张存
- 作品数：29 被引量：32H指数：3
- 供职机构：第四军医大学药学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 重组人B淋巴细胞刺激因子工程菌高密度发酵
- 为实现重组人B淋巴细胞刺激因子工程菌E.coli DH5/pKKH-BLyS的高密度、高表达发酵,首先进行了培养条件的摸索,确定了该工程菌的最佳培养pH值、诱导剂IPTG的浓度、诱导的最佳时间段、溶氧范围以及补料的流加方...
- 薛晓畅包春杰韩苇秦鑫张存曹筑荣李维娜赵玉红张英起
- 关键词：B淋巴细胞刺激因子重组大肠杆菌高密度发酵
- 文献传递
- 《现代生物技术药物》教学的优化探索
- 2017年
- 目的探讨《现代生物技术药物》教学内容和模式的改进方法。方法突出课程的"时效性",采用新的"自探共研"的教学模式,加强实验课教学。结果上述方法优化了教学内容,加强了教学互动,提高学生的实践能力。结论通过对《现代生物技术药物》现有教学内容和模式的优化,能够解决教学中存在的问题,从而提高该课程教学质量。
- 郝强张伟薛晓畅张存李维娜张英起
- 关键词：教学方法实验课教学教学体会
- 重组人B7-H1IgV疫苗对小鼠骨髓瘤细胞的抑制作用
- 2007年
- 目的:探讨重组人B7-H1IgV融合蛋白对小鼠骨髓瘤的预防和治疗效果及其对荷瘤小鼠外周血中CD4+CD25+T细胞水平的影响.方法:用重组人B7-H1IgV融合蛋白免疫小鼠,待抗体产生后接种SP2/0肿瘤细胞作为预防组;用重组人B7-H1IgV融合蛋白免疫小鼠,同时接种SP2/0肿瘤细胞作为治疗组.监测小鼠体质量、肿瘤体积的变化及生存期;检测小鼠体内CD4+CD25+T细胞水平.结果:重组人B7-H1IgV融合蛋白在预防组和治疗组中均显示出了较好的抑瘤作用,并可显著降低治疗组小鼠体内CD4+CD25+T细胞水平.结论:重组人B7-H1IgV融合蛋白能够引起小鼠的体液免疫,并抑制SP2/0肿瘤细胞的生长,从而延长荷瘤小鼠的生存期.rhB7-H1IgV融合蛋白肿瘤疫苗有望成为一种肿瘤免疫治疗的候选者.
- 陈霖王伟华张存薛晓畅李萌李维娜韩苇颜真张英起
- 关键词：小鼠骨髓瘤细胞肿瘤疫苗融合蛋白细胞水平肿瘤细胞
- 雌激素受体α抑制乳腺癌细胞转移及其机制研究
- 在所有乳腺癌中,雌激素受体α（ERα）阳性的肿瘤大约占70%。大量研究表明,通过与雌激素结合,ERα能够促进乳腺癌细胞增殖。因此,通过靶向ERα抑制肿瘤细胞增殖的内分泌治疗被广泛用于治疗ERα阳性的乳腺癌。然而越来越多的...
