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维生素E琥珀酸酯增强阿霉素促进人胃癌细胞凋亡作用及机制研究被引量：3: 2012年; 目的探讨维生素E琥珀酸酯(Vitamin E succinate,VES)增强阿霉素(Doxorubicin,DOXO)促进人胃癌细胞凋亡作用及其机制。方法分别以0,10μmol/L VES,1.5μmol/L DOXO,10μmol/L VES+1.5μmol/L DOXO处理人胃癌细胞株SGC-7901 24 h后,MTT法检测细胞增殖情况;倒置显微镜,流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况。Western blot法检测细胞中Fas、Bid、Bax、caspase-8、caspase-9以及PARP表达情况。结果 VES能够增强DOXO抑制胃癌细胞增殖、促进细胞发生凋亡的作用;联合作用能够增加细胞中Fas、Bax表达;促进Bid、caspase-8、caspase-9以及PARP活化(P<0.05)。结论 VES与DOXO联合应用较单一应用具有更好的抗肿瘤效果。; 张旭光赵巍王立明董瑞华吴坤; 关键词：维生素E琥珀酸酯阿霉素胃癌细胞SGC-7901 凋亡

酸性神经磷脂酶在维生素E琥珀酸酯诱导胃癌细胞凋亡过程中对内质网应激的影响被引量：1: 2013年; 目的:探讨酸性神经磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASMase)在维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导胃癌细胞凋亡过程中对内质网应激的影响。方法:常规体外培养人低分化胃癌SGC-7901细胞,将细胞分为ASMase抑制剂地昔帕明(desipramine,DES)处理组(12.5μmol/L DES作用2 h),对照组(含2%胎牛血清的RPMI-1640培养液),VES+DES组(用12.5μmol/L DES抑制ASMase活性2 h后加20μg/mL VES)以及VES处理组(20μg/mL)。以ASMase活性试剂盒检测0、1.5、3、6 h时VES+DES组及VES处理组细胞中ASMase活性。MTT法分别检测12、24和48 h时各组细胞的增殖情况。再在处理细胞24 h后,采用倒置显微镜观察各组细胞形态;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞中内质网应激相关蛋白GRP78、GRP94、Perk、p-Perk、Chop和Caspase-4的表达。结果:VES(20μg/mL)处理能够诱导细胞中ASMase活性增加,在3 h时细胞中ASMase活性达到最高,随后逐渐降低;VES+DES组细胞中ASMase活性始终维持在较低的水平。与对照组相比,DES组在各项检测中均无明显变化,而VES组与VES+DES组在处理细胞12、24与48 h后,细胞的增殖受到明显抑制(P均<0.05),并呈时间-效应趋势,且VES+DES组细胞不同时间点的相对增殖率均明显高于VES组(P均<0.05);细胞形态学显示20μg/mL VES处理细胞后,镜下死细胞明显增多,而VES+DES组死亡细胞数量较VES组减少;流式细胞术检测凋亡率显示VES处理组为39.21%±1.90%,明显高于空白对照组(3.91%±1.68%)与DES组(4.07%±1.39%)(P均<0.05),VES+DES组(19.47%±4.46%)较VES组明显降低(P<0.05);Western blot结果显示VES+DES组细胞中内质网应激相关蛋白GRP78、GRP94、p-Perk、Chop以及c-Caspase-4表达水平较单纯VES处理组降低(P均<0.05)。结论:ASMase参与VES通过内质网应激诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的过程,起促进凋亡的作用。; 董瑞华赵巍王立明张旭光吴坤; 关键词：维生素E琥珀酸酯内质网应激凋亡

维生素E琥珀酸酯通过Akt/mTOR信号通路诱导人胃癌细胞SGC-7901发生保护性自噬被引量：3: 2013年; 目的:观察维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)处理SGC-7901细胞后是否发生自噬,并探讨自噬在VES抑制细胞增殖中的作用。方法:用不同浓度(0、5、10、15、20μg/mL)VES处理SGC-7901细胞24 h后,电子显微镜观察自噬体形态;VES处理转染GFP-LC3质粒后的SGC-7901细胞,荧光显微镜观察自噬情况;Western blot检测自噬标志蛋白LC3,以及Akt/mTOR通路关键分子Akt,mTOR活性变化;采用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)和3-甲基腺苷(3-methyladenine,3-MA)处理细胞后,MTT法检测细胞的增殖能力。结果:电子显微镜观察显示经不同浓度VES处理后,细胞中出现了典型的自噬囊泡以及自噬溶酶体等自噬各阶段的形态变化;荧光显微镜观察显示GFP-LC3质粒转染后随VES处理剂量的增加,绿色点状荧光逐渐聚集增强;Western blot结果显示,VES可使LC3-Ⅱ蛋白表达增强;并下调Akt/mTOR通路关键分子Akt,mTOR的活性;MTT结果显示VES+CQ组和VES+3-MA组的细胞增殖抑制率均明显高于VES单独处理组(P均<0.05),即自噬抑制剂CQ与3-MA预处理使细胞增殖率进一步下降,提示VES诱导的肿瘤细胞自噬对肿瘤细胞增殖具有保护作用。结论:VES可以通过抑制Akt/mTOR通路活性诱导人胃癌细胞SGC-7901细胞发生自噬,且此种自噬为保护性自噬。; 侯丽颖孙燕佩张旭光赵栋吴坤; 关键词：维生素E琥珀酸酯胃癌细胞SGC-7901 自噬

