孙振伟
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：山西医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划山西省基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 关节软骨中最基本的解剖功能结构:软骨单位(英文)被引量：9
- 2010年
- 背景:关节软骨单位作为近年来才逐渐被重视的关节软骨功能结构,大量研究证实其在关节软骨代谢、力学传导及退变过程中发挥着重要作用,其明确的功能及作用机制问题尚需进一步深入研究。目的:对关节软骨基本解剖功能结构—软骨单位的组织形态、功能、体外消化分离及退变的相关研究进行综述。方法:计算机检索PubMed数据库2009-07前的相关研究论文进行综述,其中包括本实验室一些软骨细胞及软骨单位的相关前期研究数据和图片资料。结果与结论:与周围基质相比,细胞周基质的特异性成分为Ⅵ型胶原,新生期该成分广泛存在于细胞外基质中,随着年龄增长,Ⅵ型胶原等成分逐渐浓缩于细胞周围狭窄区域。近期,有学者利用激光共聚焦显微镜对软骨细胞及软骨单位的体内原位形态学进行定量检测,利用微管吸吮和原子力显微镜等最新技术对软骨细胞及细胞周基质的生物力学特性进行检测。更多研究发现,细胞周基质的存在明显改变了软骨细胞相关基因表达。同时,在骨关节炎软骨退变时,软骨单位及细胞周基质同样发生了相应的退行性改变。目前,尽管细胞周基质的具体功能不是很明确,但越来越多的体内外研究证实,细胞周基质的存在调整了软骨细胞的代谢及力学微环境,软骨单位为关节软骨中最基本的解剖功能结构。
- 段王平孙振伟卫小春
- 关键词：关节软骨软骨细胞
- 兔膝关节软骨单位体外酶解法消化 分离的实验研究被引量：8
- 2010年
- 目的探讨兔膝关节软骨单位(Chondron)体外酶解法消化、分离的可行性及实验方法。方法 2月龄新西兰白兔8只,随机分为2组,各4只。无菌条件下剖取双膝关节全层软骨,一组采用常规0.4%Pronase酶和0.025%Ⅱ型胶原酶依次消化为软骨细胞;另一组采用0.3%dispase酶和0.2%Ⅱ型胶原酶联合搅拌消化3h为软骨单位。利用倒置显微镜观察、细胞爬片苏木素-伊红(HE)和Ⅵ型胶原免疫荧光染色以及微系统测试分析仪进行软骨细胞及单位形态学分析,Annexin-Ⅴ/PI流式细胞术检测软骨细胞及单位早期凋亡率。结果倒置显微镜下软骨单位主要由1或几个串珠状细胞形态构成,透亮程度较差;而软骨细胞均表现为单一透亮的圆形细胞形态。软骨细胞HE染色呈爬片形态,胞质膨松透亮;软骨单位细胞周围存在一层淡染基质成分,且Ⅵ型胶原免疫荧光染色强阳性表达,界限清晰,可见大量由其包裹1、2、3或4个软骨细胞的单位形态。微系统分析仪下软骨单位由高到低均分为细胞核、细胞质及PCM三层结构,每一层梯度高度约0.4μm。急性消化软骨细胞和单位在活细胞率、早期及晚期凋亡率方面差异无统计学意义。结论 0.3%dispase酶和0.2%Ⅱ型胶原酶联合搅拌消化3h可以成功获取兔膝关节软骨单位,为其体外进一步研究奠定基础。
- 段王平孙振伟李琦任立新卫小春
- 关键词：软骨细胞酶解法
- 兔膝关节软骨单位微管吸吮黏弹性力学分析被引量：3
- 2011年
