李巧艳
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中山大学中山医学院生物化学教研室更多>>
- 发文基金：广州市医药卫生科技项目广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 2008年广州市婴幼儿诺如病毒感染流行特征及基因型研究被引量：7
- 2010年
- 目的了解广州市5岁以下婴幼儿诺如病毒感染状况及对诺如病毒阳性株进行基因型分析。方法收集广州市2008年5家病毒性腹泻监测点医院的门诊临床诊断为病毒性腹泻的5岁以下患儿临床资料及粪便标本692份,采用ELISA方法检测轮状病毒、腺病毒、星状病毒和诺如病毒抗原,将诺如病毒抗原阳性的标本用RT-PCR方法进行诺如病毒核酸扩增,阳性产物回收、纯化并测序,结合GenBank中的相关序列进行型别流行特点分析。结果 692份标本中,ELISA方法检测4种病毒的阳性率分别为轮状病毒31.9%(221/692)、诺如病毒21.2%(147/692)、腺病毒6.1%(42/692)、星状病毒1.2%(8/692),混合感染占6.8%(47/692)。诺如病毒腹泻病例发病高峰在9—11月份,占51.7%(76/147),2岁以下病例数占91.8%(135/147)。临床症状以腹泻、呕吐、发热、腹痛为主。147份诺如病毒ELISA阳性标本中RT-PCR方法检测诺如病毒核酸阳性率为84.4%(124/147),经测序及与GenBank中的相关序列比对,证实124份均属诺如病毒GⅡ遗传组,其中1份是GⅡ2型,其余均为GⅡ4型,GⅡ4型中又有不同分支。结论诺如病毒是广州市5岁以下儿童病毒性腹泻的常见病原之一,仅次于轮状病毒,常见于2岁以下婴幼儿,流行优势株基因型为GⅡ4型。
- 沈纪川刘于飞李巧艳谢华萍蒋力云吴新伟魏跃红杨智聪
- 关键词：诺如病毒基因型病毒性疾病腹泻
- 利用荧光RT-PCR法检测环境水体中诺如病毒被引量：4
- 2011年
- 目的：建立一种快速敏感的方法检测环境水体中的诺如病毒。方法：选择诺如病毒阳性的粪便标本,10倍梯度稀释,模拟被污染水体,用16%聚乙二醇8000-0.525mol/L NaCl溶液浓缩病毒,用实时定量RT-PCR检测病毒核酸。结果：重组质粒标准品做标准曲线,标准品拷贝数的对数（x）与Ct值的关系为Ct=39.886-3.485x,相关系数R2=0.995,灵敏度为100拷贝,比普通RT-PCR高1个数量级,比ELISA高3个数量级,重复性佳,回收率在14%~44%之间,随着样品中NV浓度降低而下降,。用实时定量RT-PCR、常规RT-PCR和ELISA方法检测了42份现场水样,阳性率分别为40%、24%和0。结论：为环境水体中诺如病毒的检测提供了一种灵敏、可行的定量检测方法。
- 李巧艳吴新伟刘于飞伍业健高国全杨霞
- 关键词：诺如病毒环境水体实时定量RT-PCR
- RNA干扰抑制登革病毒复制的研究被引量：2
- 2010年
- 为了研究RNA干扰(RNAi)对Ⅰ型登革病毒(DENV-1)在白纹伊蚊C6/36细胞内复制的影响,本研究设计并合成针对I型登革病毒Pr M基因的小干扰RNA,以脂质体法转染入C6/36细胞后,用DENV-1感染已转染的细胞,观察细胞病变效应,MTT法检测细胞存活率,荧光定量RT-PCR检测登革病毒RNA含量。结果表明:转染siRNA的C6/36细胞在受登革病毒攻击7天后仍无明显细胞病变效应,细胞存活率比对照组提高2.26倍,细胞内登革病毒RNA拷贝数比对照组降低约97.54%。说明利用RNA干扰技术能有效抑制登革病毒核酸在C6/36细胞内复制,并对细胞具有一定保护作用,为登革热的防治提供了新的思路。
