巩芷娟
- 作品数：20 被引量：32H指数：3
- 供职机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 转基因胎儿细胞在母鼠外周血中存在情况的分析
- 产前基因诊断是控制遗传病发生的一项重要措施,用于诊断的胎儿细胞主要通过羊水、绒毛细胞中分离得到,但这种途径可能对孕妇和胎儿造成一定的损伤.Walknowska等在1969年首次证实母体外周血中存在胎儿细胞,它们可以作为产...
- 颜景斌王舒巩芷娟黄淑帧
- 关键词：转基因胎儿细胞外周血
- 文献传递
- 免疫组织化学方法在人/山羊嵌合体人源细胞鉴定中的应用被引量：2
- 2005年
- 目的 在胎山羊宫内移植人造血干细胞 (hHSC)获得人 /山羊嵌合体基础上 ,应用免疫组织化学技术分析嵌合体实验山羊肝、肺和肾组织中人源细胞的生长及分化情况。方法 对 7头经荧光激活的细胞分选 (FACS)、荧光原位杂交 (FISH)和分子生物学方法鉴定为阳性的实验山羊 ,在出生后不同时间取其肝、肺和肾组织 ,制作石蜡切片 ,然后采用免疫组织化学的EnVision系统 ,用特异性人增殖期细胞核抗原 (PCNA)单抗、人肝细胞特异性抗原 (HSA)单抗及人 β 2微球蛋白 (β 2M )单抗鉴定这些组织中的人源细胞。结果 7头实验山羊的肝组织中有一定比例的PCNA和HSA抗体阳性染色细胞 ,肺和肾组织内有PCNA及 β 2M抗体阳性染色细胞 ,正常人的肝、肺和肾细胞也呈阳性染色 ,而非hHSC移植的正常山羊的肝、肺和肾组织中未见有阳性染色细胞。结论 胎山羊宫内移植hHSC所形成的嵌合体的肝脏中有人源细胞存活 ,并检测到表达人肝细胞特异抗原的人肝样细胞。免疫组化鉴定的阳性结果与分子生物学等方法的鉴定结果相符。此外 ,在嵌合体山羊肺和肾组织中也发现有人源细胞。
- 巩芷娟黄淑帧
- 关键词：嵌合体细胞鉴定HSC免疫组织化学方法增殖期细胞存活
- HSV-tk小鼠肝损伤修复及其肝癌发生机理研究
- 肝脏是人体的重要器官,肝脏的各种损害会导致肝炎、肝纤维化、肝硬化,发展为癌症。为研究肝癌的发病机制,制备能够模仿人类肝损伤复杂过程最终导致肝癌的小鼠模型,对于肝损伤以及肝癌发生的研究都有重要意义。我们在已得到小鼠血清白蛋...
- 巩芷娟
- 关键词：HSV-TK肝脏损伤肝癌造血干细胞表达谱分析
- 文献传递
- 干细胞在异种移植动物体内的归巢、分化及肝组织损伤修复的研究
- 黄淑帧曾凡一陈美珏巩芷娟钱晖胡伟任兆瑞王舒张艳颜景斌王娟肖艳萍王墨林黄文英盛敏
- 简要技术说明及主要技术性能指标：国家“863”计划项目（基金编号：2002AA216091）。 干细胞移植是一种对多种疾病有效的治疗方法，但是对于干细胞移植后在体内的生物学行为所知甚少，特别是由于难以寻找到合适配型的供...
- 关键词：
- 关键词：干细胞分化异种移植
- 不同家系HSV-tk转基因小鼠诱导肝损伤的研究
- 巩芷娟马晴雯龚秀丽蔡勤朱怡文黄淑帧曾凡一
- 人羊水祖细胞的分离和基因修饰被引量：1
- 2014年
- 探讨从孕中期羊水中分离出人羊水祖细胞的有效方法和FIX基因修饰后的效果,为血友病B的产前治疗提供可行的基础。从镜下分离出呈致密克隆生长的梭形细胞集落,经培养传代后,通过第3代慢病毒载体将hFIX导入该细胞,经酶联免疫反应(ELISA)等方法检测hFIX的表达并检测凝血活性。用这种方法得到的羊水祖细胞呈成纤维细胞样,倍增时间为39.05 h,该细胞在不仅在蛋白水平表达干细胞表面分子SSEA4,TRA1-60,在基因水平还可检测到NANOG,OCT4,SOX2mRNA的表达。羊水祖细胞导入hFIX cDNA后,能合成并分泌hFIX蛋白,传代后48 h在上清液中的浓度为20.37%±2.77%,凝血活性16.42%±1.78%。上清液中的浓度在第4天达到平台期,为50.35%±5.42%,凝血活性可达45.34%±4.67%。ELISA检测显示转染后的羊水细胞表达的hFIX蛋白的水平呈现基本稳定趋势,波动幅度较小;同时检测FIX凝血活性也与蛋白浓度呈正相关。从羊水中可以分离得到具有多能性祖细胞,转染了hFIX的羊水祖细胞在体外能持续合成有凝血功能的hFIX蛋白,为血友病B产前治疗的新方法提供了实验依据。
- 杨辰敏范书玥唐汇祥巩芷娟龚秀丽龚秀丽任兆瑞
- 关键词：血友病B人凝血因子IX基因治疗
- 宫内人造血干细胞移植修复小鼠肝损伤的实验研究
- 宫内造血干细胞移植(In Utero Hematopoietic Stem Cell Transplantation,IUHSCT)在治疗多种疾病中已取得了一定的疗效。众多疾病产前诊断的发展为IUHSCT提供了契机,而造...