- 目的 探讨体外急性消化软骨单位的生物力学特性.方法 成年8月龄新西兰白兔8只,随机分为两组,各4只.无菌条件下剖取双膝关节全层软骨,一组采用常规质量浓度0.4%的pronase酶和质量浓度0.025%的Ⅱ型胶原酶依次消化为软骨细胞;另一组采用质量浓度0.3%的dispase酶和质量浓度0.2%的Ⅱ型胶原酶联合搅拌消化3 h为软骨单位.利用微管吸吮结合半无限体细胞力学模型定量分析急性消化软骨细胞及软骨单位黏弹性力学特性,包括平衡模量（E∞）、瞬间模量（E0）和表观黏性（μ）等黏弹性参数.结果 成年软骨细胞在0.2-0.4 kPa恒定微管负压下,表现为典型黏弹性固体特征,即在微管中产生瞬间微小变形,随后发生形率单调减小的蠕变过程,其到达平衡状态时间为（110±18）s.成年软骨单位在微管吸吮负压提高到1.0～1.2 kPa时,与软骨细胞发生同样的黏弹性蠕变行为,但其瞬间吸入微管内的长度明显减少,且到达平衡状态的时间缩短为（36.5±4.5）s.同时,软骨单位黏弹性参数平衡模量（E∞）、瞬间模量（E0）和表观黏性（μ）均明显高于软骨细胞.结论 与软骨细胞相比,成年软骨单位同样表现为黏弹性固体特征,但其黏弹性力学特性明显提高.
- 段王平孙振伟李琦郝永壮王立陈维毅卫小春
- 关键词：膝关节软骨生物力学
- 不同月龄兔膝关节软骨单位原位及体外酶解消化形态学分析
- 2016年
- 目的分析不同月龄兔膝关节软骨单位原位及体外酶解消化的形态学变化特点，探索软骨单位及细胞周基质在关节软骨退变机制中的作用。方法取新西兰白兔30只，按月龄分为3组：幼年组（2月龄）、中年组（8月龄）及老年组（31月龄），每组各10只。每组选5只兔，取其双侧膝关节股骨髁软骨进行原位组织切片形态学观察，包括HE、甲苯胺蓝及Ⅱ、Ⅵ型胶原免疫荧光染色。每组余下的5只兔，采用浓度为0．3g／L的Dispase酶和0．2g／L的Ⅱ型胶原酶联合搅拌消化3h的方法获取各组兔膝关节软骨单位，采用倒置显微镜及HE、VI型胶原免疫荧光染色等方法观察各组软骨单位体外组织形态学特点。结果随月龄增长，兔膝关节软骨组织中软骨细胞周基质界限逐渐清楚，软骨深层出现大量由细胞周基质包裹纵向排列2~4个软骨细胞的软骨单位形态。与单纯软骨细胞相比，体外酶解消化软骨单位细胞周基质成分明显、完整，保留了不同月龄软骨单位原位组织形态学特点，中、老年组软骨单位细胞周基质明显增厚，老年组由多个软骨细胞构成的软骨单位比例可达47％。结论随月龄增长，软骨单位及细胞周基质形态发生明显变化，提示细胞周基质在关节软骨成熟退变过程中维持软骨细胞微环境的作用。
- 段王平孙振伟李琦赵昱卫小春
- 关键词：膝关节软骨细胞胶原酶类
- 力学刺激对体外立体培养软骨细胞基质代谢的影响被引量：2
- 2015年
- 目的分析周期性动态压缩刺激对体外海藻酸钠立体培养关节软骨细胞基质合成代谢的影响。方法取2月龄新西兰白兔10只,酶解消化获取膝关节全层软骨细胞,以海藻酸钠凝胶立体培养,分为实验组和对照组两组,对照组行静态培养,未施加任何压力;实验组利用Flexcell-5000力学加载系统对体外培养软骨细胞进行周期性压缩应力加载,1 h/d。于加载第7、14、21天留取软骨细胞,采用实时定量聚合酶联反应对软骨细胞蛋白聚糖(aggrecan,AGG)、Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原及基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)mRNA进行定量分析。结果实验组在第7天AGG及Ⅱ型胶原mRNA的表达明显增高(P<0.05),随加载时间延长,其表达量逐渐下降,在第14、21天两组比较均无明显差异。同时,实验组在第7天时,Ⅹ型胶原及MMP-13的表达无明显差异。第14天,实验组Ⅹ型胶原及MMP-13 mRNA的表达与对照组比较明显增高(P<0.05)。结论立体培养软骨细胞在生理力学刺激7 d时可明显促进其基质合成能力,但随刺激时间的延长,其基质合成能力逐渐减弱,软骨细胞趋于肥大分化。
