讨rs798766单核苷酸多态性与天津地区汉族人群膀胱尿路上皮癌发病风险的关系。方法：采用等位基因特异性PCR技术对363例膀胱尿路上皮癌患者（试验组）和384例对照人群（对照组）的基因型进行分型。结果：试验组rs798766 T等位基因频率为15.3%,C等位基因频率为84.7%;对照组T等位基因频率为10.5%,C等位基因频率为89.5%,两组T等位基因频率分布存在明显的统计学差异（P=0.006;校正OR=1.53;95%CI为1.13~2.08）。与基因型C/C相比,rs798766（C/T＋T/T）基因型明显增加膀胱尿路上皮癌的发病风险（P=0.006;校正OR=1.61;95%CI为1.14~2.25）;病理分层分析显示,rs798766单核苷酸多态性与膀胱癌病理分期、分级无相关性。结论：Rs798766 T等位基因明显增加天津地区汉族人群膀胱尿路上皮癌发病风险,可能是预测天津地区汉族人群膀胱癌发病风险的良好基因标记。
- 乔志辉王仁杰谢万青孙岩吴长利胡海龙
- 关键词：膀胱尿路上皮癌单核苷酸多态性全基因组关联研究遗传易感性
- E2F3基因沉默载体pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo的构建及表达被引量：1
- 2010年
- 【目的】构建针对E2F3基因的shRNA表达载体,通过脂质体进行膀胱癌细胞内转染,监测转染效率。【方法】通过软件设计针对E2F3基因的寡核苷酸链,化学合成一对编码短发夹RNA序列,长度为64个碱基。核苷酸链经退火,克隆到经BamHI、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6.1/Neo载体上,构建针对E2F3基因的RNA干扰质粒。通过双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建效果。通过不同浓度的Lipofectamin 2000及干扰质粒混合物进行膀胱癌细胞系5637细胞转染,通过绿色荧光的表达程度摸索出细胞最佳转染浓度及转染时间。【结果】重组构建的pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo载体经PCR分析及插入基因片段序列分析,结果表明64个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致。Lipofectamin 2000能够有效的进行pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo质粒的转染。【结论】载体的成功构建及膀胱癌细胞系的高效转染,为进一步研究E2F3基因在膀胱肿瘤中的功能奠定基础。
- 胡海龙韩瑞发孙岩刘利维任海林梁恩利吴长利
- 关键词：RNAIE2F3
- 膀胱癌患者血清miR-17-5p和miR-20a的表达及意义被引量：4
- 2012年
- 目的检测miR-17-5p和miR-20a在膀胱癌患者血清中的表达水平并探讨其临床意义。方法采集156例膀胱移行细胞癌患者术前以及术后1周、1月、3月和100例体检健康者静脉血标本,用荧光定量RT-PCR检测血清miR-17-5p和miR-20a的表达。结果 miR-17-5p和miR-20a在膀胱癌患者术后血清中的表达水平进行性下降(P<0.05);膀胱癌患者血清中miR-17-5p和miR-20a显著高表达,且随病理分级的升高而升高(P<0.01)。肌层浸润性膀胱癌患者血清miR-17-5p及miR-20a的表达显著高于非肌层浸润性膀胱癌(P<0.01)。结论膀胱癌患者血清miR-17-5p和miR-20a高表达,有望作为膀胱癌早期诊断及预后评价的检测指标。
- 李晓娜任海林马德庆孙岩
- 关键词：膀胱癌微小核糖核酸血清
- 膀胱尿路上皮癌细胞株E2F3基因与miR-17—5p和miR-20a的相互作用被引量：3
- 2012年
- 目的研究E2F3基因、miR-17—5p和miR-20a在膀胱尿路上皮癌细胞株中的表达及相互影响，探讨E2F3基因与miR-17—5p和miR-20a在膀胱癌发生中的作用。方法用pcDNA3．1-HA—E2F3和pAAV—siRNA—E2F3质粒在膀胱癌细胞株5637中分别过表达和敲低E2F3基因，用miR-17-5p和miR-20a的模拟物和反义寡核苷分别过表达和敲低miR-17—5p和miR-20a后，实时荧光定量PCR法检测miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的变化，蛋白质印迹法检测E2F3蛋白水平的变化。结果E2F3基因过表达后，miR-17-5p和miR-20a的2值分别为2．26±0．30和4．