徐芬芬
- 作品数：9 被引量：13H指数：3
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞间黏附分子1通过活化MAPK通路调节小鼠间充质干细胞向脂肪细胞分化
- 2014年
- 本研究旨在探讨细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)调节小鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)向脂肪细胞分化的分子机制。分别将小鼠ICAM-1重组逆转录病毒MIGR1-ICAM-1和空载体逆转录病毒MIGR1感染小鼠间充质干细胞系C3H10T 1/2细胞,获得稳定高表达ICAM-1的C3H10T 1/2细胞(MIGR1-ICAM-1/MSC)和对照组细胞(MIGR1/MSC)。通过Western blot检测P38,ERK和JNK通路的活化情况,观察MIGR1-ICAM-1/MSC和MIGR1/MSC向脂肪细胞的诱导分化。实验组加入P38、ERK及JNK 3种信号通路抑制剂后进行培养并观察其成脂肪分化情况。以原位油红染色观察脂滴,应用real-time PCR检测成脂分化关键转录因子C/EBPα和PPARγmRNA的表达水平。结果显示,ICAM-1过表达可活化MSC的P38、ERK及JNK通路;原位油红染色及real-time PCR检测结果显示对ERK通路活化抑制可导致MIGR1-ICAM-1/MSC的C/EBPα和PPARγ的mRNA表达水平上调,脂滴变大,脂肪数量增加(P<0.01);阻断P38通路后MIGR1-ICAM-1/MSC的C/EBPα和PPARγmRNA表达水平下调,脂滴及脂肪细胞数量更小、更少(P<0.01)。结论:ICAM-1可能通过活化ERK信号通路抑制MSC的成脂分化,通过活化P38通路维持小鼠MSC成脂分化能力。
- 陈继德徐芬芬朱恒李喜梅唐博刘元林张毅
- 关键词：细胞间粘附分子1MAPK通路间充质干细胞脂肪细胞
- 向成骨细胞和成脂肪细胞分化的小鼠骨间充质干细胞调节单核细胞来源的破骨细胞发育被引量：6
- 2012年
- 为探究分化阶段的骨间充质干细胞对于破骨细胞的影响,将小鼠密质骨来源的间充质干细胞体外诱导分化,研究其对于破骨细胞发育的调控作用。从小鼠密质骨中分离培养得到间充质干细胞,将其进行成骨和成脂肪诱导1周,分别将成骨分化和成脂肪分化的间充质干细胞与CD11b+的单核细胞共同培养,并以抗酒石酸的酸性磷酸酶染色鉴定破骨细胞。结果表明:向成骨分化和成脂肪分化的间充质干细胞均可以调节单核细胞向破骨细胞分化。与未分化的间充质干细胞相比,成骨分化的间充质干细胞促进破骨细胞发育的作用减弱,而成脂肪分化的间充质干细胞促进破骨细胞发育的作用增强。结论:间充质干细胞调节破骨细胞发育的能力在其分化为不同种类细胞后发生相应变化,提示间充质干细胞通过分化为子代细胞而对破骨细胞发育发挥选择性的调节。
- 朱恒刘元林陈继德李红刘雨潇徐芬芬江小霞张毅毛宁
- 同种异体骨实质间充质干细胞(BMSC)对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)的疗效及对CD4+CD25+Treg细胞影响的研究
- 目的1.探讨白骨实质分离、培养的间充质干细胞(BMSC)对实验性自身性免疫性甲状腺炎(EAT)的治疗效果。2.通过观察静脉输注BMSC后对体内CD4+CD25+Treg细胞频数的影响探讨MSC控制自身免疫反应的作用机制。...
- 徐芬芬郑荣秀杨箐岩刘戈力孙艳培
- 一种抑制间充质干细胞分化为脂肪细胞的方法
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种抑制间充质干细胞分化为脂肪细胞的方法。通过构建含ICAM-1基因的重组逆转录病毒质粒，连同包装质粒共同转染包装细胞，收相关病毒上清并感染间充质干细胞，达到抑制间充质干细胞分化为脂肪...
- 张毅朱恒徐芬芬陈继德刘元林
- ICAM-1基因转染对小鼠间充质干细胞成脂分化功能的影响被引量：3
- 2013年
- 目的探讨细胞间黏附分子1（ICAM-1）基因转染对小鼠间充质干细胞（MSC）向脂肪细胞分化的影响。方法构建含小鼠ICAM-1基因全长DNA片段的MIGRl-ICAM-1重组逆转录病毒质粒，连同空质粒MIGRl及包装质粒ECOS分别转染T293细胞，收集相关病毒上清并感染小鼠MSC细胞系C3H10T1／2细胞，荧光倒置显微镜下观察及real．timePCR法和流式细胞术检测转染效率，将获得稳定过表达ICAM-1的C3H10T1／2细胞（C3H10T1／2-ICAM-1细胞）和转入空质粒的C3H10T1／2细胞（C3H10T1／2-MIGRl细胞）向脂肪细胞诱导分化，以原位油红O染色和real—timePCR检测成脂分化能力及其关键转录因子C／EBPoL和PPARy mRNA的表达水平。结果成功构建MIGRl-ICAM一1逆转录病毒载体；感染C3H10T1／2细胞获得稳定过表达ICAM-1的C3H10T1／2-ICAM-1细胞和空载体对照C3H10T1／2一MIGRl细胞。成脂细胞诱导分化结果显示，无论是在自分化还是诱导分化组中，C3H10T1／2-ICAM-1细胞与转染空载体的细胞相比脂滴变小，其脂肪细胞数量分别为[（3．2±0．5）／孔、（12．2±3．8）／孔]，显著少于转染空载体的细胞[（11．2±0．4）／孔、（51．3±2．8）／孔]（P〈0．05）；C3H10T1／2一ICAM一1细胞自分化组和诱导分化组C／EBPoLmRNA表达水平分别为1．2±0．7和2．9±0．9）；PPAR-,／mRNA表达水平分别为1557．6±70．2和7547．0±442．2，均较转染空载体细胞的5．8±0．5和23．0±2．3：2453．04-215．6和9856．3±542．2下调（P〈0．05）。结论细胞表面ICAM一1过表达可抑制小鼠MSC的成脂分化。
- 徐芬芬朱恒陈继德刘元林刘雨潇郑荣秀张毅
- 关键词：基因ICAM-1间充质干细胞基因转染细胞分化
- 过表达ICAM-1对间充质干细胞生物学特性影响及自身免疫性甲状腺炎动物模型的建立
- 目的:
1.构建重组逆转录病毒载体MIGR1-ICAM-1，探讨细胞间粘附分子1(Intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM-1)基因转染对小鼠间充质干细胞(Mesenc...
