庄天中
- 作品数:12 被引量:84H指数:4
- 供职机构:军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金:吉林省科技发展计划基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- PRRS病毒长春株ORF3、ORF5基因的克隆与序列分析
- 本文从长春地区采集猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疑似病料,采用RT-PCR方法特异性扩增PRRS病毒的ORF3和ORF5基因,并进行序列分析.结果表明:长春分离株ORF3基因cDNA编码区长765bp,可编码254个氨基...
- 沈国顺金宁一秦晓光庄天中马鸣潇
- 关键词:PRRSVORF3基因ORF5基因
- 文献传递
- PRRSV辽宁分离株ORF3基因的克隆与序列分析被引量:1
- 2007年
- 以辽宁地区某猪场猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病料为材料,采用RT-PCR方法特异性扩增编码猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3蛋白的ORF3基因全长cDNA,结果该分离株ORF3基因cDNA编码区长765bp,可编码254个氨基酸残基,与美洲型代表株VR-2332和欧洲型代表株LV进行同源性比较,氨基酸同源性分别为87.8%和54.5%,因此推测辽宁分离株属于美洲型。
- 刘丽霞庄天中潘树德刘金玲
- 关键词:ORF3基因克隆
- 猪繁殖与呼吸综合征、猪2型圆环病毒病二联基因疫苗的构建及实验免疫研究
- 为构建猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Sydrome,PRRS)和猪2型圆环病毒病(Porcine Circovirus type 2 disease,PCV...
- 庄天中
- 关键词:猪繁殖呼吸综合征病毒猪2型圆环病毒核酸疫苗基因疫苗
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白和SEA共表达核酸疫苗的构建及鉴定被引量:3
- 2008年
- 构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白和金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)共表达的核酸疫苗,并研究其表达产物的抗原性。将采自长春患PRRS病猪的组织剪碎充分研磨,提取病毒RNA后,用RT-PCR的方法特异性扩增PRRSV长春株的ORF6基因(M蛋白)片段。将该片段定向插入到载体pKS-SEA上,双酶切获得片段SEA-ORF6,再将其克隆到真核表达载体pVAXI中,构建重组质粒pVAXI-SEA-ORF6,转化大肠杆菌。经酶切鉴定后,将构建的阳性重组质粒在BHK细胞中表达。通过间接免疫荧光方法初步检测所表达蛋白的抗原性,用Western blot分析表达蛋白的特异性。结果表明,所构建的重组质粒pVAXI-SEA-ORF6在BHK细胞中得到了表达,为进一步研究PRRSV基因工程疫苗奠定了基础。
- 韩贞珍金宁一沈国顺庄天中孙中锋李臻付延军李太元李红文郑敏
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征核酸疫苗
- 表达PRRSV GP5、GP3和猪IL-18的重组鸡痘病毒的构建及鉴定被引量:10
- 2006年
- 目的研制安全有效的预防猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组鸡痘病毒活载体疫苗。方法将PRRSV长春株的GP5和GP3基因插入到含有猪IL-18基因的鸡痘病毒转移载体pUTAL复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移载体pUTAL-IL-18-GP5-GP3。将该重组质粒与鸡痘病毒(FPV)282-E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行同源重组。通过3次BrdU加压筛选,经PCR、RT-PCR和IFA方法鉴定重组病毒。结果从重组鸡痘病毒基因组和总RNA中扩增出340bp的目的基因片段,感染重组病毒的CEF细胞与特异性荧光抗体发生阳性反应,表明目的基因在重组鸡痘病毒中得到表达。结论已成功构建1株重组鸡痘病毒,并可正确表达PRRSVORF5/ORF3基因。
- 沈国顺金宁一秦晓光庄天中尹荣兰马鸣潇
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5鸡痘病毒
- 黄芪多糖对仔猪免疫功能的影响被引量:46
- 2007年
- 选用24头20日龄三元杂交仔猪,分为对照组和3个试验组(试验组仔猪在20日龄、35日龄时分别肌肉注射黄芪多糖2,4,6 mL),并分别于20日龄、35日龄、50日龄采血检测仔猪外周血嗜中性白细胞百分数、猪瘟抗体水平、淋巴细胞转化率等免疫指标。结果表明:应用一定剂量的黄芪多糖能极显著提高仔猪猪瘟疫苗的抗体水平(P<0.01),显著提高仔猪外周血嗜中性白细胞百分数和淋巴细胞转化率(P<0.05)。表明黄芪多糖对仔猪的免疫功能具有一定的促进作用。
- 许静波张飞何丽华庄天中沈国顺
- 关键词:黄芪多糖免疫功能嗜中性白细胞猪瘟抗体淋巴细胞转化率
- 猪繁殖与呼吸综合征的诊断被引量:1
- 2006年
- 庄天中沈国顺李克金姚桂荣
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒传染性疾病木乃伊育肥猪死亡率
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白实验性核酸疫苗的构建及其免疫原性的初步研究被引量:15
- 2006年
- 扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)长春分离株ORF5基因,并将其克隆至真核表达载体pVAX1、pVIR-IL-18的CMV启动子下游,构建成真核表达质粒。通过Western blot以及IFA检测方法确认,所构建的2个重组DNA疫苗质粒在真核细胞能进行有效的转录,并表达了目的蛋白(GP5)。同时辅以不同佐剂进行了BALB/c小鼠免疫试验,检测了免疫后的ELISA抗体水平和脾T淋巴细胞亚群数量。结果表明:共表达猪IL-18基因的核酸疫苗pVIR-IL-18-ORF5免疫后的ELISA抗体水平和脾T淋巴细胞亚群数量均优于pVAX1-ORF5,而且加佐剂实验组优于未加佐剂的实验组。
- 秦晓光金宁一沈国顺尹荣兰庄天中郑敏马鸣潇
- 关键词:ORF5基因真核表达质粒实验免疫研究
- 表达PRRSV ORF5和PCV2 ORF2基因的重组鸡痘病毒的构建及鉴定被引量:2
- 2007年
- 分别将猪圆环病毒2型的ORF2基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒的ORF5基因,插入到鸡痘病毒转移载体pUTA2-16-LacZ单一启动子和复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移质粒pUTAL-ORF5-ORF2。将该重组质粒与鸡痘病毒282-E4株共转染鸡胚成纤维细胞,进行同源重组。通过3次溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)加压筛选,经RT-PCR、IFA和Western blot鉴定,表明重组鸡痘病毒中的目的基因在鸡胚成纤维细胞中得到表达,获得一株携带有目的基因ORF2和ORF5的重组鸡痘病毒rFPV-ORF2-ORF5。
- 沈国顺金宁一庄天中韩贞珍李阳张金双
- 关键词:PRRSVORF5PCV-2鸡痘病毒
- PRRS病毒长春株ORF3、ORF5基因的克隆与序列分析
- 从长春地区采集猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疑似病料,采用RT-PCR方法特异性扩增PRRS病毒的ORF3和ORF5基因,并进行序列分析。结果表明:长春分离株ORF3基因cDNA编码区长765bD, 可编码254个氨基酸...
- 沈国顺金宁一秦晓光庄天中马鸣潇
- 关键词:ORF3基因ORF5基因
- 文献传递