- 钱晖王娟巩芷娟陈美珏任兆瑞黄淑帧
- 文献传递
- 流式细胞术检测人／山羊嵌合体中人源细胞方法的建立与应用
- 2009年
- 目的建立应用流式细胞术检测人／山羊嵌合体中人源细胞的方法。方法通过宫内移植的方法将标记有绿色荧光蛋白（GFP）的人造血干／祖细胞（MIG细胞）移植入胎山羊腹腔内，从而获得人／山羊嵌合体模型（MIG羊）。采集MIG羊的外周血，以数十种鼠抗人的抗体标记，筛选出对人源细胞特异性强而与山羊细胞无或仅有微弱交叉反应的抗体，列人流式细胞仪常规检测的首选抗体，继而在非移植山羊的外周血中加入不同比例（25％、50％、75％和100％）的人脐血细胞，用CD34^＋表面抗体标记来观察人脐血细胞和人CD34细胞的分布，以决定“门”的区域和大小；取MIG羊的肝脏，应用流式细胞术检测灌流后肝实质细胞中GFP细胞的比例及DNA含量。结果筛选出CD7、CD15、CD38、CD45、CD20、CD34、CD14和血型糖蛋白A（GPA）等8种单抗作为检测嵌合体中人源细胞的首选抗体；确定了进行流式细胞分析时“门”的大小和区域；MIG羊肝实质细胞中，GFP^＋细胞的比例为29．1％（29100／100000）；DNA含量测定结果显示MIG羊肝组织分选获得的GFP^＋细胞主要呈现2个峰，其位置与人的双峰位置相对应。结论流式细胞术是研究干细胞在体内分化、归巢和生物学特征的快速、简便、有效的方法；表面抗体以及“门”的选择对于准确检测人／山羊嵌合体中人源细胞至关重要。
- 王娟陈美珏巩芷娟任兆瑞曾凡一黄淑帧
- 关键词：流式细胞术造血干细胞移植嵌合体
- Th1/Th2细胞分化的分子机制被引量：7
- 2002年
- Th1/Th2细胞亚群的分化是不同的细胞因子、抗原及环境等综合因素作用的结果。在细胞因子参与的Th细胞分化中,JAK/STAT信号途径是细胞因子受体转导细胞内信号的一种主要机制。本文主要就Th1/Th2细胞的功能、分化的分子机制及其影响因素作一综述。
- 巩芷娟
- 关键词：TH1/TH2细胞免疫功能细胞分化分子机制
- 人造血干细胞在山羊体内的移植和扩增及分化研究被引量：10
- 2002年
- 目的 建立人 /山羊异种造血干细胞 (hematopoieticstemcell,HSC)移植模型 ,在活体水平研究人HSC移植后的扩增和分化。方法 分离人脐血HSC ,然后将其 (1× 10 5)经母羊子宫注射入胎龄为 5 5～ 6 5d的胎山羊体内 ,出生后在不同阶段应用FACS、PCR和PCR southern杂交技术 ,分析人HSC在山羊体内的扩增和分化情况。结果 在 5 0头受试胎羊中 ,39头足月分娩 ,其中 35头山羊呈现人血细胞嵌合 ,人造血细胞在山羊血液中的比率平均达到 1%～ 3% ,并稳定地保持到 10个月以上 ,山羊体内的人造血细胞表达CD34、CD14、CD2 0和血型糖蛋白A(GPA) ,但CD3、CD4、CD7、CD8和CD5 6未见表达或表达很低。结论 人HSC在山羊体内能有效地扩增至 10 0 0～ 10 0 0 0倍 ,并呈现出有限的分化。人 /山羊HSC异种模型为在活体探讨HSC移植。
- 黄淑帧曾凡一巩芷娟陆建英黄文英胡伟颜景斌方彧聃
- 关键词：HSC扩增人造血分化山羊