- 段王平苑伟孙振伟李琦赵昱卫小春
- 关键词：软骨细胞海藻酸钠代谢
- 急性消化成年兔膝关节软骨单位与软骨细胞基因表达分析
- 2023年
- 目的探讨急性消化成年兔膝关节软骨单位和软骨细胞基因表达的差异。方法8月龄新西兰兔5只,无菌条件剖取双膝关节股骨髁全层软骨组织,左侧膝关节软骨组织采用0.4%Pronase酶和0.025%Ⅱ型胶原酶依次酶解消化获取软骨细胞,右侧膝关节软骨组织采用0.3%dispase酶和0.2%Ⅱ型胶原酶联合搅拌酶解消化3 h获取兔膝关节骨单位。通过实时定量PCR对急性消化软骨细胞和软骨单位基因表达进行分析,包括基质蛋白[聚集蛋白聚糖(Agg)、胶原蛋白(Col)-2、Col-6A6、Col-10、Col-11]、MMPs及MMPs抑制因子(TIMPs)(MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3)、性别决定区Y-框蛋白9(Sox)-9及细胞骨架蛋白(黏着斑蛋白、微管蛋白、肌动蛋白)、炎症因子(IL-1β、TNF-α)。采用SPSS 16.0统计软件进行分析,采用t检验,以P<0.05表示差异具有统计学意义。结果与软骨细胞相比,软骨单位中Agg[(5.78±0.90)与(1.89±0.27),t=9.26,P<0.001]、Col-2[(6.29±0.76)与(3.06±0.60),t=7.46,P<0.001]、Col-6A6[(0.89±0.18)与(0.22±0.06),t=7.90,P<0.001]、Col-10[(3.83±0.76)与(1.00±0.26),t=7.88,P<0.001]及TIMP-1[(1.98±0.85)与(1.03±0.34),t=2.32,P=0.049]、TIMP-2[(3.46±1.50)与(1.52±1.06,t=2.36,P=0.046]、TIMP-3[(3.96±0.50)与(1.36±0.18),t=10.94,P<0.001]、Sox-9[(7.09±2.93)与(3.24±0.77),t=2.84,P=0.022]、黏着斑蛋白[(3.42±1.69)与(1.46±0.68),t=2.41,P=0.043]、微管蛋白(9.34±0.71)与(2.35±0.80),t=14.61,P<0.001]表达较高,差异具有统计学意义。与软骨细胞相比,在软骨单位中MMP-1[(1.02±0.30)与(2.67±0.45),t=6.91,P<0.001]、MMP-3[(1.21±0.32)与(2.52±0.79),t=3.44,P=0.009]、MMP-13[(1.23±0.34)与(3.42±0.86),t=5.30,P=0.007]、IL-1β[(1.02±0.14)与(2.70±0.49),t=7.37,P<0.001]、TNF-α[(0.99±0.08)与(3.15±0.54),t=8.85,P<0.001]表达低,差异具有统计学意义。Col-11、MMP-9、肌动蛋白在软骨单位及软骨细胞中表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论与单纯软骨细胞相比,急性消化软骨�
- 段王平郝永壮宋文杰赵瑞鹏任晓春赵昱李琦孙振伟李鹏翠卫小春
- 关键词：软骨细胞细胞外基质基质金属蛋白酶类