维生素E琥珀酸酯通过内质网应激诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究被引量：5: 2012年; 目的:探讨内质网应激在维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡过程中的作用。方法:分别采用Western blotting和RT-PCR检测VES不同剂量(0、5、10和20μg/ml)处理SGC-7901细胞24 h和20μg/ml VES处理SGC-7901细胞不同时间对内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白(glucose regulative protein,GRP)GRP78、GRP94和内质网应激凋亡途径关键因子C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)的蛋白和mRNA表达的影响;进一步采用RNA瞬时干扰阻断CHOP的表达后用20μg/ml VES作用SGC-7901细胞24 h,采用DAPI染色法观察细胞凋亡的改变。结果:20μg/ml VES组在mRNA水平卜均诱导GRP78、GRP94和CHOP的表达增加;在蛋白水平上20μg/ml VES显著增加GRP78和CHOP的表达,GRP94表达先降低,而后又升高;阻断CHOP后VES诱导的细胞凋亡由46.3%降低为27.9%(P<0.05)。结论:内质网应激可能参与了VES诱导的SGC-7901细胞凋亡。; 黄晓莉赵艳张志宏张旭光王晓琳贾莉吴坤; 关键词：内质网应激维生素E琥珀酸酯细胞凋亡

维生素E琥珀酸酯增加阿霉素在人胃癌细胞中的蓄积被引量：1: 2012年; 目的研究维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)对阿霉素(doxorubicin,DOXO)在人胃癌细胞中蓄积量的影响。方法使用VES与DOXO单独或联合作用于人胃癌细胞株SGC-7901,收集含0.1%乙醇培养液,和用10μmol/L VES,1.5μmol/L DOXO,10μmol/L VES+1.5μmol/L DOXO处理24 h后的细胞,将含0.1%乙醇培养液的溶剂对照组和10μmol/L VES处理组细胞混合作为对照;采用肉眼观察法,流式细胞仪法,高效液相色谱法分别检测DOXO在人胃癌细胞中的蓄积情况。结果肉眼观察可见对照组细胞沉淀为白色,1.5μmol/LDOXO处理24 h后,细胞沉淀呈浅红色,VES与DOXO联合作用后,细胞沉淀量深红色。联合用药组细胞荧光强度明显高于DOXO单独处理组。VES与DOXO联合作用后,DOXO在人胃癌细胞中的蓄积相比DOXO单独作用时增加(P<0.001)。结论 VES可增加DOXO在人胃癌细胞内的蓄积。; 李怀宁高鹏张旭光吴坤; 关键词：维生素E 药物制剂

维生素E琥珀酸酯通过氧化应激诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究被引量：7: 2010年; 目的:研究维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)是否可通过氧化应激来诱导胃癌细胞凋亡及其可能机制。方法:分别用5、10和20μg/ml的VES处理胃癌SGC-7901细胞24h,同时设阴性对照组和甘露醇(活性氧抑制剂)预处理组。通过流式细胞技术、共聚焦技术和Western blot方法,检测了VES诱导SGC-7901细胞线粒体氧化损伤及细胞凋亡的情况,用相应的检测试剂盒检测细胞内活性氧和Ca2+含量变化情况。结果:不同浓度的VES对SGC-7901细胞均有诱导凋亡的作用。表现为随VES浓度的增加,SGC-7901细胞凋亡数量呈现增加的趋势,且SGC_7901细胞内活性氧含量及钙离子水平呈现增加的趋势,而线粒体膜电位逐渐下降。活性氧抑制剂甘露醇(1mmol/L)对VES诱导的胃癌细胞凋亡,和细胞内活性氧、钙浓度的增高及膜电位的降低均有显著抑制作用(P<0.05)。随VES浓度的增加,SGC_7901细胞内Bax蛋白的表达呈现上升的趋势,而Bcl-2蛋白的表达呈现下降趋势。甘露醇可显著降低胃癌SGC-7901细胞Bax蛋白的表达水平,同时增加Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。结论:VES可显著促进胃癌细胞凋亡,并且随着VES剂量的增加,VES诱导胃癌细胞凋亡的作用越强。细胞内活性氧含量增加、细胞内钙超载所导致的线粒体氧化损伤作用可能是VES诱导细胞凋亡的机制之一。; 贾莉王彦军张旭光黄晓莉吴坤; 关键词：维生素E琥珀酸酯活性氧 CA2+

