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重庆某三甲医院2014-2016年铜绿假单胞菌耐药表型及金属酶、外膜孔蛋白耐药基因型分析被引量：12: 2017年; 目的检测亚胺培南耐药铜绿假单胞菌金属酶基因分布和外膜孔蛋白OprD2基因缺失情况,了解铜绿假单胞菌的耐药状况。方法收集第三军医大学大坪医院野战外科研究所2014-2016年临床分离的非重复铜绿假单胞菌1 887株,VITEK-MS质谱仪进行菌株鉴定,最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)法测定其对10种常用抗菌药物的敏感性,利用WHONET5.6软件对药敏资料进行统计分析,同时采用亚胺培南-EDTA纸片法筛选金属酶表型阳性的菌株,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)测铜绿假单胞菌金属β-内酰酶(metallo-β-lactamase,MBL)相关基因(IMP、VIM、SPM、GIM、SIM、NDM)和外膜孔蛋白OprD2基因的情况。结果 3年中铜绿假单胞菌每年的分离数量分别为756株(9.4%)、579株(9.5%)和552株(10.7%),主要来自ICU病房和呼吸内科病房,标本类型以痰液为主;2014-2016年分离出的铜绿假单胞菌对妥布霉素、庆大霉素的耐药率逐年下降,其耐药率分别从2014年的11.3%、13.2%下降至2016年的7.8%、9.0%,对左旋氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率呈上升趋势,其耐药率从2014年的10.7%、9.2%上升至2016年的23.5%、11.6%。从基因型分布情况来看,269株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中MBL基因阳性51株(18.9%),外膜孔蛋白OprD2缺失158株(58.7%);51株产酶菌株中VIM型阳性29株,SPM型阳性22株,未检测出其他基因型。结论铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率较高;产MBL和外膜孔蛋白OprD2基因缺失是引起铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因。; 李进胡韦维张峰领陈鸣邓少丽鲁卫平; 关键词：铜绿假单胞菌金属酶

潜艇密闭环境下主要微生物分布及抗菌药物敏感性比较分析被引量：3: 2017年; 目的研究潜艇水下长航前期和后期主要微生物分布及抗菌药物敏感性,为潜艇官兵卫勤保障提供依据。方法用无菌拭子采集海军某部潜艇水下长航前期和后期官兵人体表面、衣物表面和舱室表面的标本进行常规细菌、真菌培养,并对分离菌进行鉴定和体外药物敏感性实验。结果共分离出常见条件致病菌34种277株:不动杆菌属细菌110株(39.7%),假单胞菌属细菌64株(23.1%),肠杆菌科细菌45株(16.2%),葡萄球菌属细菌58株(21.0%)。对每个菌属主要细菌的分布和抗菌药物敏感性进行比较分析,其中水下长航前期鲍曼不动杆菌23株,荧光假单胞菌9株,阴沟肠杆菌8株,表皮葡萄球菌1株;水下长航后期鲍曼不动杆菌46株,荧光假单胞菌8株,阴沟肠杆菌4株,表皮葡萄球菌16株。潜艇水下航行前、后不同时期,上述4种菌分布差异存在统计学意义(X^2=13.975,P<0.05)。长航前期荧光假单胞菌和阴沟肠杆菌所占的构成比较长航后期高,长航后期鲍曼不动杆菌和表皮葡萄球菌所占的构成比较长航前期高。主要细菌药敏结果显示,潜艇水下长航前期和后期4种菌抗菌药物敏感性也存在一定的差异,并有统计学意义(P<0.05)。结论该项调查建立了潜艇密闭环境下主要细菌菌谱及抗菌药物敏感性的本底数据库,通过分析潜艇水下长航前期和后期主要细菌分布及抗菌药物敏感性,掌握潜艇密闭环境下主要细菌的耐药特点,可有针对性地选择抗感染药物,为潜艇官兵卫勤保障提供依据。; 李进张叶军丁能超刘海涛张峰领徐欢陈鸣邓少丽赖西南鲁卫平; 关键词：海军医学潜艇密闭环境细菌分布药物敏感性