044-0．51，与对照组（1．00±0．00）比较差异有统计学意义（P〈0．05）；敲低E2F3后，miR-17—5p和miR-20a的2值分别为0．49±0．02和0．65±0．04，与对照组（1．00±0．00）比较差异有统计学意义（P〈0．05）；同时过表达miR．17．5p和miR-20a，E2F3的mRNA水平明显下调，蛋白质平均灰度值为55．31±7．89，对照组为103．67±13．61，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；同时敲低miR17—5P和miR-20a后，E2F3的mRNA比对照显著上调，蛋白质平均灰度值为295．68±19．25，与对照组平均灰度值为103．67±13．61比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论E2F3基因可上调miR-17—5p和miR-20a的表达，miR-17—5p和miR-20a可以下调E2F3基因的表达。E2F3基因、miR-17—5p和miR．20a在膀胱尿路上皮癌中形成调节环路，协调膀胱肿瘤细胞的生长。
- 任海林孙岩李世斌梁恩利胡海龙韩瑞发
- 关键词：微小RNA膀胱尿路上皮癌基因调控
- 膀胱移行细胞癌E2F3、miR-17-5p、miR-20a的表达及相关性分析被引量：3
- 2011年
- 目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western blot检测E2F3蛋白的表达。结果与正常膀胱黏膜比较,膀胱移行细胞癌组织及5637、T24细胞系中E2F3、miR-17-5p和miR-20a均高表达(P<0.05)。E2F3表达随着病理分级的升高逐步增多,miR-20a表达随病理分级的升高有降低趋势。5637细胞系相对T24细胞系高表达E2F3(P<0.05)。结论膀胱移行细胞癌中miR-17-5p、miR-20a和E2F3均高表达,miR-20a和miR-17-5p的表达与E2F3的增高密切相关。
- 任海林孙岩李世斌韩瑞发
- 关键词：膀胱肿瘤E2F3
- Vasohibin-1与肿瘤
- 2013年
- Vasohibin-1（VASH1）是新近发现的在血管内皮细胞中由血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维生长因子-2（FGF-2）等诱导产生的具有负反馈调节血管生成作用的蛋白因子。近年来研究表明，VASH1在多种肿瘤血管生成中扮演着重要的角色，提示其有望成为相关肿瘤诊断和治疗的分子标志物以及分子靶向治疗的有效蛋白因子。
- 赵广宁丁娜孙岩韩瑞发
- 关键词：肿瘤血管生成
- 血小板膜GPⅡb基因多态性与缺血性脑卒中相关性研究
- 目的:探讨天津地区汉族人群血小板膜GPⅡb基因多态性与缺血性脑卒中的有关性.方法:IS组458例,对照组345例,提取DNA,运用PCR-RFLP扩增和BseGI酶切分析后,2.5％琼脂糖凝胶电泳确定基因型并基因序列测定...
- 刘杰李新孙岩王栋梁王纪佐
- CYP2C19基因多态性与中国汉族人群缺血性脑卒中的发病有关
- 目的探讨细胞色素P450(CYP)2C19基因常见多态位点G681A和G636A的多态性分布及其与中国汉族人群缺血性脑卒中的相关性。方法提取299例缺血性脑卒中患者和295例健康对照组样本外周血DNA,采用聚合酶链反应-...
- 谷树珍李新孙岩韩瑞发王栋梁周君
- 直结肠癌缺失基因在肾透明细胞癌组织中的表达变化及意义被引量：1
- 2014年
- 目的观察直结肠癌缺失基因(DCC)在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达变化,并探讨其意义。方法对132例ccRCC组织及其相应的癌旁正常肾组织进行免疫组织化学染色,观察DCC表达;分析ccRCC组织中DCC表达与临床资料的相关性及其影响因素;随访患者进行生存分析。结果 DCC在ccRCC组织和癌旁正常组织中的阳性表达率分别为39.39%(52/132)、100%(132/132),P<0.05。DCC表达与ccRCC的TNM分期、病理分级、区域淋巴结转移、远处转移及大血管浸润相关(P均<0.05);与年龄、性别、肿瘤大小无关(P均>0.05)。Log-rank显示DCC阳性的ccRCC患者生存率明显高于DCC阴性者(P=0.011)。DCC表达、TNM分期、病理分级、区域淋巴结转移、远处转移及大血管浸润是ccRCC预后的独立影响因子,P均<0.05。结论 DCC在ccRCC组织中表达降低,可能与ccRCC的发生、进展相关。
- 于广洋孙岩齐灿顾兴洲杨小清韩瑞发
- 关键词：肾透明细胞癌免疫组织化学