内质网应激在芹菜素诱导胃癌细胞凋亡中的作用被引量：6: 2012年; 目的:探讨内质网应激在芹菜素诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用。方法:采用Western blot方法检测不同剂最(0、20、40、60、80μmol/L)芹菜素作用48 h和60μmol/L芹菜素作用不同时间(0、12、24、48 h)后对胃癌SGC-7901细胞中内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白(glucose regulative protein,GRP)GRP78、GRP94和内质网应激凋亡途径关键因子C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologousprotein,CHOP)表达的影响;并用DAPI荧光染色和流式细胞仪检测10 mmol/L内质网应激抑制剂4-苯丁酸(4-phenylbutyrie acid,PBA)加入前后细胞凋亡情况的变化。结果:芹菜素可以诱导GRP78、GRP94蛋白的表达,并随着剂量和时间的增加蛋白表达量也呈增加趋势,但芹菜素不能诱导CHOP蛋白的表达;荧光染色和流式细胞术结果显示4-PBA与20μmol/L芹菜素联合作用组的细胞凋亡率明显增加,与20μmol/L芹菜素组及溶剂对照组间的差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:内质网应激在芹菜素诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡中可能对细胞起到保护作用。; 王晓琳黄晓莉赵艳张志宏张旭光吕和吴坤; 关键词：内质网应激芹菜素细胞凋亡

哈尔滨市餐饮业从业人员食品卫生安全知识需求评估被引量：2: 2011年; 目的了解哈尔滨市餐饮业从业人员食品卫生安全知识的掌握、应用和培训需求情况,为今后开展培训提供理论依据。方法将餐馆按餐位和经营场所面积分为4类:特大型、大型、中型、小型。自行设计调查问卷,经信度和效度分析后,采取随机整群抽样的方法抽取900人采用现场发放问卷、现场填答、现场收回的方式进行调查,应用SAS统计软件对结果进行分析。结果该地区餐饮业从业人员对食品安全知识知晓率较低(15.20%～79.25%);85.25%的人回答目前没有开展过食品卫生安全知识培训;94.21%的人认为有必要开展食品卫生安全知识培训;希望通过书籍(41.86%)、电视(21.83%)、网络(17.85%)获得食品卫生安全知识。结论目前,哈尔滨市餐饮业从业人员食品卫生安全知识知晓率低,同时卫生食品安全知识培训情况较差,加强食品卫生安全知识培训是当务之急。; 吕和张静张旭光杨晓巍王晓琳吴坤; 关键词：餐饮业

联合应用VES与阿霉素促进人胃癌细胞凋亡及其机制研究: 张旭光

线粒体复合物在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中的作用被引量：1: 2012年; 目的:探讨维生素E琥珀酸酯(vitamin Esuccinate,VES)诱导人胃癌细胞凋亡过程中线粒体4种复合物的作用,并寻找对肿瘤细胞有抑制作用的关键酶。方法:体外常规培养SGC-7901细胞,分别加入线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ(complexⅠ～Ⅳ,CⅠ～Ⅳ)的抑制剂鱼藤酮(rotenone,ROT)、噻吩甲酰三氟丙酮(thenoyltrifluoroacetone,TTFA)、抗霉素A(antimycinA,AA)和叠氮钠(sodium azide,SA)2h后以20μg/mlVES诱导处理,并设阴性对照组(含0.1%乙醇的培养液),20μg/mlVES单独处理组;MTT法测定细胞增殖情况,共聚焦显微镜观察活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Westernblot法检测细胞中细胞色素C和Caspase-3表达情况。结果:与VES对照组比较,在VES诱导SGC-7901细胞凋亡的过程中,添加5μg/mlTTFA抑制线粒体复合物Ⅱ酶活性后,细胞增殖抑制率水平显著降低(P<0.05)。4个线粒体复合物抑制剂处理组ROS水平均显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率显著升高(P<0.05);但5μg/mlTTFA处理组ROS及凋亡率的升高均显著低于其他3个处理组(P均<0.05)。分别抑制CⅠ～Ⅳ酶活后,VES上调细胞中细胞色素C和Caspase-3的能力均受到抑制,其中VES+TTFA组抑制程度明显高于另外3组(P均<0.05)。结论:VES处理SGC-7901细胞,可影响线粒体复合物Ⅱ中琥珀酸脱氢酶活性,致使线粒体中ROS堆积,这可能是VES诱导人胃癌细胞凋亡的机制之一。; 张志宏黄晓莉贾莉张旭光王晓琳吴坤; 关键词：维生素E琥珀酸酯活性氧细胞凋亡

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张旭光

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