LDR—ULP结合荧光定量PCR快速检测β-地中海贫血的应用研究被引量：1: 2016年; 目的以6种临床常见突变型为研究对象，建立一种快速检测β－地中海贫血的新方法。方法收集重庆市大坪医院2015年1至12月正常野生型标本50份和6种临床常见突变型标本42份，PCR扩增外周血β－珠蛋白基因，扩增产物与独立设计的连接检测反应－制式连接探针（LDR－ULP）体系杂交后，荧光定量PCR检测突变类型，琼脂糖电泳验证检测结果，标本梯度稀释法分析LDR－ULP结合荧光定量PCR方法的灵敏度，Kappa检验分析与反向膜杂交法的检测一致性。结果 LDR－ULP杂交反应与多重连接探针扩增技术（MLPA）相比可提高杂交效率2.53倍，经荧光定量PCR扩增后，6种临床常见突变型均出现了明显的扩增曲线，而正常野生型则在40个循环内均无明显扩增曲线。本方法在DNA标本大于5 pg范围内均能得到明显的扩增曲线，对92份临床外周血标本DNA进行检测，本研究方法与反向膜杂交方法结果一致率为100%。结论本研究通过LDR－ULP技术的特异性，结合荧光定量PCR方法的灵敏性和实时快速的特点，建立了一种操作简便、价格低廉、检测快速的β－地中海贫血的检测新方法。; 徐欢杨成李发科罗杰蒋文斌张峰领汪超颜保松唱凯陈鸣; 关键词：Β地中海贫血实时聚合酶链反应

不同海拔地区NICU血培养常见病原菌分布及耐药性的对比分析被引量：7: 2017年; 目的对比分析不同海拔地区新生儿重症监护病房(NICU)血培养阳性病原菌的分布与耐药性的影响因素。方法回顾性分析2015年西藏人民医院(高海拔地区医院)与重庆大坪医院(低海拔地区医院)临床NICU患儿血培养阳性主要病原菌的分布情况与耐药情况。结果 2015年西藏人民医院NICU患儿血培养阳性病原菌中,表皮葡萄球菌19株(18.4%),大肠埃希菌18株(17.5%),肺炎克雷伯菌14株(13.6%),溶血葡萄球菌14株(13.6%),嗜麦芽窄食单胞菌12株(11.7%);重庆大坪医院NICU患儿血培养病原菌主要为表皮葡萄球菌31株(19.7%),木糖氧化产碱杆菌27株(17.2%),溶血葡萄球菌18株(11.5%),肺炎克雷伯菌14株(8.9%),鲍曼不动杆菌14株(8.9%)。西藏人民医院革兰阴性杆菌检出率较高,重庆大坪医院革兰阳性球菌检出率较高,两家医院血培养主要病原菌分布差异有统计学意义(P<0.05)。重庆大坪医院耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)阳性率均明显高于西藏人民医院,血培养主要病原菌耐药情况差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同海拔环境因素对NICU患儿血培养病原菌分布及耐药性具有重要的影响作用。; 李进张峰领黎敏张涛冶生芳鲁卫平; 关键词：海拔药物耐受性药敏试验

1,3-β-D葡聚糖检测和半乳甘露聚糖试验对重症监护室患者侵袭性真菌感染的诊断价值: 目的：评价1,3-β-D葡聚糖(BG)检测和半乳甘露聚糖(GM)试验对重症监护室(ICU)患者侵袭性真菌感染(IFI)的早期诊断价值.方法：收集452例ICU高危IFI患者,分别检测患者血清1,3-β-D葡聚糖(BG)和...; 张峰领; 关键词：半乳甘露聚糖侵袭性真菌感染

潜艇密闭环境下军人皮肤表面微生物分布特征研究被引量：3: 2017年; 目的研究潜艇密闭环境下军人皮肤表面微生物分布特征和变化特点,为潜艇艇员针对性卫勤保障提供依据。方法利用样本采集拭子采集潜艇艇员皮肤表面标本122份,进行细菌培养,分纯后通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)鉴定。结果共分离细菌52种229株,真菌2种2株,主要优势条件致病菌为鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌,优势栖居菌为滕黄微球菌、奥斯陆莫拉菌、乌尔新不动杆菌、表皮葡萄球菌和黏质沙雷菌。任务中后期与任务前期相比,优势条件致病菌和栖居菌均明显增多。结论获得了潜艇密闭环境下军人皮肤表面微生物菌谱,平战时需进行针对性药品配备并采取战创伤救治措施。; 徐欢丁能超张叶军刘海涛张峰领雷国勤汪超罗杰鲁卫平赖西南邓少丽陈鸣; 关键词：潜艇微生物菌群条件致病菌基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱

