孟庆玲
- 作品数:334 被引量:612H指数:10
- 供职机构:石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目兵团博士基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 羊口疮病毒新疆野毒株SHZ1 B2L和F1L基因的克隆及遗传进化分析
- 引言:羊口疮(Orf)又称羊接触传染性脓疱皮炎或传染性脓疮等,是由痘病毒科、副痘病毒属的羊传染性脓疱病毒所引起的一种绵羊和山羊的接触性传染病.目的:为了研究羊口疮病毒(ORFv)新疆野毒株的遗传进化情况.方法:参照Gen...
- 杨海波贺志昊孟庆玲乔军彭叶龙王国超刘昱成陈创夫
- 绵羊肺炎支原体多表位融合抗原MO-meAg5及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种绵羊肺炎支原体多表位融合抗原MO‑meAg5及其制备方法和应用,通过MO基因组的提取、表达文库的构建、筛选,MO多表位融合抗原基因的构建和在大肠杆菌中的表达,得到具有良好免疫原性的抗原蛋白,即本发明的绵羊...
- 乔军陈诚孟庆玲胡政香马玉田路路卢海亭曹旭东陈创夫
- 文献传递
- 单核细胞增生李斯特菌prfA基因重组菌的构建及其生物学特性研究被引量:1
- 2012年
- 为制备单核细胞增生李斯特菌(LM)减毒的prfA基因重组菌,本研究通过构建重组质粒pKSV7-ΔprfA-gfp,电转化至LM TA感受态细胞中,将绿色荧光蛋白基因gfp插入LM的prfA基因第25 bp~93 bp之间,在42℃和10μg/mL氯霉素的双重选择压力下,筛选LM重组菌(rLM-ΔprfA-gfp),并对其生物学特性进行鉴定。试验结果表明,重组菌与亲本菌相比具有相似的体外生长特性,溶血素基因(hly)mRNA的转录水平降低;对小鼠的毒力显著减弱,其LD50由105.53升高到109.79,对肝、脾、肾的损伤不明显;免疫保护力试验显示重组菌与LM TA灭活疫苗的保护率分别为90%和35%,表明rLM-ΔprfA-gfp比传统疫苗具有更高的保护力。本研究构建的rLM-ΔprfA-gfp具有良好的遗传稳定性,并且具有较好的免疫原性,为LM活疫苗载体和分子标记疫苗的研制奠定了基础。
- 丁波孟庆玲乔军陈创夫才学鹏张再超杨丽红
- 关键词:单核细胞增生李斯特菌同源重组
- 非洲猪瘟病毒p30-54融合蛋白基因的构建、表达及其多克隆抗体制备被引量:6
- 2018年
- 为了制备反应原性良好的非洲猪瘟病毒(ASFV)血清学诊断抗原,根据ASFV p30和p54基因序列,通过大肠杆菌密码子优化后分别体外合成全长的p30和p54基因,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)将2个基因片段串联,构建p30-54融合基因。将构建的融合基因片段克隆入p ET-28a(+)表达载体中,构建原核表达载体p ET-p30-54,转化至E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导表达,检测融合蛋白的反应原性,并制备抗该融合蛋白的多克隆抗体。SDS-PAGE检测结果显示,表达的p30-54融合蛋白分子质量为47. 1 ku; Western blot分析显示,该融合蛋白可被ASFV阳性血清特异性识别,表明其具有良好的反应原性。将p30-54融合蛋白用Ni-NTA亲和层析柱纯化后免疫小鼠,成功制备了抗ASFV p30-54融合蛋白多克隆抗体。
- 李杰张星星郭晶孟庆玲乔军张国武王晓婷李妍才学鹏
- 关键词:非洲猪瘟病毒大肠杆菌表达系统多克隆抗体反应原性
- 南疆仔猪首次暴发猪瘟和附红细胞体混合感染被引量:2
- 2001年
- 孟庆玲郭新怀乔军陈创夫
- 关键词:南疆仔猪猪瘟附红细胞体感染
- 少孢节丛孢菌新疆分离株几丁质酶AO-14基因的克隆表达被引量:1
- 2017年
