宋芬芬
- 作品数:3 被引量:4H指数:1
- 供职机构:福建师范大学生命科学学院工业微生物教育部工程研究中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省教育厅资助项目福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 卷枝毛霉△6-脂肪酸脱氢酶分子机理的研究
- <正>△6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸(γ-linolenic acid,简称GLA)生物合成途径中的限速酶。本论文通过采用酶分子定向进化和理性设计等蛋白质工程和酶工程技术对△6-脂肪酸脱氢酶进行分子改造。为了探究Muco...
- 宋芬芬江贤章柯崇榕吴松刚黄建忠
- 关键词:随机突变定点突变Γ-亚麻酸
- 文献传递
- 卷枝毛霉孢子原生质体的制备与再生被引量:3
- 2011年
- 为了构建高产γ-亚麻酸的卷枝毛霉稳定遗传转化体系,利用酶解法对卷枝毛霉(Mucor circinelloides sp.)EIM-10的孢子进行原生质体制备。研究酶液组成、渗透压稳定剂、酶解温度、酶解时间等对卷枝毛霉孢子原生质体形成和再生的影响,建立了制备卷枝毛霉孢子原生质体的最适条件:1%纤维素酶和2%溶壁酶为酶解体系,0.5mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,酶解温度32℃,酶解时间2.5 h,再生培养基为0.5 mol/L NaCl高渗培养基。用双层平板培养法进行原生质体再生,在此条件下原生质体的形成量为1.2×106个/mL,再生率为70.5%。
- 陈清霞江贤章刘锦清宋芬芬黄建忠
- 关键词:Γ-亚麻酸原生质体孢子
- 毛霉△^6-脂肪酸脱氢酶随机突变文库的构建与分析被引量:1
- 2011年
- 毛霉Mucor sp.EIM-10△6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸合成途径的关键酶。为提高脂肪酸脱氢酶的活性以及研究该酶一级结构对酶活性的影响,利用易错PCR对毛霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(mcd6)进行随机突变,将PCR产物与大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载体PYMD6PMCD6连接,获得随机突变质粒PYTBMCD6,转化酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae,构建了原始库容为4.6×104 CFU的△6-脂肪酸脱氢酶的随机突变表达文库。随机突变表达文库的构建与分析为定点突变等酶蛋白的理性设计奠定基础。
- 宋芬芬江贤章陈清霞黄建忠
- 关键词:易错PCR随机突变毛霉Γ-亚麻酸