全自动革兰染色仪应用效果评价: 目的：评估PREVI Color Gram全自动染色仪对临床常见细菌的革兰染色能力。方法：选用标准菌株、临床分离菌株及临床标本制作涂片，并用仪器染色与手工染色两种方法进行革兰染色，对比实验结果。结果：使用全自动革兰染色...; 黎敏张峰领王浚霁臧婉周道红王艺鲁卫平

全自动革兰染色仪应用效果评价被引量：2: 2013年; 目的评估PREVI Color Gram全自动染色仪对临床常见细菌的革兰染色能力。方法选用标准菌株、临床分离菌株及临床标本制作涂片,并用仪器染色与手工染色两种方法进行革兰染色,对比实验结果。结果使用全自动革兰染色仪染色,背景干净,着色均匀,各项指标均优于手工染色。结论 PREVI Color Gram染色仪不仅自动化程度高,省时省力,重复性好,标准化程度高,而且有利于规范操作,减少手工染色带来的人为误差。; 黎敏张峰领王浚霁臧婉周道红王艺鲁卫平; 关键词：自动化

羊布鲁杆菌菌血症患者1例被引量：1: 2013年; 布鲁杆菌是一类人畜共患感染性疾病的病原菌,它所引起的布鲁杆菌病为国家法定乙类传染病.本地区从事畜牧业的工作人员较少,发生布鲁杆菌感染的概率较小,当出现布鲁杆菌感染时,易漏诊和误诊[1].该文总结了1例布鲁杆菌菌血症患者的临床实验室诊断经验,为及时、有效发现和治疗布鲁杆菌感染提供资料.; 张峰领黎敏鲁卫平; 关键词：布鲁杆菌病菌血症法定乙类传染病杆菌感染人畜共患

不对称重组酶介导扩增结合分子信标检测金黄色葡萄球菌方法的建立与应用被引量：1: 2017年; 目的建立一种基于重组酶介导扩增技术（RAA）与分子信标相结合的病原菌恒温快速检测方法。方法方法学的建立。通过金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）所对应的基因设计相应引物及分子信标探针，不断调整引物浓度比例以确定最佳引物浓度比来进行不对称扩增，利用不对称重组酶介导扩增并与分子信标探针杂交，通过琼脂糖凝胶电泳及荧光采集观测结果。将阳性质粒以10倍的梯度稀释，检测该方法的灵敏度。利用该RAA杂交法检测大坪医院检验科微生物室保存的2016年12月的72株包含金黄色葡萄球菌及葡萄球菌属其他种细菌的菌株，以检测该方法的特异性。在特异性实验基础上添加我室保存的2016年12月的39例其他菌株进行Kappa一致性检验及临床诊断效能评价。结果当限制性引物与非限制性引物的浓度比例在1∶20时，产生单链DNA（ssDNA）的效率最高。不对称RAA扩增与分子信标探针杂交的效率明显高于对称扩增。该方法的灵敏度为20拷贝/μl。RAA杂交法能够将金黄色葡萄球菌与葡萄球菌属其他菌株区分，与传统金标准相比Kappa为0.860，一致性良好。经过对111株菌株的检测，该方法敏感度为92.5%（37/40），特异度为97.2%（69/71），阳性预测值为94.9%（37/39），阴性预测值为95.8%（69/72），阳性似然比为33.04，阴性似然比为0.077，约登指数为0.897。与传统金标准相比，Kappa为0.902，两种方法一致性良好。结论通过对不对称RAA扩增条件的优化及与分子信标探针的结合，建立了RAA杂交技术检测细菌DNA的新方法，为恒温扩增应用于临床奠定基础。; 周琳徐欢杨成张峰领罗杰蒋文斌汪超唱凯鲁卫平陈鸣; 关键词：金黄色葡萄球菌核酸扩增技术分子探针

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张峰领

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