- 徐芬芬
- 关键词：自身免疫性甲状腺炎
- 小鼠VCAM-1表达载体的构建及稳定高表达间充质干细胞系C3H10T 1/2的建立被引量：2
- 2014年
- 本研究旨在构建小鼠血管细胞粘附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)的逆转录病毒载体,通过转染建立稳定高表达VCAM-1的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC),并初步探讨VCAM-1基因过表达对MSC免疫学特性的影响。以小鼠脾脏组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠VCAM-1基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的cDNA片段插入PMSCVmigr-1逆转录病毒载体,构建重组逆转录病毒表达质粒PMSCVmigr-1-mVCAM-1,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染技术转染293细胞,收获含有病毒颗粒的上清;用病毒上清感染间充质干细胞系(C3H10T 1/2)并检测其表达。采用3H-TdR掺入法测定高表达VCAM-1的MSC在淋巴母细胞转化实验中对淋巴细胞增殖的抑制作用。结果表明:酶切和测序鉴定证实,正确构建了小鼠VCAM-1的重组逆转录病毒表达质粒。逆转录病毒上清感染MSC后流式细胞术检测到目的基因VCAM-1在MSC表面高表达。高表达VCAM-1的MSC对刀豆素A诱导的淋巴细胞增殖具有显著抑制作用,且呈剂量效应关系。结论:成功构建了小鼠VCAM-1基因的重组逆转录病毒质粒并使其在MSC中稳定高表达。高表达VCAM-1的MSC对体外淋巴细胞增殖具有很强的抑制效果。本课题为进一步研究VCAM-1基因调控MSC干预免疫相关性疾病奠定了实验基础。
- 陈慧朱恒褚亚男徐芬芬刘元林唐博李喜梅胡亮钉张毅
- 关键词：间充质干细胞基因表达
- 异基因骨髓间充质干细胞治疗实验性自身免疫性甲状腺炎疗效评价及作用机制被引量：3
- 2014年
- 目的探讨异基因骨髓间充质干细胞(BM-MSC)对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)的治疗作用及其机制。方法利用猪甲状腺球蛋白和弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠,制备EAT小鼠模型。BM-MSC干预组小鼠在建模同时尾静脉输注同源BM-MSC,每只3×105,每周1次,共4次。所有小鼠均在免疫后28 d处死,分离甲状腺组织,石蜡切片、HE染色后进行病理学分析;分离血清,放射免疫分析法检测甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺微粒体抗体(TmAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、总3,5,3',5'-四碘甲腺原氨酸(TT4)、总3,5,3'-三碘甲腺原氨酸(TT3)、干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素10(IL-10)水平。结果 1与正常对照组比较,模型组小鼠TgAb,TmAb和TPOAb均明显增高,TT4水平明显降低(P<0.05),TT3水平无明显差异,甲状腺组织破坏明显,提示成功建立EAT小鼠模型。2正常对照组甲状腺组织未见淋巴细胞浸润;模型组甲状腺组织淋巴细胞浸润明显;BM-MSC干预组可见甲状腺组织淋巴细胞浸润,浸润程度较模型组减轻。3与正常对照组相比,模型组血清中TgAb,TmAb,TPOAb和IFN-γ水平增高,IL-10水平降低(P<0.05);BM-MSC干预组与模型组相比,血清中TgAb,TmAb和TPOAb水平明显降低,TT4水平明显升高(P<0.05),TT3水平无明显差异,IFN-γ表达水平降低,IL-10表达水平增高(P<0.05)。结论 BM-MSC对EAT具有一定的治疗作用,其机制有可能与其调节辅助性T细胞(Th)1/Th2免疫平衡有关。
- 禇亚男徐芬芬江晓宇倪永青汪李慧张毅郑荣秀
- 关键词：间充质干细胞骨髓自身抗体
- 一种抑制间充质干细胞分化为脂肪细胞的方法
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种抑制间充质干细胞分化为脂肪细胞的方法。通过构建含ICAM-1基因的重组逆转录病毒质粒，连同包装质粒共同转染包装细胞，收相关病毒上清并感染间充质干细胞，达到抑制间充质干细胞分化为脂肪...
- 张毅朱恒徐芬芬陈继德刘元林
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