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细胞因子组合对肝癌细胞HepG2生长的影响: 2010年; 目的:探讨细胞因子组合在体外对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用。方法:采用正交试验法,3种细胞因子(IFN-α2a、IL-2和GM-CSF)分别选择3种浓度,共分为9组组合,利用MTT比色法,检测细胞因子组合处理96 h后,对HepG2细胞生长的抑制作用,筛选3种细胞因子最佳组合,并进行形态学观察。结果:处理96 h后,不同浓度细胞因子组合对HepG2细胞的生长均有抑制作用,最佳组合为A1B1C1,其抑制率为64.61%。显微镜下可见,细胞变圆,胞浆中颗粒增多,增殖变慢,细胞间接触不紧密,细胞周围碎片增多。结论:已筛选到3种细胞因子的最佳组合,其在体外能够抑制HepG2细胞的生长。; 徐艳玲袁彦宝高晋孙笛赵小琳金立杰; 关键词：细胞因子肝癌细胞HEPG2

甲型肝炎灭活疫苗(L-A-1减毒株)的制备及其免疫原性被引量：5: 2015年; 目的用甲型肝炎病毒（hepatitis A virus,HAV）L-A-1减毒株制备甲型肝炎灭活疫苗,并检测其免疫原性。方法用细胞工厂培养人胚肺二倍体细胞（2BS株）,感染L-A-1减毒株增殖病毒,收获含病毒的细胞,经裂解、聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）6000沉淀、三氯甲烷抽提、凝胶过滤层析纯化后,甲醛灭活,氢氧化铝佐剂吸附,制备3批试验疫苗。按照《中国药典》三部（2010版）中甲肝灭活疫苗标准进行各项检定,并进行小鼠效力试验,计算半数有效稀释倍数;将疫苗于37℃存放5、10、15、20、25和30 d,考察疫苗的加速稳定性。结果甲型肝炎病毒经提取纯化后,抗原回收率达80%以上,杂蛋白去除率达95%以上;制备的3批试验疫苗各项检定结果均符合《中国药典》三部（2010版）要求;小鼠效力试验结果显示,半数有效稀释倍数分别为进口疫苗和国产疫苗的1.25～1.40和2.02～2.26倍;37℃保存30 d,疫苗的体外相对效力仍在合格范围内。结论制备了纯度较高的甲型肝炎灭活疫苗,其在小鼠体内具有良好的免疫原性,为进一步规模化生产甲型肝炎灭活疫苗奠定了基础。; 刘令九岳立广徐艳玲惠琦徐晓霞侯丽娟李淑焱李勇夏青娟赵小琳; 关键词：甲型肝炎灭活疫苗免疫原性

冻干甲型肝炎减毒活疫苗规模化生产技术研究(细胞工厂补充申请): 刘令九赵小琳徐艳玲李淑焱侯丽娟岳立广隋红姜葳谢宝生李勇刘兵李海滨; 采用“细胞工厂”培养技术，替代传统的转瓶培养，制备冻干甲型肝炎减毒活疫苗，扩大甲型肝炎病毒培养的规模，从而实现甲肝疫苗规模化生产，提高质量。; 关键词：; 关键词：甲型肝炎减毒活疫苗细胞工厂

甲型肝炎疫苗研究进展被引量：3: 2018年; 甲型肝炎（简称“甲肝”）是由甲型肝炎病毒（hepatitis A virus,HAV）引起的一种急性传染病,主要经粪-口途径传播,四季均可发生.甲肝容易发生大规模的暴发,其流行程度因世界各地不同的卫生条件、社会经济水平而存在着显著差异[1].目前,世界范围内使用最多的甲肝疫苗为甲醛灭活疫苗和减毒活疫苗,两种甲肝疫苗均有良好的接种效果[2].本文就甲肝疫苗的研究现状、HAV分子的最新发现及对新型疫苗的研究进展予以综述.; 李昊堃徐艳玲刘令九; 关键词：甲型肝炎病毒疫苗病毒样颗粒

细胞培养/链特异性RT-PCR方法检测甲型肝炎减毒活疫苗病毒滴度被引量：2: 2015年; 目的建立检测甲型肝炎减毒活疫苗病毒滴度的细胞培养/链特异性逆转录聚合酶链式反应(strand-specific reverse transcriptase-polymerase chain reaction,strand-specific RT-PCR)方法。方法根据甲型肝炎病毒(HAV)L-A-1株基因组序列,设计5条特异性引物。将甲型肝炎减毒活疫苗原液感染2BS细胞,收获增殖高峰期的HAV,提取RNA,进行2轮链特异性PCR扩增,检测HAV复制过程中的负链RNA,通过Reed-Muench公式计算HAV病毒滴度,并对建立的细胞培养/链特异性RT-PCR法进行特异性及敏感性验证,同时用该方法检测4批冻干甲型肝炎减毒活疫苗病毒滴度,并与《中国药典》三部(2010版)中甲型肝炎减毒活疫苗病毒滴度检测方法(细胞培养时间为28 d/ELISA法)进行比较。结果 HAV负链RNA经2轮扩增获得阳性扩增条带,大小与预期相符。该方法检测HAV复制过程中的负链RNA,特异性、敏感度均较好。两种方法检测的病毒滴度接近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论建立的细胞培养/链特异性RT-PCR方法检测周期短,灵敏度、特异性好,可用于疫苗的滴度检测。; 夏青娟徐艳玲李树林禇东琳候丽娟翁滨肖想邱璐徐晓霞刘令九; 关键词：甲肝减毒活疫苗病毒滴度

