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文献类型

  • 2篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 3篇生物学

主题

  • 2篇基因
  • 1篇植物病毒
  • 1篇双链
  • 1篇双链DNA
  • 1篇探针
  • 1篇转录
  • 1篇基因转录
  • 1篇基因组
  • 1篇基因组DNA
  • 1篇检测芯片
  • 1篇寡核苷酸
  • 1篇核苷酸
  • 1篇PC
  • 1篇SYBR
  • 1篇SYBR_G...
  • 1篇MIRNA

机构

  • 3篇浙江理工大学
  • 1篇休斯敦大学

作者

  • 3篇徐根明
  • 2篇丁先锋
  • 2篇郭江峰
  • 1篇刘歆
  • 1篇朱聪
  • 1篇高晓莲

传媒

  • 2篇中国生物工程...

年份

  • 2篇2008
  • 1篇2007
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
植物病毒检测芯片的杂交条件优化被引量:5
2007年
利用芯片点样仪将5种侵染马铃薯的病毒/类病毒(苜蓿花叶病毒、黄瓜花叶病毒、黄瓜花叶病毒-卫星病毒、马铃薯病毒Y、马铃薯块茎纺锤状类病毒)的保守区寡核苷酸(Oligonucleotide,oligo)探针和PCR探针点样于玻片,并以植物18S rRNA作为内参照制成基因芯片。研究探针浓度、杂交时间、杂交温度以及点样液对芯片杂交的影响,并验证优化后病毒检测芯片的特异性。结果表明,寡核苷酸探针浓度介于5~20μmol/L之间对杂交信号强度影响不大,PCR探针浓度与杂交信号强度间呈线性关系;在45℃杂交4h时,芯片的杂交信号最强,且该条件下进行杂交对两种探针芯片的影响趋势一致;点样液中以DMSO的杂交效果最好。经过整体条件优化后的两种探针芯片在杂交检测上具有较高的特异性,适于检测植物病毒。
徐根明丁先锋朱聪郭江峰
关键词:寡核苷酸PC探针
检测miRNA的“Percellome”方法的建立及应用
miRNA是一类长约22nt,具有调节功能的非编码小RNA。它通过独特的加工成熟以及调控机制使靶基因转录后沉默。miRNA具有调控发育时序,细胞增殖与死亡以及肿瘤发生的功能,同时参与脊椎动物心脏、肌肉以及神经系统的形成。...
徐根明
关键词:基因转录
文献传递
基于SYBR Green I的双链DNA定量方法被引量:21
2008年
基于SYBR Green Ⅰ荧光染料与双链DNA(dsDNA)结合产生荧光的原理,建立一种高精度、高通量的双链DNA定量方法。将梯度稀释后的基因组DNA及已知浓度的λDNA与等体积的SYBR Green Ⅰ(4×)充分混合后,利用荧光定量PCR仪采集荧光信号,以ROX(1×)作为校正染料进行定量分析;同时利用紫外分光光度计对样品进行平行测定,比较该方法与紫外分光光度法的检测限与准确度。紫外分光光度法的检测限为2ng/μl,而SYBR Green Ⅰ荧光定量法的检测限可达到0.015ng/μl,并且在0.015-2ng/μl范围内,SYBR Green Ⅰ荧光强度与λDNA浓度呈线性关系(R2=0.9999),比紫外分光光度法灵敏100倍以上,并可准确定量低纯度的DNA样品。此方法具有重复性好、高通量的特点,仅需少量的生物样本即可满足定量要求,为分子生物学研究及临床检验等多个领域提供了一种可靠的dsDNA定量方法。
刘歆徐根明郭江峰丁先锋高晓莲
关键词:SYBR双链DNA基因组DNA
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