- 岳锦亚吴新伟伍业健李向忠蒋力云李巧艳李磊杨霞
- 关键词：登革病毒C6/36细胞RNA干扰荧光定量PCR
- 广州市1起诺如病毒急性胃肠炎暴发的实验室检测被引量：1
- 2010年
- 目的确定1起学校急性胃肠炎暴发原因。方法采集病例粪便标本,直饮水标本,采用实时荧光定量(Real-time)PCR和RT-PCR方法检测病毒核酸,阳性标本测序分析。结果 5份粪便标本中3份呈诺如病毒阳性,2份直饮水标本均呈诺如病毒阳性。3份病例粪便标本病毒株核苷酸序列一致,均为GⅡ-4型,提示病毒同源。结论对诺如病毒进行核酸检测,证实该疫情为一起诺如病毒GⅡ-4型引起的急性胃肠炎暴发。
- 谢华萍李巧艳康燕耿进妹鲁恩洁伍业健狄飚
- 关键词：诺如病毒急性胃肠炎
- 广州市门诊5岁以下儿童诺如病毒感染基因型分析被引量：2
- 2010年
- 目的了解2007-2008年广州市监测点医院门诊5岁以下儿童病毒性腹泻散发病例中诺如病毒感染状况及基因型别。方法收集广州市2007-2008年监测点医院门诊临床诊断为病毒性腹泻的患儿临床资料及粪便标本954份,采用ELISA方法检测诺如病毒、轮状病毒,将诺如病毒抗原阳性的标本用RT-PCR方法进行诺如病毒核酸扩增,将阳性产物回收、纯化并测序,结合GenBank中的相关序列进行型别流行特点分析。结果 954份标本中,ELISA方法检测各种病毒的抗原阳性率为诺如病毒18.8%(179/954),其中07年12.2%(32/262),08年21.2%(147/692),轮状病毒30.8%。诺如病毒腹泻病例发病高峰在8～11月份,2岁以下病例数占全部病例的91.6%,病例集中在6～23月龄。RT-PCR方法检测诺如病毒核酸阳性率为80.4%(144/179),144份诺如病毒核酸阳性标本经测序及与GenBank中的相关序列比对证实有1份是GⅡ2型,其余全部为GⅡ4型。结论诺如病毒是广州市门诊5岁以下儿童病毒性腹泻的常见病原之一,仅次于轮状病毒,常见于2岁以下婴幼儿,2007-2008年流行优势株基因型为GⅡ4型。
- 沈纪川刘于飞谢华萍李巧艳蒋力云吴新伟魏跃红陈坤才
- 关键词：诺如病毒基因型病毒性腹泻
- 2009-2011年广州环境与临床标本中诺如病毒的分子流行病学特征被引量：4
- 2013年
- 目的调查2009--2011年广州诺如病毒的分子流行病学特征。方法分别收集广州市2010年1月至2011年5月的环境水样183份、2009年6月至2011年6月的海产品1162份和2009年7月至2010年12月的腹泻患者粪便标本1066份，以实时荧光定量逆转录PCR（qRT—PCR）检测诺如病毒，对扩增阳性标本测序后与GenBank中的诺如病毒参考株比较，绘制系统进化树。结果环境水样中诺如病毒阳性率为19．67％（36／183），海产品中的阳性率为8．26％（96／1162），腹泻患者粪便标本中的阳性率为37．05％（395／1066）；扩增阳性样品中的诺如病毒可分为10株代表株，其中7个代表株（共208份标本）的基因型为G24型，并且水样、海产品和粪便标本同源性很高，相似度达94％～100％。结论广州诺如病毒流行优势株为G24型，同时标本中阳性率较高。
- 罗兰吴新伟刘于飞李巧艳谢华萍伍业健李磊蒋力云杨霞
- 关键词：诺罗病毒分子流行病学聚合酶链反应