- 高源张存王昭维郝强李维娜张伟张英起
- 关键词：乳腺癌内分泌治疗雌激素受体Α细胞转移细胞增殖
- 文献传递
- 自探共研的教学模式在《生物技术概论》本科教学中的应用被引量：6
- 2015年
- 通过对生物技术专业学生《生物技术概论》课程"自探共研"课堂教学模式的探索,我们改革了传统课堂教学模式,指导学生在自主学习的基础上进行自主探究与合作研讨。通过营造全新的课堂模式,确立了学生的主体地位,提高了课堂的教学效率,更有利于学生系统地掌握知识、培养技能、形成创新意识,实现了高等教育中创新人才的培养目标。
- 张伟郝强张存薛晓畅李维娜张英起
- 关键词：高等教育教学改革
- 《生物技术概论》本科教学的实践与探索被引量：2
- 2015年
- 《生物技术概论》是我校生物技术专业开设的一门必修专业基础课程。学好这门课程,将为学生今后在生物技术相关领域进行研究或者工作奠定良好的理论和技术基础。作者结合自己在《生物技术概论》课程教学中的亲身体会,对教材选择、教学时间、教学方法、考核方式及课外实践等方面进行了探讨和总结。
- 张存张伟郝强薛晓畅张英起
- 关键词：教学方法教学体会
- HER-2蛋白疫苗的制备及在小鼠中诱导的抗体应答
- 2009年
- 目的:制备HER-2抗原疫苗.方法:采用RT-PCR方法从HER-2+SKBR3细胞株中获得HER-2基因胞外段编码区cDNA,构建pQE-30-HER-2原核表达载体,在大肠杆菌中表达HER-2胞外区蛋白.Ni-NTA柱亲和层析纯化后,梯度尿素复性,Western Blot鉴定.用获得的蛋白免疫小鼠,检测重组蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答.结果:构建的pQE-30-HER-2质粒经酶切和DNA测序分析,结果表明该基因的序列与设计的序列完全相同.构建的质粒转化DH5α后经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,该重组蛋白以包涵体形式表达,且与mAb Herceptin有较好的结合活性.包涵体用Ni-NTA柱亲和层析纯化后,梯度尿素复性,最大限度的获得了可溶性的HER-2胞外区蛋白.用重组蛋白免疫小鼠,得到了较高的抗体滴度.结论:成功制备了HER-2蛋白疫苗并诱导出较高抗体滴度,为下一步工作打下基础.
- 贺丽清张存吴守振李维娜张英起
- 关键词：HER-2蛋白蛋白纯化包涵体
- 人生长分化因子15的原核表达、纯化与多克隆抗体制备被引量：1
- 2015年
- 目的:原核表达并纯化、鉴定人生长分化因子15(GDF-15),制备其多克隆抗体。方法:从人结肠癌细胞系HT29的cDNA扩增出GDF-15基因片段并插入pET-32a(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达重组GDF-15,用镍亲和柱纯化,SDS-PAGE、Western印迹鉴定重组蛋白。用纯化的重组GDF-15免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,鉴定并检测其效价。结果:制备了pET-32a(+)-GDF-15表达载体;经IPTG诱导重组蛋白表达后,采用Ni亲和柱纯化蛋白,并经SDS-PAGE和免疫印迹鉴定;免疫BALB/c小鼠后获得了GDF-15多克隆抗体,ELISA检测抗体效价为1∶100000,并应用于肿瘤细胞的GDF-15检测中。结论:用基因工程和免疫学方法制备了重组人GDF-15及其多克隆抗体,为后续的分子机制和靶向治疗研究奠定了基础。
- 田钰茜张阔郝强李维娜张存张英起张伟
- 关键词：融合蛋白基因工程表达纯化多克隆抗体
- HER2基因真核表达载体的构建及其抑瘤效应研究
- 目的构建HER2基因真核表达载体,研究其对肿瘤生长的抑制作用。方法通过RT-PCR方法从HER-2+SKBR3细胞株中获得HER-2基因胞外段编码区cDNA,构建pRC-CMV-信号肽-hHER2-ECD真核载体,于大肠...
- 贺丽清张存李维娜张路张英起
- 关键词：真核表达载体转染肿瘤
- 文献传递
- 重组人白细胞介素15融合蛋白的表达、纯化及免疫原性检测被引量：2
- 2014年
- 目的:以白细胞介素15(IL-15)为靶点,研制类风湿性关节炎免疫治疗蛋白疫苗。方法:将N端融合破伤风类毒素(TT)表位的人IL-15基因克隆至带有His标签的原核表达载体pQE-30上,转化大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达,获得重组人TT-IL-15融合蛋白(简称rtIL-15);目的蛋白经镍柱亲和层析纯化后,用Western印迹和HPLC进行鉴定;将rtIL-15与氢氧化铝佐剂混合,免疫BALB/c小鼠,检测疫苗的免疫原性。结果:双酶切鉴定和核苷酸序列测定结果表明重组融合表达质粒pQE-30-TT-IL-15构建正确,重组蛋白的表达量达到菌体总蛋白的20%,主要以包涵体形式表达,经过纯化、复性后,目的蛋白纯度达到95%以上;蛋白疫苗免疫小鼠后,能诱导高滴度的特异性的IL-15抗体。结论:在大肠杆菌中表达了重组人IL-15融合蛋白疫苗,并具有良好的免疫原性。
- 李佳林张存高源郝强王舒宁张伟张伟
- 关键词：疫苗原核表达类风湿性关节炎