- 利用RT-PCR扩增获得少孢节丛孢菌新疆分离株XJ-A1几丁质酶AO-14目的基因片段,对该基因进行克隆和分子特征分析;构建重组表达质粒p ET32a-AO14,转化到大肠杆菌进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot分析表达的重组蛋白。结果表明,AO-14基因c DNA全长为1 200 bp,编码399个氨基酸;编码蛋白几丁质酶AO-14属于糖苷水解酶18家族,具有典型的几丁质酶催化区保守序列SXGG和DGXDXDWE,氨基酸序列的第131~139为活性位点所在区域,无信号肽序列。SDS-PAGE分析结果显示,AO-14表达产物的分子质量约为60 ku;Western-blot分析结果表明,重组蛋白可以与抗少孢节丛孢菌多克隆抗体发生反应,证实在大肠杆菌中实现了少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶AO-14基因的表达,为进一步研究少孢节丛孢菌几丁质酶AO-14生物学功能奠定了基础。
- 钟文强孟庆玲乔军陈英贡莎莎才学鹏
- 关键词:少孢节丛孢菌几丁质酶克隆原核表达
- 奶牛源金黄色葡萄球菌新疆流行株的耐药特性、毒力基因及分子分型被引量:18
- 2018年
- 旨在了解引起奶牛乳房炎和子宫内膜炎的金黄色葡萄球菌(SA)新疆流行株的耐药性、毒力基因及其分子流行病学特征。对2014—2016年新疆地区155株SA奶牛临床分离株的耐药表型进行分析,并对耐甲氧西林SA(MRSA)进行鉴定;通过PCR技术对SA的耐药基因、毒力基因进行检测及SCCmec、MLST分子分型。结果在155株SA中检出22株MRSA,检出率为14.2%;MRSA流行株的耐药性明显高于甲氧西林敏感SA(MSSA);不同的毒力基因在MSSA和MRSA中的检出率有所差异;SCCmecⅠ为新疆地区SA主要基因型;MLST分型共检出14种ST型,分别为ST188、ST584、ST9、ST805、ST2373、ST968、ST2139、ST1、ST2700、ST903、ST2454、ST2990、ST63、STX,其中ST1和ST9检出率相对较高,在MSSA菌株中ST9型的检出率最高,MRSA菌株中ST1检出率最高。研究表明,新疆地区奶牛源SA中主要流行株为MSSA,但MRSA耐药性更强,且毒力基因分布多样,ST9为MSSA流行株的主要基因型,ST1-SCCmecⅠ为MRSA流行株的主要基因型。
- 孟丹孟庆玲乔军蔡扩军王登峰马帅伍晔晖才学鹏
- 关键词:金黄色葡萄球菌耐药特性毒力基因分子分型
- 反刍动物源产气荚膜梭菌新疆流行株的分离鉴定及分型研究被引量:8
- 2019年
- 为了弄清反刍动物源产气荚膜梭菌新疆流行株的生物学特性和分子特征,本研究从新疆不同地区规模化养殖场和屠宰场采集158份牛羊临床病料,进行产气荚膜梭菌的分离培养;通过形态学、生化特性、16S rRNA序列分析对产气荚膜梭菌分离株进行鉴定;利用多重PCR技术扩增产气荚膜梭菌α、β、ε、ι、β2基因,将测序结果与NCBI数据库比对进行新疆流行株的基因分型。结果从158份临床病料中共分离出产气荚膜梭菌67株,形态学、生化和16S rRNA序列分析鉴定结果均为产气荚膜梭菌。毒素基因检测表明,其中α基因检出率为100.00%(67/67),ε基因检出率为17.91%(12/67),β2基因检出率为37.31%(25/67),β、ι基因未检出。毒素基因分型可将产气荚膜梭菌新疆流行株分为A、D型,其中A型占82.09%(55/67),D型占17.91%(12/67),提示产气荚膜梭菌新疆流行株优势型别为A型。本研究为产气荚膜梭菌流行病学研究和防控提供科学依据。
- 王晓婷乔军孟庆玲蔡扩军李静李妍李杰张国武才学鹏
- 关键词:产气荚膜梭菌反刍动物
- 中国荷斯坦奶牛IFN-γ基因的克隆、分子进化及其表达
- 应用RT-PCR技术扩增荷斯坦奶牛IFN-γ基因,将获得的PCR产物克隆入pMD18-T中测序,并进行分子进化分析和原核表达。结果该基因全长501bp,编码166个氨基酸,其中前23个氨基酸残基构成信号肽序列。与不同物种...
- 乔军孟庆玲陈创夫任艳张辉
- 文献传递
- 一种捕食线虫真菌重组胞外丝氨酸蛋白酶的制备方法
- 本发明涉及一种捕食线虫真菌重组胞外丝氨酸蛋白酶的制备方法,属生物技术领域。主要包括以下步骤:根据胞外丝氨酸蛋白酶XAoz1基因序列,设计特异性引物并扩增目的片段;将扩增的目的片段PCR产物与载体pMD19-T连接构建重组...
- 孟庆玲乔军王俊伟王为升张再超蔡扩军杨丽红陈创夫赵春光
- 文献传递