双启动子双报告基因真核表达质粒的构建及鉴定被引量：1: 2020年; 目的构建双启动子双报告基因真核表达质粒,并在293T细胞中表达,为筛选携带报告基因的肿瘤细胞系提供分子工具。方法以质粒pcDNA3.1、pcDNA6-GFP、pSVA-Luc为模板,分别扩增CMV、GFP和Luc基因序列,通过In-fusion法将3个基因片段与经HindⅢ、XhoⅠ双酶切的pcDNA3.1载体连接,构建双启动子双报告基因重组真核表达质粒pC-T2A-Luc-GFP,转染293T细胞,荧光显微镜直接观察GFP的表达,化学发光仪检测Luc的表达。提取293T细胞总RNA,RT-PCR法扩增p53基因,通过In-fusion法将p53基因连接于质粒pC-T2A-Luc-GFP上,构建质粒pC-p53-T2A-Luc-GFP,转染293T细胞,Western blot法检测p53的表达,化学发光仪检测Luc的表达。结果重组真核表达质粒pC-T2A-Luc-GFP经酶切及测序鉴定构建正确,GFP和Luc双报告基因均可在293T细胞中正确表达,且可用于后续的动物模型建立。pC-p53-T2A-Luc-GFP质粒中p53的插入降低了Luc的表达,但其表达仍为阳性,不影响Luc的正常检测。结论成功构建了双启动子双报告基因真核表达质粒pC-T2A-Luc-GFP,并可在293T细胞中表达,为建立携带报告基因的肿瘤细胞系及肿瘤模型奠定了分子基础。; 崔力沙崔博沛陈磊吴星梁争论徐艳玲李克雷; 关键词：双启动子绿色荧光蛋白荧光素酶

甲型肝炎疫苗的使用现状及研究进展被引量：9: 2017年; 甲型肝炎（甲肝）是由甲肝病毒引起的以肝脏损害为主的急性、自限性肠道传染病，主要通过污染的水源和食物或人与人接触传播。甲肝疫苗是对抗甲型肝炎最有效的方法。甲肝疫苗的开发和应用对甲肝的预防和控制起到了重要的作用。此文就甲肝的流行病学、疫苗的使用现状及新型疫苗的研发等方面进行综述。; 夏青娟侯丽娟徐艳玲; 关键词：肝炎甲型甲型

一种甲型肝炎灭活疫苗及其制备方法: 本发明涉及生物技术领域，公开了一种甲型肝炎灭活疫苗的制备方法，即培养接种了甲肝病毒L-A-1减毒株的人胚肺二倍体细胞2BS细胞株至病毒增殖高峰期，用胰酶、细胞裂解液常规消化细胞，收获病毒液，经PEG沉淀、氯仿抽提，去除细...; 刘令九岳立广赵小琳徐艳玲侯丽娟李海滨刘兵岳丹蔡晖徐晓霞李景良

乙型肝炎脂肽疫苗被引量：1: 2007年; 脂肽疫苗中的脂质部分能够提高肽苗的免疫原性,在无佐剂的条件下即能有效地激发体内抗原特异性的体液和细胞免疫反应。该文主要综述了乙型肝炎脂肽疫苗研究进展,为进一步研制用于预防和治疗的新型乙型肝炎脂肽疫苗奠定基础。; 徐艳玲金立杰; 关键词：乙型肝炎细胞毒性T淋巴细胞棕榈酸

两种MEM培养基制备甲型肝炎减毒活疫苗的效果比较: 2009年; [目的]比较不同厂家MEM培养基制备甲型肝炎减毒活疫苗的效果。[方法]分别用两个厂家的MEM培养基培养人胚肺二倍体2BS细胞,显微镜下观察细胞生长情况。以美国Hyclone MEM培养基为实验组,同时以日本日水株式会社MEM培养基为对照组,其他原材料相同,制备甲型肝炎减毒活疫苗,并按《中华人民共和国药典》三部(2005版)要求进行全面检定。[结果]显微镜下观察,2BS细胞在2种MEM培养基中的生长情况差异无统计学意义,实验组病毒滴度与对照组病毒滴度比较,差异无统计学意义;其余检定指标均符合《中华人民共和国药典》三部(2005版)要求。[结论]美国Hyclone MEM培养基可以替代日本日水MEM培养基,用于甲肝疫苗的规模化生产,显著降低生产成本。; 尚瑞琴李艳坤徐艳玲李光耀董海波迂虹旭刘令九; 关键词：MEM 甲型肝炎减毒活疫苗

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